沈伟
- 作品数:6 被引量:24H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 生物反应器大规模培养脊髓灰质炎病毒被引量:7
- 2008年
- 目的应用生物反应器大规模培养脊髓灰质炎病毒。方法用7L、75L和550L生物反应器逐级放大培养Vero细胞,每天取样进行细胞计数。在550L生物反应器中培养脊髓灰质炎病毒,观察细胞病变,并检测病毒感染性滴度。结果一级细胞培养(灌流培养法)、二级细胞培养(循环培养法)和三级细胞培养(批培养法)的平均细胞密度分别为2.79×106、2.38×106和1.04×106个/ml,一级培养的细胞倍增数最高;病毒培养体积达350L,病毒收获液滴度大于7.625lgCCID50∕ml。结论通过三级放大工艺,可大规模培养脊髓灰质炎病毒。
- 衡燮李桂兰奚光跃温嘉纳沈伟何秀莲唐成丽廖国阳姜述德孙明波
- 关键词:生物反应器脊髓灰质炎病毒微载体VERO细胞
- 用微载体培养Vero细胞制备狂犬疫苗被引量:11
- 2006年
- 目的研究微载体培养Vero细胞生产狂犬疫苗。方法搅拌式生物反应器培养Vero细胞,待细胞在微载体上长成单层后,用狂犬病毒aG株感染细胞。培养5d后,开始灌流收获病毒液,每天取样测定病毒滴度。经灭活后制备成试验疫苗,进行效力试验。结果3次培养,细胞密度均达到1×106/ml以上,病毒滴度都在106LD50以上,3批试验疫苗的效价分别达到5.88、6.49和5.98IU/ml。结论在生物反应罐中用微载体培养Vero细胞制备狂犬疫苗工艺合理,所获免疫原性良好,适用于工业化生产,有较好的应用前景。
- 李平忠沈伟余芬温嘉纳黄成孙明波
- 关键词:生物反应器病毒培养狂犬疫苗
- 运用细胞培养/链特异性逆转录聚合酶链式反应法进行甲肝灭活疫苗的灭活验证试验被引量:2
- 2008年
- 目的建立一种快速灵敏特异的甲肝灭活疫苗的灭活验证方法。方法运用细胞培养/链特异性逆转录聚合酶链式反应对甲肝灭活疫苗进行灭活验证,并与传统的ELISA法及巢式RT-PCR检测甲肝全RNA进行比较。结果细胞培养/链特异性逆转录聚合酶链式反应法对甲肝灭活疫苗进行灭活验证,结果全为阴性,与传统的ELISA法结果相同。而采用巢式RT-PCR检测甲肝全RNA的方法对甲肝灭活疫苗进行灭活验证,则出现一些假阳性结果。结论细胞培养,链特异性逆转录聚合酶链式反应法是一种简便、快速、灵敏的甲肝灭活疫苗的灭活验证方法。大大缩短了检测周期,用于疫苗的常规检测有较好前景。
- 周健姬光温嘉纳李佳沈伟郭自全廖国阳姜述德孙明波
- 关键词:肝炎甲型疫苗灭活细胞培养逆转录聚合酶链反应
- 用微载体培养Vero细胞制备狂犬疫苗
- 目的:研究微载体培养Vero细胞生产狂犬疫苗.
方法:用搅拌式生物反应器培养Vero细胞,待细胞在微载体上长成单层后,用狂犬病毒aG株感染细胞.培养五天后,开始灌流收获病毒液,每天取样测定病毒滴度.经灭活后制备...
- 李平忠沈伟余芬温嘉纳黄成孙明波
- 关键词:生物反应器病毒培养狂犬疫苗微载体培养
- 文献传递
- 脊髓灰质炎病毒Sabin株工作种子批基因鉴别被引量:2
- 2006年
- 目的研究脊髓灰质炎病毒Sabin株基因鉴别的方法。方法分别进行脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ型Sabin株和Ⅲ型Pfizer株3个型的工作种子批病毒RT-PCR,对扩增产物进行SDS-PAGE及测序。结果Ⅰ、Ⅱ型Sabin株和Ⅲ型Pfizer株3个型的工作种子批病毒分别出现了97、71和53bp的电泳带,与预期结果相符。扩增基因序列与报道的脊髓灰质炎病毒减毒株序列一致。结论RT-PCR可以用于脊髓灰质炎病毒Sabin株毒株鉴别。
- 廖国阳孙明波余芬沈伟赵玮蒋燕军姜述德
- 关键词:脊髓灰质炎病毒RT-PCR
- 生物制品生产中6种常用液体培养基高压灭菌前后的pH变化特征分析被引量:3
- 2015年
- 目的:通过检测、分析改良马丁培养基等6种生物制品生产中常用液体培养基高压灭菌前后的pH变化,给实际配制培养基时预调pH的范围提供参考。方法:将培养基干粉按要求配制,用0.5 mol·L^(-1)NaOH溶液调节成不同的pH梯度(6.80~8.10),经高压灭菌后检测pH值,并对结果进行对比、分析、统计。结果:改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、麦康凯肉汤培养基、胰酪胨大豆肉汤培养基4种灭菌后pH降低,其中,改良马丁培养基的下降幅度最大;营养肉汤培养基灭菌后pH升高;精氨酸支原体肉汤培养基变化不显著。结论:不同培养基灭菌前后的pH变化差异较大,根据pH检测结果变化规律得出各培养基高压灭菌前最适的pH预调范围。
- 余芬孙明波沈伟杨兴鹅杨普珊伍胤杰李佳杨希
- 关键词:培养基高压灭菌