杨林杰
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- hsa—miR-218下调Survivin表达影响鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡被引量：2
- 2014年
- 目的研究hsa-miR-218对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡的影响，探讨其作用机制。方法构建hsa-miR-218的真核表达载体（pmiR-218），利用LipofectamineTM2000将PmiR-218转染CNE-2Z细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测PmiR-218对CNE-2Z细胞增殖的影响；AnnexinV／PI双染流式细胞仪检测，miR-218对CNE-2Z细胞凋亡的影响；Western印迹检测细胞内Survivin蛋白表达水平。结果成功构建hsa-miR-218的真核表达载体，miR-218。与随机对照组相比，转染PmiR-218的CNE-2Z细胞增殖受到明显抑制（P〈0．05），细胞早期凋亡显著增加（P〈0．05）。与随机对照组相比，PmiR-218抑制细胞内Survivin蛋白的表达。结论，miR-218可抑制人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用机制与下调Survivin基因表达有关，提示hsa-miR-218在鼻咽癌的发生发展中扮演着肿瘤抑制基因的作用，可能是鼻咽癌治疗的新靶点。
- 农朝赞黄之虎韦士喻郭灵霄李育敏杨林杰
- 关键词：SURVIVIN鼻咽癌CNE-2Z细胞
- 三氧化二砷联合miR-203对人白血病K562细胞的抑制作用及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的:研究三氧化二砷(As2O3)联合过表达的微小RNA-203(microRNA-203,miR-203)对白血病K562细胞的抑制作用及其可能的分子机制。方法:将miR-203的真核表达载体pmiR-203转染K562细胞,Real-time PCR检测细胞内miR-203的表达。将K562细胞分为空白对照组、As2O3组、pmiR-203组、空质粒对照组、As2O3联合空质粒对照组和As2O3联合pmiR-203组,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,流式细胞术仪检测细胞凋亡率,Western Blotting检测细胞内Bcr/abl蛋白的表达水平。构建Bcr/abl 3'UTR和Bcr/abl mut-3'UTR的双荧光素酶报告基因载体,将其与pmiR-203共转染K562细胞,通过荧光素酶活性分析判断miR-203是否与Bcr/abl基因的3'UTR结合。结果:miR-203的真核表达载体pmiR-203转染K562细胞后,细胞内miR-203的表达水平明显增高(P<0.05)。高表达miR-203联合As2O3使K562细胞对As2O3的敏感性提高到单用As2O3的4.86倍,IC50从3.4μmol/L降低至0.7μmol/L,两者联用表现为协同作用。As2O3联合pmiR-203组的细胞凋亡率显著高于As2O3联合空质粒对照组[(29.97±3.19)%vs(10.77±1.71)%,P<0.05]。过表达miR-203显著下调K562细胞内Bcr/abl蛋白的表达水平。Bcr/abl 3'UTR中带有明确的miR-203结合位点。结论:miR-203可提高白血病K562细胞对As2O3的敏感性,miR-203和As2O3联用对K562细胞具有协同抑制作用,其作用机制可能与miR-203直接下调Bcr/abl融合基因的表达有关。
- 黄之虎韦思羽农朝赞韦仕喻农少云郭凌霄李育敏何金花杨林杰
- 关键词：三氧化二砷白血病K562细胞BCR/ABL
- 母婴分离对大鼠成年后抑郁行为及海马Gabra6蛋白表达的影响被引量：5
- 2018年
- 目的探讨早期母婴分离导致大鼠成年后抑郁的机制及早期应激对成年后海马Gabra6亚基表达的影响。方法将8只Sprague Dawley孕鼠分娩的64只新生鼠随机分为母婴分离(MS)组和对照组。MS组幼鼠出生后第2～15天进行母婴分离,每天固定分离6 h。之后对其进行体重评估,行为学检测包括糖水偏爱、新环境进食抑制、强迫游泳实验,膜片钳实验检测自发动作电位,Western blot实验检测Gabra6蛋白表达。结果与对照组比较,MS组成年后的体重和糖水偏爱度差异无统计学意义(P> 0. 05),而在新环境进食抑制的进食潜伏期和强迫游泳不动时间均明显延长(P <0. 05)。电生理实验显示MS组海马CA1区锥体神经元的自发动作电位发放频率降低(P <0. 05)。Western blot实验显示,MS组海马的Gabra6蛋白表达降低(P <0. 05)。结论生命早期的不良应激可导致成年后出现抑郁样症状,海马区域Gabra6表达的异常可能参与了这一过程。
- 郑玉周芩稷危智盛董建阳杨林杰蔡翔
- 关键词：母婴分离行为学
