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马铃薯叶特异性启动子驱动的人白细胞介素-12的遗传转化被引量：3: 2015年; 利用植物生物反应器表达具有应用价值的药用蛋白是近年来生物技术研究的热点之一。本研究利用前期构建的Prbcs驱动的h IL12植物表达载体,导入根瘤农杆菌后侵染马铃薯,通过筛选、分化等过程,获得转基因马铃薯植株。结果显示,获得13个独立的转h IL12基因阳性马铃薯株系,GUS染色分析表明外源基因成功获得表达,且具有良好的遗传稳定性。本研究获得的Prbcs驱动的h IL12转基因马铃薯植株,为下一步利用马铃薯高效表达生产h IL-12蛋白打下了基础。; 杨加伟龙朝康葛正龙; 关键词：马铃薯植物生物反应器

一种亚砜还原酶及其在手性亚砜合成中的应用: 本发明涉及分子生物学领域的一种还原酶及其在手性亚砜合成中的应用，所述亚砜还原酶的氨基酸残基序列如SEQ ID No.1所示。利用所述的亚砜还原酶能制备高光学纯度的(S)构型亚砜。相对于其它现有的制备方法，使用所述制备方法...; 杨加伟; 文献传递

马铃薯块茎特异性启动子克隆及其驱动的hIL12表达载体构建被引量：7: 2014年; 目的克隆马铃薯块茎特异性的高效启动子Ppatatin并构建其驱动的人白细胞介素-12(hIL12)植物表达载体。方法提取马铃薯基因组DNA作为模板,根据Genebank数据库信息设计Ppatatin序列特异性引物,通过PCR扩增获得Ppatatin片段,并进行测序鉴定;利用PLACE等数据库对序列进行启动子元件分析;通过重叠PCR、限制性内切酶酶切、体外连接、转化等技术,以双元载体pCambia-2301为骨架,构建Ppatatin驱动的hIL12表达载体。结果成功从马铃薯基因组中扩增得到了1019 bp大小的启动子片段,序列分析表明该片段含有典型的启动子元件如TATA-box,以及一些组织特异性的相关响应元件,符合组织特异性启动子的特征;成功获得了基于pCambia-2301的Ppatatin驱动的hIL12植物表达载体。结论获得的Ppatatin启动子及其驱动的hIL12表达载体,为提高hIL12在植物生物反应器中表达量以及优化马铃薯生物反应器打下了基础。; 杨加伟李伟葛正龙; 关键词：植物生物反应器

研究生医学分子生物学教学改革与思考被引量：4: 2013年; 《医学分子生物学》是医学院校研究生课程教学中的一门重要基础课程,为适应高校教学改革的需要,本文对我校研究生的医学分子生物学课程教学中存在的问题进行剖析,从教学内容和方法上进行了有益的探索与实践,以期能更加完善医学研究生分子生物学课程的教学。; 杨加伟陈静陆红玲冯赞杰刘喜平欧刚卫; 关键词：医学分子生物学教学改革

一种亚砜还原酶突变体及其在手性亚砜及亚磺酰酯制备中的应用: 本方案公开了生物技术领域的一种亚砜还原酶突变体，该突变体相比野生型酶蛋白具有更广的底物普适性。采用E.coli作为宿主菌株，以pET‑28a(+)质粒为载体，表达了这个亚砜还原酶突变体paMsrA‑F59A，其氨基酸序列...; 杨加伟陈永正程小玲江旭陈艳丽

pmMsrA的生物信息学及底物对接分析: 2017年; [目的]预测假单胞菌甲硫氨酸亚砜还原酶A(缩写:pmMsrA)的结构中与催化活性相关的结合位点与活性基团。[方法]采用生物信息分析软件对筛选出的pmMsrA的基因和蛋白序列进行分析,用SWISS-MODEL软件构建pmMsrA蛋白的三维结构,使用Auto Dock软件实现pmMsrA与底物分子的模拟对接。[结果]pmMsrA的基因开放阅读框669bp,编码222个氨基酸,理论等电点为4.87,分子量为24.6 kDa。pmMsrA属于高度保守的甲硫氨酸亚砜还原酶(PMSR)超家族。多重序列比对得出pmMsrA和模板1FVA具有58%的相似性,可构建一个高质量的pmMsrA蛋白三维结构模型。pmMsrA蛋白的催化活性位点位于"GCFWG"模体结构的Cys-60,C-末端的Cys-206和Cys-214对pmMsrA的再生循环起重要的作用。分子对接结果显示底物与酶的可能结合位点是136位天冬酰胺(136N),137位天冬氨酸(137D)和204位酪氨酸(204Y)。[结论]获得pmMsrA的生物信息相关预测参数,成功构建pmMsrA的三维结构,并实现与底物S-苯甲亚砜的空间模拟对接。; 袁志美欧刚卫欧刚卫彭辽天杨加伟; 关键词：同源建模

水稻Osε-cop1基因表达模式及功能的初步分析被引量：1: 2013年; ε-COP是真核生物中COP I有被小泡的一个亚基,其在植物中的生物学功能还未见报道。本研究对水稻中编码ε-COP亚基的基因进行了生物信息学分析,对其中的Osε-cop1基因进行了时空表达分析,构建了Osε-cop1的RNA干涉载体并转化水稻,对转化植株的表达特性和表型性状进行了分析。生物信息学分析结果表明,编码ε-COP的两个基因有很高的序列一致性,其中的Osε-COP1蛋白与玉米、拟南芥和大豆同源蛋白也具有较高的序列一致性,分别为83%、68%和62%;时空表达分析结果表明,Osε-cop1在穗部特异表达,且在减数分裂期幼穗中表达量最高。RNA干涉的研究结果表明,Osε-cop1的表达下调造成植株穗顶部死亡,暗示该基因对水稻穗的发育具有重要作用。本研究初步揭示了Osε-cop1在水稻中的功能,为进一步研究COPI有被小泡在植物中的功能奠定了基础。; 杨加伟周玲艳余守和庄楚雄; 关键词：水稻 RNA干涉功能分析

一种亚砜还原酶及其应用和制备方法: 本发明公开了分子生物学领域的一种亚砜还原酶及其应用和制备方法，所述亚砜还原酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。该亚砜还原酶应用于生物催化制备R构型手性亚砜，利用含有亚砜还原酶基因的重组表达载体，和含有该重组载体的...; 杨加伟

微信平台云板书在医学生物化学教学中的应用被引量：6: 2016年; 随着信息时代的到来,传统的课堂输入式教学已经不能满足学生的学习需求。通过云板书的形式,将部分医学生物化学教学内容上传至微信公众平台,作为课堂教学的辅助和补充,发挥移动互联网技术在生物化学教学中的应用。通过学生教学反馈以及考试成绩的调查发现,教学效果和学生学习积极性得到显著提高。; 杨加伟程小玲欧刚卫; 关键词：生物化学

水稻Osε-cop1基因的原核表达及多克隆抗体制备被引量：4: 2013年; ε-COP蛋白是真核生物分泌途径中COPⅠ有被小泡的一个亚基。本研究利用PCR技术扩增水稻ε-cop基因(Osε-cop1)的ORF(开放阅读框),并克隆到原核表达载体pET-23d上,将表达载体pET-Osε-cop1转入大肠杆菌BL21(DE3),以1.0mmol/L的IPTG(isopropyl β-D-thiogalactoside)诱导表达重组蛋白,然后以重组蛋白作为抗原免疫家兔,制备多克隆抗体。SDS-PAGE电泳分析结果表明,成功诱导表达了分子量约为35kD的重组蛋白,Western blot检测表明,免疫家兔的抗血清与水稻幼穗总蛋白杂交信号较好。Osε-COP1抗体的制备有助于研究该基因及COPI小泡在水稻中的功能。; 杨加伟周玲艳庄楚雄; 关键词：原核表达抗体

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杨加伟