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实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠体内Th17细胞检测的意义被引量：6: 2011年; 目的:研究Th17细胞及相关细胞因子IL-17在实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thy-roiditis,EAT)小鼠体内的变化。方法:利用小鼠甲状腺球蛋白(Tg)建立小鼠EAT模型。应用流式细胞术(FCM)分析小鼠脾脏细胞中Th17细胞的比例。采用qRT-PCR检测小鼠脾脏细胞中IL-17 mRNA水平。结果:EAT小鼠脾脏细胞中Th17细胞的比例为(2.44±0.56)%,明显高于正常对照组小鼠(1.12±0.37)%(t=2.712,P<0.05);EAT小鼠脾脏细胞中IL-17 mRNA的含量也明显高于正常对照组(t=3.458,P<0.05)。结论:Th17细胞及其相关细胞因子IL-17 mRNA水平在EAT小鼠体内明显升高,并与疾病的发生密切相关。; 马斌田洁刘艳刘青玲马洁汤新逸魏衍财吴彩云柳迎昭许化溪陈永昌王胜军; 关键词：TH17细胞 IL-17 实验性自身免疫性甲状腺炎

新型辅助性CD4+T细胞亚群在自身免疫性疾病中的作用及机制研究: 王胜军吕力为田洁马洁毛朝明汤新逸马斌; 项目属于医学领域的基础与临床研究。自身免疫性疾病是危害中国公众健康的一类重大疾病，临床主要采用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗，副作用大，疗效局限，并且严重影响病人生活质量。因此，阐明自身免疫性疾病发病机制，寻找致病性靶向分子...; 关键词：; 关键词：自身免疫性疾病糖皮质激素免疫抑制剂治疗

Bcl-6基因3'UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-346靶向关系的验证被引量：1: 2014年; 目的:构建Bcl-6基因3'非编码区(3'untranslated region,3'UTR)荧光素酶报告质粒,分析miR-346对Bcl-6的调控作用。方法:通过PicTar数据库和miRanda数据库预测可能与Bcl-6基因3'UTR作用的miRNA;将人工合成的Bcl-6基因3'UTR区序列克隆至荧光素酶报告质粒psiCHECK-2;将重组荧光素酶报告质粒和miRNA mimics共转染293T细胞,用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果:PicTar数据库和miRanda数据库预测交叉结果显示,miR-346与Bcl-6基因3'UTR存在互补结合位点;构建的荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确;重组质粒和miR-346 mimics共转染293T细胞后,荧光素酶报告质粒表达的荧光素酶活性降低66%左右。结论:成功构建了Bcl-6基因3'UTR荧光素酶报告质粒,筛选出和Bcl-6表达相关的miRNA即miR-346。; 陈娟袁靖吴晶晶田洁汤新逸芮棵田新宇张悦刘海冰耿丽娜杨珺许化溪王胜军; 关键词：BCL-6基因微小RNA

氧化偶氮甲烷和葡聚糖硫酸钠致肠炎相关性结直肠癌小鼠模型的建立被引量：2: 2015年; 目的:建立肠炎相关性结直肠癌的小鼠模型。方法:给予小鼠单次小剂量腹腔注射氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)联合2%葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulpate,DSS)自由饮用,建立肠炎相关性结直肠癌小鼠模型。对照组小鼠给予PBS腹腔注射后普通饮水。每天观察症状,2%DSS 5 d,普通饮水16 d,此21 d为1个循环,共进行4个循环,结束后,断颈处死小鼠,取脾脏、肠系膜淋巴结、结肠,观察并比较两组小鼠脾脏,肠系膜淋巴结大体改变和结肠HE染色情况。结果:与对照组比较,实验组小鼠脾脏、肠系膜淋巴结明显增大,结肠远端出现肿瘤。HE染色结果显示,实验组发病小鼠结肠黏膜层及黏膜下层出现广泛的炎症细胞浸润,腺体组织结构紊乱、破坏,出现腺管样结构,具有组织异型性。结论:单剂量AOM与DSS联合使用可在短期内诱导小鼠结肠肿瘤的发生。; 张悦田洁田新宇汤新逸杨珺耿丽娜马洁许化溪王胜军; 关键词：氧化偶氮甲烷葡聚糖硫酸钠结肠癌动物模型

滤泡调节性T细胞在肺癌移植瘤小鼠体内的变化及意义被引量：1: 2016年; 目的:研究滤泡调节性T细胞(follicular regulatory T cells,Tfr)在肺癌移植瘤小鼠体内的变化,并探讨肿瘤微环境对Tfr细胞的影响。方法:采用皮下注射Lewis肺癌细胞株的方式建立肺癌移植瘤小鼠模型,通过流式细胞术检测小鼠腹壁引流淋巴结和肿瘤组织中Tfr细胞以及CD4+CXCR5+T细胞的比例,分析Tfr/CD4+CXCR5+T细胞比值的变化。结果:肺癌移植瘤小鼠腹壁引流淋巴结中Tfr细胞的比例为(4.13±0.35)%,较正常对照组小鼠[(1.97±0.26)%]明显增加(t=4.985,P<0.01),并且Tfr/CD4+CXCR5+T细胞比值为0.39±0.03,较正常对照组小鼠(0.21±0.02)明显增加(t=5.148,P<0.01)。在肿瘤发展的第14天,肺癌移植瘤小鼠肿瘤组织中Tfr细胞比例增加尤为显著,与第7天相比差异具有统计学意义(t=5.617,P<0.01)。结论:肺癌移植瘤小鼠体内Tfr细胞比例的增加以及Tfr/CD4+CXCR5+T细胞比值的失衡,预示着Tfr细胞可能参与小鼠肺癌移植瘤的发展进程。; 冯玎琦汤新逸张悦马洁田洁许化溪王胜军; 关键词：肺癌移植瘤

GITRL基因SNP-rs2236876分型方法的比较: 2015年; 目的:对3种单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)分型方法进行比较,选择准确有效的SNP分型方法对GITRL SNP-rs2236876A/G进行基因分型。方法:采用Taqman-MGB探针法,限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(cleaved amplification polymorphism sequence-tagged sites,PCR-RFLP)法和直接测序法对GITRL SNPrs2236876A/G进行分型并比较。结果:PCR-RLFP法分型结果直接通过电泳图可见,适合少量的实验对象;TaqmanMGB探针法通过不同的荧光区分不同的基因型,适合大量的实验对象;直接测序法交由测序公司测定,样本数量浮动范围较大,费用较高。结论:Taqman-MGB探针法适用于GITRL基因rs2236876A/G基因分型,PCR-RFLP法适用于基因分型结果的验证,直接测序法适用于鉴定有争议的PCR-RFLP法的验证结果。; 吴晶晶仝佳陈娟袁靖田洁汤新逸王胜军; 关键词：TAQMAN-MGB探针 PCR-RFLP

IL-17^+ γδT细胞被引量：3: 2011年; IL-17是一种重要的炎症介质,最近研究显示,除了Th17细胞,γδT细胞也能够产生IL-17,并且比αβT细胞产生得更为迅速。与Th17细胞一样,γδT细胞产生IL-17的能力受多种因素影响,并和某些与IL-17相关的疾病有着密切联系,这对相关疾病的致病机制有了新认识,也为这些疾病的治疗提供了新思路。现就近年来对γδT细胞产生IL-17能力的研究,以及这群细胞和疾病的关系进行简要综述。; 汤新逸王胜军; 关键词：ΓΔT细胞 IL-17 自身免疫性疾病肿瘤

痤疮丙酸杆菌通过促进Th1细胞和Th17细胞的分化诱发肉芽肿形成被引量：4: 2015年; 目的研究痤疮丙酸杆菌(P.acnes)在树突状细胞成熟、辅助性T(Th)细胞亚群分化过程中的免疫刺激作用,进而探讨其诱发肉芽肿的可能机制。方法以P.acnes刺激小鼠骨髓源性树突状细胞(BMDC),流式细胞术检测其表面共刺激分子(CD40、CD80、CD86)和主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测白细胞介素12(IL-12)、IL-6和IL-23的mRNA水平,ELISA检测上清中IL-12、IL-6和IL-23的蛋白浓度;P.acnes与BMDC、CD4^+T细胞共培养,流式细胞术检测Th1细胞、Th17细胞分化情况;小鼠尾静脉注射加热灭活的P.acnes,建立肝脏肉芽肿模型,并通过qRT-PCR检测肝脏组织中IL-17、γ干扰素(IFN-γ)的mRNA水平。结果经P.acnes作用后,BMDC表面CD40、CD80、CD86和MHCⅡ分子的表达增强,上清中IL-12、IL-6和IL-23的水平增高,促进CD4^+T细胞向Th1细胞、Th17细胞分化;P.acnes诱导建立的肝脏肉芽肿中,IL-17和IFN-γ的mRNA表达增强。结论 P.acnes可通过活化BMDC,促进Th1细胞、Th17细胞的分化,进而导致炎性肉芽肿形成。; 葛丽艳田洁汤新逸耿丽娜杨珺许化溪王胜军仝佳; 关键词：痤疮丙酸杆菌肉芽肿辅助性T细胞

人TSHR289基因重组腺病毒的制备与鉴定: 2016年; 目的:制备腺病毒AdE-GFP-hTSHR289,并进行鉴定。方法:限制性内切酶NotⅠ和XhoⅠ双酶切分别处理p BluescriptⅡSK(+)-h TSHR289和pAdTrack-CMV,回收纯化目的片段hTSHR289,将其插入至线性化的pAdTrackCMV大片段中;限制性内切酶PmeⅠ线性化pAdTrack-hTSHR289与大肠埃希菌BJ5183中pAdEasy-1质粒同源重组,限制性内切酶PacⅠ酶切验证;将阳性重组质粒转染至人胚肾293A细胞,以包装获得表达hTSHR289的腺病毒AdEGFP-hTSHR289;TCID50法检测重组腺病毒滴度。结果:成功地将hTSHR289重组至腺病毒载体,获得携带hTSHR289重组腺病毒载体,包装出携带hTSHR289基因的腺病毒,滴度达3.5×109pfu/m L。结论:制备得到携带h TSHR289的重组腺病毒。; 周军马洁汤新逸田洁许化溪王胜军; 关键词：促甲状腺激素受体腺病毒病毒滴度

皮肌炎和多发性肌炎的临床研究被引量：6: 2012年; 目的探讨皮肌炎(DM)和多发性肌炎(PM)的临床表现及辅助检查的特点。方法回顾性分析2007年8月至2011年10月住院的25例DM/PM患者的临床表现以及实验室检查、胸部CT、肌电图等检查。结果 DM/PM临床表现多样,以特征性皮疹和肌肉症状、肺部病变为主。抗核抗体滴度与肌酸激酶水平呈正相关。重叠其他结缔组织疾病DM发生肾损害的可能性高。结论对DM/PM患者需要进行完整的临床、实验室及仪器检查,以深入了解病情,从而为诊断及治疗提供依据。; 吴蔚汤新逸尤敏; 关键词：皮肌炎多发性肌炎

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汤新逸

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