柳璐
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Cdh1-APC在中枢神经系统中的作用
- 2006年
- 姚文龙柳璐张传汉
- 关键词：中枢神经系统APC细胞周期调控诺贝尔奖获得者生物学效应
- 永生化神经前体细胞治疗大鼠局灶性脑缺血的实验研究
- 2008年
- 目的探讨永生化神经前体细胞（INPC）移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响及移植细胞在模型大鼠脑内的存活以及分化情况。方法雄性sD大鼠24只，均采用线栓法建立大脑中动脉缺血（MCAO）模型，随机分为2组（每组12只）：脑缺血对照组、INPC移植组。缺血后3d通过立体定位注射方法分别将等体积的磷酸盐缓冲液、5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记的INPC悬液注射到2组大鼠纹状体缺血半暗带区。缺血再灌注后对大鼠进行神经损害严重程度评分（NSS）。细胞移植后1和4周分别随机处死2组大鼠各6只，取脑组织制作冰冻切片，通过免疫荧光双标技术检测BrdU、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）双阳性细胞和BrdU、神经元特异性烯醇化酶（NSE）双阳性细胞，观察INPC在移植区域的存活及分化情况。结果脑缺血对照组与INPC移植组比较，细胞移植前后各时点的NSS评分差异均无统计学意义（均P〉0．05）。INPC移植组细胞移植后1及4周，均可在移植针道附近及缺血灶周围检测到聚集较明显的BrdU免疫荧光染色阳性的植入细胞，并观察到BrdU染色阳性细胞扩散至全脑，免疫荧光双标技术检测见部分细胞为BrdU、GFAP双阳性的星形胶质细胞或BrdU、NSE双阳性神经元。结论INPC可在局灶性脑缺血大鼠脑内存活并分化为神经元和星形胶质细胞。
- 钱巍姚文龙祝畅柳璐桂伶俐刘志恒张传汉
- 关键词：抗原干细胞脑缺血
- 腹腔镜手术麻醉的研究进展被引量：14
- 2007年
- 腹腔镜手术具有创伤小、术后疼痛轻、恢复快等优点，已逐渐被广大外科医师和患者所接受。随着腹腔镜手术技术的不断提高和腹腔镜手术器械的不断改进，腹腔镜手术在外科领域的应用也得到了突飞猛进的发展，但其对人体生理反应具有一定的影响，主要是由于CO2气腹引起的呼吸循环系统改变。腹腔镜手术的这些特点，对麻醉提出了更高的要求。
- 柳璐张传汉
- 关键词：腹腔镜手术麻醉方法CO2气腹术后疼痛
- 大鼠永生化神经前体细胞CDH1小干扰RNA真核载体的构建被引量：1
- 2008年
- 目的构建大鼠永生化神经前体细胞（INPC）CDH1小干扰RNA（siRNA）真核载体。方法根据大鼠CDH1基因的编码序列设计3个小发夹RNA（shRNA）干扰序列及1个阴性对照序列，根据pENTR／H1／TO中间载体说明书设计并合成相应的DNA单链，退火后分别连接到pENTR／H1／TO线性载体上，形成完整载体，提取CDH1 siRNA真核载体后（分别为CDH1 siRNA1、CDH1 siRNA2、CDH1 siRNA3和CDH1 siRNA对照），进行DNA测序鉴定。采用Lipofectamine 2000法，分别将成功构建的CDH1 siRNA真核载体转染大鼠INPC，于转染24h和48h时计算INPC转染效率=INPC成功转染数／细胞总数，于转染48h时提取细胞总RNA，采用实时定量PCR法检测INPC CDH1 mRNA的表达。结果经DNA测序鉴定构建的3个CDH1 siRNA真核载体和1个阴性对照载体所插入的RNA干扰序列均正确，无碱基突变或缺失；INPC转染24h与48h时转染效率分别为（54±5）％和（36±4）％；CDH1 sinNA2转染INPC 48h时INPC CDH1 mRNA表达水平较CDH1 siRNA3降低，且两者均低于CDH1 siRNA1（P〈0．05）。结论本研究成功构建大鼠INPC CDH1 siRNA真核载体。
- 姚文龙张传汉柳璐祝畅邱瑾桂伶俐田玉科
- 关键词：干细胞
- Cdh1小干扰RNA载体的构建及鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的:构建Cdh1小干扰RNA载体,并将其转染至Hela细胞进行鉴定.方法:根据pENTRTM/H1/TO中间载体要求,设计Cdh1小干扰RNA载体的干扰序列及无干扰作用的对照序列,合成相应的DNA单链,退火后连接到pENTRTM/H1/TO线性载体,形成完整载体,进行测序鉴定.分别将测序鉴定成功的Cdh1小干扰RNA载体及对照载体采用脂质体法转染Hela细胞,转染后48h提取细胞总RNA及细胞总蛋白,采用实时定量PCR和WesternBlot检测Cdh1的表达.结果:经测序鉴定成功构建Cdh1小干扰RNA载体和对照载体,分别命名为pENTR/shCdh1和pENTR/shcontrol.与未转染及转染pENTR/shcontrol的Hela细胞相比,转染pENTR/shCdh1的Hela细胞Cdh1表达降低(P<0.05).结论:成功构建Cdh1小干扰RNA载体,并能下调Hela细胞Cdh1的表达.
- 柳璐姚文龙祝畅桂伶俐张传汉
- 关键词：细胞周期细胞分裂HELA细胞
- APC-Cdh1在中枢神经系统中的表达分布特点被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨细胞周期末期促进复合物(APC)-Cdh1在中枢神经系统中的表达分布特点.方法:取健康成年雄性SD大鼠脑组织制作冰冻切片,免疫组化染色检测Cdh1的表达部位;免疫荧光双标检测Cdh1表达的细胞定位情况.取出生24h内乳鼠,原代培养神经元及神经干细胞,免疫组化检测NeuN进行神经元鉴定;Nestin染色进行神经干细胞初步鉴定;采用GFAP,MAP2免疫组化染色鉴定NSC分化特性.分别提取神经干细胞与神经元总RNA,采用实时定量PCR检测APC2个调节亚基Cdh1与CDC20的表达.结果:大鼠脑片免疫组化DAB染色显示Cdh1在海马、皮层均有大量表达,免疫荧光双标显示Cdh1表达主要定位于神经元中,星形胶质细胞表达较少.与神经干细胞相比,神经元中Cdh1 mRNA表达升高[(1.00±0.05)vs(2.10±0.07),P<0.05],但CDC20 mRNA几乎没有表达(1.00±0.04,0.02±0.01,P<0.05).结论:APC-Cdh1在大鼠脑组织中有大量表达,主要定位于神经元,且神经元中Cdh1表达高于神经干细胞.
- 姚文龙张传汉钱巍邱瑾柳璐祝畅桂伶俐
- 关键词：神经元神经干细胞
