杨珂
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省科技厅资助项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨髓间充质干细胞移植治疗小型猪急性心肌梗死的转归
- 2011年
- 【目的】探讨超顺磁性氧化铁(SPIO)活体动态示踪小型猪骨髓间充质干细胞(MSC)移植治疗心肌梗死的可行性。【方法】采用密度梯度离心法获取小型猪自体骨髓MSC,用携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体转染MSC,并用SPIO体外标记MSC-GFP。采用经皮球囊封堵法制备急性心肌梗死(AMI)模型,双标记的MSC经冠脉移植入小型猪心肌梗死区域,移植后24h、3周、8周在MRI下进行活体动态示踪。【结果】普鲁士蓝染色显示25μgFe/mLSPIO与0.8μL/mL阳离子脂质体联合对MSC的标记率达95%～100%,对绿色荧光蛋白的表达无影响,标记细胞仍均具备多向分化能力;冠脉移植MSC后24h,3周,8周MRI成像均可见梗死区域的室间隔有明显区别于周边组织的低信号。离体组织学检查可见心梗边缘区有普鲁士蓝染色阳性,荧光阳性细胞存在。【结论】SPIO标记MSC可在MRI成像下表现出理想的信号强度和示踪时间,SPIO活体动态示踪小型猪骨髓MSC移植治疗心肌梗死是可行的。
- 杨珂彭朝权项鹏张成喜邹丽媛吴晓高雅康庄
- 关键词：超顺磁性氧化铁间充质干细胞小型猪急性心肌梗死示踪
- 心肌营养素1诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞被引量：4
- 2011年
- 目的:探索心肌营养素1(CT-1)对小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法:获取、扩增稳定的成体西藏小型猪MSCs,鉴定成脂、成骨潜能。分4组诱导向心肌样细胞分化,包括空白对照组、5-氮杂胞苷(5-Aza)组、CT-1组、5-Aza和CT-1合用组。取诱导后4周的细胞加肌动蛋白(α-actin)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)抗体,进行免疫荧光染色,最后计数红色荧光阳性染色率。结果:分组诱导分化结果,合用组的诱导分化心肌样细胞α-actin阳性率为29.90%±4.76%,明显大于5-Aza组(17.73%±2.35%,P<0.01)、CT-1组(6.63%±0.55%,P<0.01)和空白对照组(1.62%±0.09%,P<0.01);5-Aza组明显大于CT-1组(P<0.01)和空白对照组(P<0.01);CT-1组明显大于空白对照组(P<0.05)。cTnT红色荧光染色结果显示:合用组的诱导分化心肌样细胞cTnT阳性率为36.50%±4.09%,明显大于5-Aza组(14.37%±1.65%,P<0.01)、CT-1组(7.50%±0.61%,P<0.01)和空白对照组(1.12%±0.23%,P<0.01);5-Aza组明显大于CT-1组(P<0.01)和空白对照组(P<0.01);CT-1组明显大于空白对照组(P<0.01)。结论:适宜浓度的5-Aza(10μmol/L)和CT-1(0.1μg/L)能够在体外诱导小型藏猪骨髓MSCs转化为心肌样细胞,诱导后的细胞获得部分心肌细胞特异性蛋白的表达。CT-1与5-Aza联合可明显提高诱导率。
- 彭朝权高雅项鹏杨珂邹丽媛吴晓
- 关键词：心肌营养素1间充质干细胞心肌样细胞
- 经皮球囊封堵冠状动脉法制备小型猪心肌梗死模型及评价被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨球囊封堵法建立小型猪心肌梗死模型的可行性,以及骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗心肌梗死疗效初探。方法:选用小型藏猪20只,麻醉后经股动脉置入经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneoustransluminal coronary angioplasty,PTCA)球囊至左前降支中远段,完全堵闭血流90min,行心电图、心脏超声心动图、心肌核素显像、心脏核磁共振及病理检查。随机分2组:MSCs移植组,OTW球囊将MSCs移植到梗死心肌处;生理盐水组,注入等量生理盐水。观察2组的左室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)、左室舒张末期内径(EDV)和左室收缩末期内径(ESV)的变化。结果:20只猪均完成冠脉造影,造模成功10只,,死亡10只,成功率50%。与造模之前比,LVEF、FS显著下降(P<0.05),EDV、ESV显著延长。8周后,MSCs移植组均较移植前好转(P<0.05,P<0.01),而生理盐水组亦有所改善,但无显著差异;MSCs移植组的LVEF和FS较生理盐水组明显增加(P<0.05,P<0.01),MSCs移植组的EDV和ESV较生理盐水组明显缩少(P<0.05,P<0.01)。结论:球囊封堵法可成功建立小型猪心肌梗死模型,并且适合行骨髓干细胞移植的研究,但须特别注意预防心室纤颤的发生。MSCs移植可明显改善小型猪梗死心肌的功能。
- 彭朝权王景峰杨珂张成喜何可康庄刘金来程木华邹丽媛
- 关键词：小型猪心肌梗死间充质干细胞移植
- 超顺磁性氧化铁活体动态示踪小型猪骨髓间充质干细胞的转归
- 2011年
- 目的探讨磁共振(MRI)下活体动态示踪小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)经冠脉移植治疗心肌梗死的可行性及移植后8周MSCs的转归。方法采用密度梯度离心法获取小型猪自体骨髓MSCs,用携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体转染MSCs,并用超顺磁性氧化铁(SPIO)体外标记MSCs-GFP。采用经皮球囊封堵法制备急性心肌梗死(AMI)模型,随机分为2组,MSCs移植组(n=8),经冠脉移植双标记的MSCs到小型猪心肌梗死区域,对照组(n=5),移植等量生理盐水,移植后24 h、3周、8周在MRI下进行活体动态示踪。8周后离体组织学观察大体形态学改变及移植细胞存留情况。结果普鲁士蓝染色显示25μg Fe/mL SPIO与0.8μl/mL阳离子脂质体联合对MSCs的标记率达95%～100%,标记后细胞活力和增值能力较前改变无统计学差异(P>0.05),对GFP的表达无影响,双标记细胞仍具备成骨、成脂及成心肌分化能力,心肌细胞表面标记物α-MHC和actinin表达阳性。双标记MSCs经冠脉移植后24 h,3周,8周MRI成像均可见梗死区域的室间隔有明显区别于周边组织的低信号,信号强度(SI)改变分别为52.98%±10.74%,21.53%±5.40%,6.23%±2.01%(P<0.05),对照组无可见低信号区域。组织学检查示MSCs移植组心梗瘢痕面积明显缩小(P<0.05),HE染色见心梗区域心内膜下出现再生心肌,普鲁士蓝染色可见有蓝色颗粒聚集,荧光显微镜下同一切片GFP表达阳性,CD68(单核巨噬细胞表面标记物)表达阴性。每高倍镜视野下心梗边缘区和梗死区的蓝色颗粒数分别为36.2±3.8和9.7±2.1(P<0.05)。对照组普鲁士蓝染色阴性。结论 GFP/SPIO双标记MSCs是安全的,且不改变干细胞的生物学特性。经冠脉移植双标记MSCs可在MRI成像下表现出理想的信号强度,示踪时间长达8周,MSCs移植可减小心梗瘢痕面积,促进心肌再生,8周后SPIO主要定居于心梗边缘区,仍存在于MSCs中,SPIO活体动态示踪小型猪骨髓MSCs移植治疗心
- 杨珂彭朝权项鹏张成喜邹丽媛吴晓高雅康庄何可可刘金来
- 关键词：小型猪冠脉移植超顺磁性氧化铁骨髓间充质干细胞示踪表面标记物
- 超顺磁性氧化铁活体动态示踪小型猪骨髓间充质干细胞的转归
- 目的探讨磁共振（MRI）下活体动态示踪小型猪骨髓间充质干细胞（MSCs）经冠脉移植治疗心肌梗死的可行性及移植后8周MSCs的转归。方法采用密度梯度离心法获取小型猪自体骨髓MSCs,用携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的慢病毒...
- 杨珂彭朝权项鹏张成喜邹丽媛吴晓高雅康庄何可可刘金来
- 文献传递
- CD51阳性心肌细胞对心肌梗死后小鼠心功能改善的作用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨CD51阳性(CD51+)的心肌细胞移植治疗AMI后心脏结构及功能变化。方法取C57小鼠14只随机分为对照组(n=7)和细胞移植组(n=7),结扎冠状动脉左前降支制成心肌梗死模型。细胞移植组心肌梗死后立即于心肌梗死部位注射转染红色荧光蛋白的CD51+心肌细胞(RFP-CD51),对照组注射生理盐水。移植后1周及1个月分别用小动物心脏彩色多普勒超声(彩超)仪检测心功能指标的变化及组织形态改变,并且在移植后1个月时观察RFP-CD51细胞是否分化为成熟心肌细胞。结果细胞移植组的小鼠在1周及1个月时的心脏彩超均显示LVEF、左心室缩短分数(LVFS)均显著高于对照组(P<0.01),左心室收缩末容积(LVESV)小于对照组(P<0.05),而左心室舒张末容积(LVEDV)则无显著差异(P>0.05)。在心肌梗死3周后发现移植的CD51+细胞分化为成熟心肌细胞。结论 AMI后的CD51+心肌细胞移植可分化为成熟心肌细胞、改善心功能、防止心脏重构、减轻心腔扩大。
- 林婉文杨珂廖延姜美花彭朝权
- 关键词：心肌梗死分化
