杜瑞琴
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
- 供职机构：第三军医大学基础部全军免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 嵌合跨膜型人CD55基因的重组逆病毒表达质粒的构建被引量：1
- 2001年
- 目的 构建嵌合跨膜型CD5 5基因的重组逆病毒表达质粒。方法 采用PCR技术扩增编码CD5 5信号肽及成熟蛋白胞外区 (-3 4 -3 0 4aa)的DNA片段 ,双侧引入EcoRⅠ、SspⅠ位点 ,与编码CD46分子的跨膜区及膜内区 (2 70～ 3 5 0aa)的DNA片段的5’末端自身的StuI位点连接 ,构建嵌合跨膜型CD5 5DNA片段 ,序列测定后将此嵌合CD5 5片段与pLXSN逆病毒载体连接构建重组表达质粒 ,酶切鉴定插入片段的方向。结果 DNA序列测定证实所构建的嵌合跨膜型CD5DNA阅读框完整、连接部位序列正确 ;HindⅢ酶切鉴定得到了正向插入的CD5 5TM pLXSN重组表达质粒。结论 我们成功构建了嵌合跨膜型CD5 5DNA片段及含此片段的重组逆病毒表达载体CD5 5TM pLXSN ,为进一步在真核细胞中表达嵌合分子 ,比较研究GPI锚固型CD5 5分子与细胞活化信号转导的关系建立良好对照并为应用跨膜型的CD5 5分子对PNH进行基因治疗奠定了分子生物学基础。
- 杜瑞琴白云黎万玲姜曼
- 关键词：质粒
- 重组跨膜型人CD55分子在小鼠NIH3 T3细胞上的表达及其补体溶破保护功能的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 :在小鼠NIH3T3细胞转染表达人天然GPI锚固型CD5 5和重组跨膜型CD5 5 TM分子 ,观察比较它们对人补体溶破异源细胞的抑制功能。方法 :将带有CD5 5cDNA、CD5 5 TMcDNA的重组逆病毒表达质粒CD5 5 pLXSN、CD5 5TM pLXSN经脂质体法转染PA317细胞 ,用病毒上清感染小鼠成纤维母细胞NIH3T3。经G418加压筛选 ,利用FACS检测获得表达CD5 5和CD5 5 TM分子的阳性细胞克隆 ,通过MTT比色法比较两种分子对人血清补体溶破细胞的抑制功能有无差别。结果 :细胞转染筛选获得多个表达跨膜型人CD5 5分子的NIH3T3细胞克隆 ,补体杀伤试验证实其具有抑制人补体溶破的功能 ,且两种分子的补体抑制功能无明显差异。结论 :成功地建立了稳定表达天然CD5 5、跨膜型CD5 5分子的小鼠NIH3T3细胞 ,证实其表达的GPI型CD5 5分子和CD5 5TM分子均具有抑制人补体溶破细胞的功能 ,为进一步探讨应用跨膜型的CD5 5分子对PNH进行基因治疗奠定了基础。
- 姜曼杜瑞琴黎万玲白云
- 关键词：基因转染NIH3T3细胞
- CD59的结构与功能关系研究进展被引量：8
- 2000年
- CD5 9是一种 GPI锚型的补体调节蛋白 ,它是一个多功能的分子 ,其主要作用是与新生补体攻膜复合物中的C8和 /或 C9结合从而抑制补体的活化。了解 CD5 9的结构与功能关系可为提高抗肿瘤抗体的治疗效果、治疗自身免疫和炎症性疾病及抑制器官移植的超急性排斥反应奠定基础。本文就近年来 CD5 9的结构与功能关系的研究进展作一综述。
- 杜瑞琴白云
- 关键词：CD59
- 跨膜型人CD55分子的构建、在小鼠EL-4细胞上的表达及其补体溶破保护功能的研究
- CD55又名衰变加速因子(Decay accelerating factor,DAF)是一种GPI(glycosyl-phospatidylindylinositol)锚型的补体调节蛋白.它以糖基磷脂酰肌醇锚固于细胞膜外...
- 杜瑞琴
- 关键词：CD55衰变加速因子补体调节蛋白血红蛋白尿
- 文献传递
