梁小敏
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脑源性神经营养因子前体基因重组蛋白的原核表达和活性鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的：原核表达脑源性神经营养因子前体（ proBDNF ）基因重组蛋白，并检测其生物学活性。方法通过PCR方法扩增大鼠点突变型基因的脑源性神经营养因子前体的cDNA，克隆到质粒pET-28a中，在大肠杆菌BL21中表达，其表达产物经Western印迹方法鉴别，用DAPI法检测其对PC12细胞凋亡的影响。结果重组基因的扩增产物在大肠杆菌中获得表达，表达产物符合目的蛋白分子量并能够与特异性抗体反应。原核表达的proBDNF基因重组蛋白能够诱导PC12细胞的凋亡。结论成功地在大肠杆菌BL21中表达了proBDNF基因重组蛋白，该蛋白能够对促进PC12细胞的凋亡，具有生物毒性。
- 陈甲梁小敏许志强
- 关键词：PCR原核表达
- 快速眼动期睡眠剥夺对大鼠海马齿状回神经元增殖与凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨快速眼动期(rapid eye movement,REM)睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠海马齿状回神经元增殖与凋亡的影响。方法 45只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为3组:①普通鼠笼对照组(CC,n=15);②睡眠剥夺组(SD,n=15);③睡眠恢复组(RS,n=15)。采用改良多平台睡眠剥夺法连续72 h剥夺大鼠REM睡眠后,利用BrdU标记增殖细胞,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马齿状回神经元增殖情况,并利用免疫荧光染色检测大鼠海马齿状回新生神经元标记物微管相关蛋白(doublecortin,DCX)和星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达情况。采用TUNEL法观察大鼠海马神经元凋亡情况。结果免疫组化结果显示SD组及RS组每张切片BrdU阳性细胞平均数均明显少于CC组(P<0.01),但是RS组与SD组相比无显著性差异(P>0.05)。免疫荧光染色结果显示,DCX阳性细胞在BrdU阳性细胞中所占比例最大,各组间BrdU/DCX、BrdU/GFAP双阳性细胞的百分比相差不显著(P>0.05)。CC组、SD组及RS组各组海马区均未见TUNEL阳性细胞。结论 REM睡眠剥夺抑制海马齿状回神经元增殖,短期睡眠恢复后无显著改善。REM睡眠剥夺对海马齿状回神经元的分化和凋亡无影响。
- 梁小敏陈甲许志强
- 关键词：海马齿状回凋亡
