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水稻OsMPK14基因的克隆和表达特性分析: 促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是生物体内信号转导的重要组分,受多种生物及非生物胁迫的刺激活化。通过cDNA文库筛选和RT-PCR扩增的方法,从水稻幼穗中...; 毕佳佳李咪咪尚飞李辉张帆梁卫红; 关键词：水稻基因克隆逆境胁迫; 文献传递

水稻OsRacD蛋白G15V、T20N点突变对其细胞定位的影响及其与靶蛋白的相互作用被引量：2: 2009年; OsRacD是水稻小GTP结合蛋白Rho家族成员,功能之一是作为"分子开关",通过控制花粉管的延伸生长,参与光敏核不育水稻光周期育性转换过程.为研究该蛋白的作用机制,采用重叠延伸PCR方法,分别在其GTPase结构域中引入G15V、T20N点突变,模拟GTP和GDP结合形式的OsRacD.进一步构建了受控于CaMV35S的与绿色荧光蛋白融合表达的双元植物表达载体;采用农杆菌介导法转化洋葱表皮细胞,在荧光显微镜下观察蛋白在活细胞内定位的特点.结果显示,野生型蛋白在细胞质和细胞膜都有分布,组成型激活的蛋白主要分布在细胞膜上,而失活型蛋白则大都集中到细胞核周围.蛋白相互作用的酵母双杂交体系分析显示,OsRacD及其2个突变体具有不同的靶蛋白结合特性.研究证实,水稻OsRacD蛋白G15V和T20N点突变不仅影响其在活细胞内的定位,而且也影响了与靶蛋白的相互作用.说明处于不同鸟苷酸结合状态的OsRacD具有不同的胞内定位方式,可能通过结合不同的靶蛋白,引发不同的细胞应答事件.; 梁卫红刘肖飞毕佳佳吕超慧彭威风; 关键词：定点突变绿色荧光蛋白蛋白相互作用

水稻OsMPK14基因的克隆和表达特性分析: 促分裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）是生物体内信号转导的重要组分,受多种生物及非生物胁迫的诱导表达。通过cDNA文库筛选的方法,从水稻幼穗中分离了OsMPK1...; 毕佳佳梁卫红; 关键词：水稻促分裂原活化蛋白激酶逆境胁迫; 文献传递

两种水稻OsRhoGDIs基因启动子的克隆及分析被引量：8: 2008年; 【目的】OsRacD属于水稻小GTP结合蛋白Rho家族,是与光敏核不育水稻光周期育性转换相关的关键基因,功能之一是通过控制花粉管的延伸生长影响水稻的育性。在采用酵母双杂交技术,筛选到与OsRacD相互作用的两种鸟苷酸解离抑制因子的编码基因OsRhoGDI1和OsRhoGDI2的基础上,为深入分析OsRhoGDIs的调控机制以及与OsRacD的关系,对其上游调控序列进行克隆和分析。【方法】采用PCR方法克隆了OsRhoGDI1和OsRhoGDI2的上游调控序列,并利用网络工具对启动子顺式作用元件进行预测。【结果】两种OsRhoGDIs基因具有与激素应答、光调控及胁迫诱导应答相关元件,且一些元件相同或相似;OsRhoGDIs与OsRacD启动子元件的比较显示,都具有与花粉管萌发相关的多个元件。【结论】OsRhoGDIs的表达调控方式复杂,可能受多条信号通路的共同调控;同时也提示OsRhoGDIs与OsRacD基因可能通过协同表达控制光敏核不育水稻的育性。; 张利娟梁卫红刘悦霞刘肖飞侯成千毕佳佳; 关键词：水稻 RHO 顺式作用元件

OsMPK14基因与水稻非生物胁迫应答有关: 促分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)是生物体内信号转导的重要组分,受多种生物及非生物胁迫的诱导表达。利用RT-PCR方法克隆了水稻(Oryza sativa ...; 毕佳佳梁卫红; 关键词：水稻克隆非生物胁迫; 文献传递

水稻促分裂原活化蛋白激酶家族的研究进展被引量：7: 2009年; 促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是生物体内信号转导途径MAPK级联反应的重要组分,通过传递胞内外信号,介导生物及非生物胁迫反应、激素反应、调控细胞分化和发育过程。对水稻(Oryza sativa L.)MAPK家族的结构、作用机制、分类以及在抗逆应答、生长发育中的作用进行了综述,为水稻MAPK的深入研究和应用提供参考。; 毕佳佳梁卫红; 关键词：水稻 MAP激酶

水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK14的克隆及表达分析被引量：5: 2010年; 促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是生物体内信号转导的重要组分,受多种生物及非生物胁迫的刺激活化。利用RT-PCR方法克隆了水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK14的cDNA序列(GenBank登录号为GQ265780)。该序列全长1660bp,包含1个1629bp的开放阅读框,编码蛋白由542个氨基酸组成,包含典型的蛋白激酶结构域及磷酸化位点TDY基序。序列比对和分析显示,OsMPK14基因位于水稻第5染色体上,其编码区由9个外显子和8个内含子组成。采用半定量RT-PCR技术,检测了光照、低温、高盐、干旱和脱落酸对该基因在水稻地上部分和根中表达的影响。结果显示高盐、低温、脱落酸都能上调其表达,而干旱对其表达具有微弱的抑制效应,光照可以降低该基因在水稻地上部分的表达,提高在根中的表达。基因可能在水稻非生物胁迫的应答中具有重要作用,其表达受多种因素调控。; 梁卫红毕佳佳彭威风张帆石宏浩李莉; 关键词：水稻基因克隆逆境胁迫

2种水稻OsRhoGDIs基因在幼穗组织中的原位杂交分析被引量：2: 2009年; 水稻OsRhoGDI1和OsRhoGDI2基因是通过酵母双杂交技术从幼穗中分离的新基因,其编码产物是与水稻Rho蛋白OsRacD相互作用的一类活性调控蛋白。为研究这2种OsRhoGDIs基因在幼穗组织中的表达特点,通过PCR扩增的方法制备了探针模板,并采用随机引物标记的方法,以地高辛对探针进行了标记,进而利用这2种探针与水稻幼穗组织石蜡切片进行RNA原位杂交,结果表明,OsRhoGDI1和OsRhoGDI2在幼穗组织中都有表达,但OsRhoGDI2基因的转录水平明显高于OsRhoGDI1基因,提示OsRhoGDI2可能是调控OsRacD活性的主要类型。; 刘洪梅梁卫红毕佳佳; 关键词：水稻

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毕佳佳