温硕洋
- 作品数：45 被引量：307H指数：11
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程文化科学更多>>
- 黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究被引量：2
- 2007年
- 【目的】Drosomycin(Drs)是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外,在黑腹果蝇基因组中,还存在另外6条Drs同系物的基因序列,对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSαβ模体结构。为鉴定Drs及其6个同系物的抗性功能差异,研究其分子结构与功能的关系,需要对这些同系物基因进行克隆表达,获得有生物学活性的纯化样品。【方法】本文采用PCR分段互补合成的方法准确地获得了Drs同系物基因,并克隆至pET-3C载体上,转化到宿主菌E.coli Origami(DE3)中进行诱导表达,表达产物经阳离子CM SepharoseTM Fast Flow层析、凝胶过滤Sephacryl S-100 High Resolution层析和包涵体的复性及Sephadex G-25脱盐等纯化处理后,进行抑菌活性检测。【结果】经纯化的7个Drs同系物的短肽样品,除Drs-lI外,其它的Drs同系物样品对供试真菌水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)均有较强的抑制作用。【结论】表明本研究中使用的纯化及复性方法对具有多个二硫键的小分子多肽是比较有效的。
- 杨婉莹温硕洋邓小娟叶明强夏庆友曹阳黄亚东
- 关键词：黑腹果蝇抗真菌肽同系物蛋白纯化
- 果蝇Drosomycin抗真菌肽基因家族新成员drol的研究
- 迄今为止,由文献报道和GenBank登录的果蝇Drosomyicn抗真菌肽因子家族有2个,Drosomycin(NP23901、P41964、A55824、AAN94970、AAN94972、1MYN、AAN94971)...
- 肖业臣温硕洋曹阳钟仰进魏剑波庄楚雄刘吉平邓小娟
- 关键词：昆虫抗真菌肽黑腹果蝇
- 文献传递
- 国内烟粉虱B生物型的分布及其控制措施研究被引量：37
- 2003年
- 收集了国内 15个省 2 6个不同地区的烟粉虱种群 ,根据有关报道合成了一个随即引物H16 ,对不同地区的烟粉虱DNA进行了RAPD -PCR扩增 ,根据扩增结果分析了不同烟粉虱种群的生物型。结果表明 ,在以上不同省市和地区中 ,北京、山东等 11个省 19个地区都有烟粉虱B型的分布。以烟粉虱B型为防治对象 ,比较了使用高效氯氰菊酯、高效大功臣 2种化学农药 ,和应用桨角蚜小蜂、粉虱座壳孢 2种寄生性天敌 ,对黄瓜上烟粉虱种群的控制效果 ,结果表明在一个世代内 ,喷施高效大功臣 (10 0 0× ,1次 ) ,喷施粉虱座壳孢 (5× 10 6 个孢子 /ml,2次 ) ,和释放桨角蚜小蜂 (3头雌蜂 /株 ,2次 ) ,对烟粉虱种群的控制作用分别达到 78.2 1%、95 .74 %和 5 7.5 8% ,三者都可以对烟粉虱起到较好的防治效果。
- 邱宝利任顺祥肖燕温硕洋Mandour N.S.
- 关键词：烟粉虱
- 黑腹果蝇抗真菌肽Drosomycin同系物的免疫原性和抗真菌活性被引量：2
- 2006年
- 通过黑腹果蝇Drosophila melanogaster抗真菌肽Drosomycin(Drs)及其同系物Drs-lC和Drs-lE的抗体制备及Western blotting结果,分析了Drs同系物的免疫原性与其抗真菌活性的关系。研究采用了2种技术路线,分别将Drs、Drs-lC和Drs-lE基因构建成与细胞生长因子基因afgf融合的重组表达质粒pET-afgf-Drs、pET-afgf-C和pET-afgf-E,以及通过基因同向串连获得重组表达质粒pRSET-2Drs、-4Drs、-6Drs和pRSET-2E、-4E、-6E,并将这些重组表达质粒转化到BL21(DE3)plysS受体菌进行诱导表达。分离纯化后的融合蛋白afgf-Drs、afgf-C和afgf-E以及串连蛋白4Drs、4Drs-lE分别免疫小白鼠获得相应的抗血清。Western blotting免疫原性检测结果表明,Drs及其同系物与各自的抗血清具有强的免疫反应,同时相互间也有交叉免疫反应,提示它们具有相似的主要抗原决定簇,这些抗原决定簇可能与抗真菌活性无关。同系物之间抗真菌活性的差异可能来源于某些细微结构上的差异。
- 杨婉莹刘文权邓小娟段云黄亚东温硕洋夏庆友曹阳
- 关键词：黑腹果蝇抗真菌肽同系物免疫原性抗真菌活性
- 一种桔小实蝇抗菌肽及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种桔小实蝇抗菌肽，是从桔小实蝇蛹分离得到的一种多肽，分子量2.3道尔顿，等电点11.43，所述抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明同时公开了所述桔小实蝇抗菌肽制备方法，采用混合菌液诱导桔小...
- 党向利温硕洋易辉玉杨婉莹邓小娟曹阳
- 文献传递
- 果蝇Drosomycin基因(drs)的克隆鉴定被引量：2
- 2004年
- 为了克隆Drosomycin基因用于今后定点诱变修饰和生物技术开发研究 ,根据果蝇Drosomycin基因 (drs)的cDNA序列 ,分别设计Drosomycin基因含和不含信号肽序列的两对特异引物Drs1/Drs2、Dro3/Dro4 ,由黑腹果蝇(DrosophilamelanogasterMeigen)基因组PCR扩增获得目的片段drs和dro ,克隆到表达载体pET 2 1d(+)和pHIL S1之中。经测序表明 ,克隆的drs与文献报道的drs序列仅在 +116位点有 1个碱基的差异 (A/T) ,而克隆的dro序列则与文献报道的dro序列完全相同。
- 钟仰进肖业臣魏剑波温硕洋黄亚东邓小娟桑延霞段云曹阳
- 关键词：果蝇昆虫抗真菌肽信号肽克隆
- 黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC在原核中的表达及抗菌活性的初步测定
- 2006年
- 对黑腹果蝇(Drosophila m elanogaster)抗真菌肽基因Drs和它的同系物基因Drs-lC在pET-21d载体中与T7.Tag标签序列进行了融合表达,并对融合表达产物进行Xa因子切割前后的抗菌活性测定。首先通过长引物PCR获得5′端带有Xa因子识别切割序列的Drs和Drs-lC,分别克隆至pET-21d表达载体上,然后转化E.coliO rigam i(DE3),筛选得到阳性克隆。以IPTG诱导目的基因与载体上的T7.Tag标签序列融合表达,将表达产物进行初步纯化后,以Xa因子进行切割处理,然后测定处理前后样品的抗菌活性。结果显示与T7.Tag标签序列融合表达的D rs、D rs-lC样品和经Xa因子切割后的样品对供试真菌黄色镰刀菌(Fusarium culm orum)、尖孢镰孢菌(Fusarium oxs-porum)和粗糙脉孢菌(Neuropora crassa)均有明显的抑制作用。
- 邓小娟桑延霞杨婉莹钟仰进黄亚东曹阳温硕洋
- 关键词：黑腹果蝇抗真菌肽基因DRS抗菌活性
- PCR－SSCP在小家鼠群体遗传多态性研究中的应用
- 李菁菁张亚平温硕洋
- 关键词：小家鼠遗传多态性聚合酶链反应单链构象多态性
- 管氏肿腿蜂离体培养研究被引量：16
- 1994年
- 管氏肿腿蜂Scleroderma guani是多种天牛幼虫及蛹的体外寄生蜂,张连芹等(1991)认为利用管氏肿腿蜂防治天牛是一种简单易行、经济有效的防治方法。为进一步开发利用这种天敌昆虫资源,我们对该蜂进行了离体培养的研究。寄生昆虫在生物防治上的重要作用激起了人们对寄生昆虫人工培养的极大兴趣,国内外对这方面的研究均有不少的报道。在外寄生昆虫方面,Thompson(1975)用全纯饲料成功地将壮腰姬蜂Exeristes roborator从卵培养至成蜂;谢中能等(1989)用实用饲料成功地培养了紫胶白虫茧蜂Bracon greeni和麦蛾茧蜂Bracon hebetor。本文报道用实用饲料培养管氏肿腿蜂的研究结果。
- 李理温硕洋谢以权李艳红
- 关键词：管氏肿腿蜂寄生蜂离体培养天敌
- 不同抗性品系桔小实蝇乙酰胆碱酯酶特征和ace基因突变研究
- 在我国华南地区小实蝇Bactrocera(Bactrocera)dorsalis(Hendel)是危害水果的最主要的害虫之一,目前化学药剂防治仍是该虫常用的方法,但随之产生的抗药性使防治效果面临新的挑战。一般为了延缓抗性...
- 姜建军温硕洋曾玲
- 关键词：桔小实蝇交互抗性乙酰胆碱酯酶ACE基因
- 文献传递
