李靖冉
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 线性梯度平板药敏试验方法的建立与应用研究
- 李靖冉
- 文献传递
- 表征抗菌药物抑菌动力学的等效线药敏试验方法被引量：5
- 2015年
- 以抗菌药物作用浓度与时间对抑菌率的协同作用，改进通行的药敏试验方法．采用Bioscreen全自动生长曲线分析仪，在线测定连续时间、连续固定浓度抗菌药物作用下禽致病性大肠杆菌BBZ6-3g在MHB中生长量（A600），建立了抑菌动力学检测体系．用Sigmaplot构建以相对抑菌率RBR=1—At-i／At_0对抗菌药物浓度和作用时间的等效线图．等效线图全面地反映了药物浓度和时间对抑菌量的影响过程及趋势，兼具二维曲线的量化和三维曲面的直观特点，而且RBR通过归一化处理，消除了细菌群体的自然增殖的本底、不同接种量、不同抗菌药物的差异影响，可以直接比较不同抗菌药物的抑菌率，专门比较浓度和时间对抑菌率的影响．抑菌作用本质上是抗菌药物抑制细菌对营养物质的利用效率和程度，与细菌死亡是不同但是相关的过程。0．5RBR为传统的目测最低抑菌浓度（MIC），以此为界，等效线图可以直观地分为3部分：分化区（O．5纵向等效线以左，全部浓度）、生长区（0．5以上的等效线）、抑菌区（0．5纵向等效线以右延伸且0．5以下的等效线）．分化区边界时间在100～300min，因此传统的药敏试验以8—12h的终态来判断抑菌率，确定MIC是可靠的；抑菌区和生长区之间的等效线疏密，实际上是浓度依赖性和时间依赖性的依据．抑菌动力学检测体系和反映RBR的等效线图，改良了传统药敏试验方法，有望分析不同接种量对抑菌率和菌群变异的影响、不同浓度的抗菌药物后效应（PAE），比较不同菌种或不同抗药性水平菌株的抑菌动力学．
- 刘玉庆胡明刘焕奇王进文赵敏李靖冉付晓杰骆延波齐静李璐璐高培基
- 新型吸管式药敏检测盒的应用及山东省禽源病原菌抗药性监测网络的构建被引量：2
- 2012年
- 为了适应兽医临床的简陋条件和在分散的养殖场进行联合抗药性监测，按照药敏试验中试管稀释法原理研制灵敏、准确、稳定、操作简单、无需专门仪器设备的原位吸管式药敏检测盒，4-7h快速判断11种药物对目标病原菌敏感性，指导临床用药，并在肉鸡养殖中进行了应用；同时联合六和、中慧、正大、九联、民和、春雪、益生等省内大型养殖企业，借助企业的技术体系建立山东省动物源病原菌抗药性监测网络、数据库、菌种库，利用网络技术对抗药性数据进行收集、汇总，并实现网上查询，对了解跟踪山东省动物源病原茵抗药性发展规律具有重要参考价值。
- 白华骆延波齐静胡明朱小玲王永军苏红李靖冉李颢张秀美吴聪明刘玉庆
- 关键词：病原菌兽医临床监测网
- 用线性梯度平板准确测定药物敏感性和分离抗药性菌株被引量：4
- 2011年
- 菌群在药物的最低抑菌浓度附近的动力学过程是抗生素药理学研究的核心问题.建立一种能确定精确的MIC且又能准确分离抗药性菌株的方法,是目前临床对药敏实验新的要求.根据Fick扩散定律制备了线性梯度平板:将15mL含适当浓度恩诺沙星的琼脂培养基在9cm培养皿中倾斜凝固,刚好覆盖整个平板底面,然后水平放置,再在其上层加入同样体积的无药琼脂培养基,凝固12h后,药物浓度达到扩散平衡而呈均匀连续线性梯度.通过实测验证药物浓度在平板表面呈线性梯度分布.将待检E.coli菌群均匀涂布在梯度平板上,培养12h后,随恩诺沙星浓度提高依次形成连续密集小菌落区和离散大菌落区,根据两区域的分界线可以确定菌群自然形成的真实的MIC,与常规药敏实验方法测定结果一致.大菌落重新涂布高梯度平板,分界线显著上升,并检测出抗药性基因突变,表明该方法很容易筛选出菌群中的抗药性菌株.梯度平板可以方便地呈现整个菌群在MIC附近的动力学过程和遗传生理变化,并预警该抗生素使用后可能出现的抗药性,从而指导临床抗菌药物的选择和使用.
- 刘玉庆李靖冉杜加法胡明白华齐静高超魏甜甜苏红金健玲高培基
- 关键词：E.COLI恩诺沙星MIC
- 坡面平板药敏检测盒
- 本实用新型公开了一种坡面平板药敏检测盒，属于药敏检测设备领域，其结构底座、透明盒体和盒盖，盒盖扣合在盒体的顶部，底座的一侧中部设置有一个固定螺栓，另一侧设置有两个水平调节螺栓，两个水平调节螺栓之间的底座上设置有水平仪，两...
- 刘玉庆高培基胡明白华齐静朱小玲杜加法李靖冉蔡亚娜
- 文献传递
- 大肠埃希菌过表达lexA基因对恩诺沙星杀菌力和抗药性突变的影响被引量：1
- 2013年
- 目的构建过表达SOS阻遏蛋白编码基因lexA的大肠埃希菌菌株,研究SOS应答对恩诺沙星抗药性突变的影响,并建立SOS应答抑制剂筛选平台。方法构建lexA重组表达质粒pET-22b(+)-lexA,转化大肠埃希菌BL21(DE3)构建重组质粒菌株BL21-lexA,用IPTG诱导BL21-lexA过表达lexA,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定LexA蛋白,用荧光定量PCR测定SOS应答基因recA和umuC表达变化;然后用恩诺沙星梯度平板测定恩诺沙星对BL21-unmodified(空质粒菌株)和BL21-lexA的抑菌活性和抗药性突变率。结果重组质粒菌株BL21-lexA在IPTG诱导下过表达LexA,抑制recA和umuC表达,提高了大肠埃希菌对恩诺沙星的敏感性,降低了抗药性突变率。结论通过IPTG诱导BL21-lexA过表达LexA蛋白,能构建稳定的SOS应答抑制模型,用于筛选SOS抑制剂,提高恩诺沙星杀菌力和降低抗药性突变。
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- 关键词：LEXA大肠埃希菌恩诺沙星
- 利用重建祖先基因方法研究连续诱导培养大肠杆菌对恩诺沙星抗药性突变的规律
- 2012年
- 目的研究大肠杆菌对氟喹诺酮抗药性突变的规律及基因型与表型的对应关系。方法以质控菌株Escherichia coli ATCC 25922为初始菌株,恩诺沙星浓度由0.031 25μg/mL增加到128μg/mL,分步诱导得到13株稳定的抗药性菌株,检测氟喹诺酮靶酶基因gyrA、gyrB和parC、parE的序列及其突变位点,检测恩诺沙星的最低抑菌浓度(MIC)及抑制外排泵后MIC,分析抗药性表型与基因型、蛋白结构、外排泵及生化特性的关系。结果低浓度氟喹诺酮可诱导GyrA的Ser83-Leu和ParC的Glu84-Lys单一位点突变,致低水平抗药性,而Ser83-Leu逐步与Asp87-Gly、Glu84-Lys组合,导致氟喹诺酮突变决定区突变位点氨基酸的极性、空间位阻变化,影响靶蛋白与DNA和恩诺沙星的结合,可致高水平抗药性。外排泵与基因突变共同作用,使细菌耐受逐步升高药物浓度,M IC基本平行高出培养浓度1倍。结论增加恩诺沙星的使用剂量,能诱导高抗菌株产生,恩诺沙星抗药性表型与基因型具有对应关系和规律性变化。
- 魏甜甜白华李靖冉胡明齐静袁首道张乐萃刘玉庆
- 关键词：大肠杆菌连续传代点突变
- 基于大通量药敏检测的兽用抗菌药物抗药性管理策略被引量：2
- 2014年
- 兽用抗菌药物滥用导致普遍的抗药性和药物残留，需要深入研究用药策略和抗药性检测方法，对抗药性进行有效管理。通过改进CLSI药敏试验方法，设置1／4、1／2、1、2、4倍的1／10临床剂量为检测浓度，就山东省平度市19个养殖场病死鸡和健康鸡群分离到的470株大肠杆菌对14种常用抗菌药物的敏感性进行分析。结果显示，91．67％的菌株对1／10临床剂量呈现多重抗药性；虽然各场敏感药物呈现一定的离散性，但1／10临床剂量的硫酸多黏菌素和甲磺酸培氟沙星在所有的养殖场均能杀灭90％～100％的大肠杆菌。建议统一同步使用敏感药物，进一步根据药敏监测结果，适时轮换用药，不但能取得较好的治疗效果，还可减少抗茵药物的使用种类和数量，避免多重抗药性的产生。
- 贾纪美骆延波颜世敢齐静李璐璐胡明赵敏杨胜福李靖冉牛卫卫李虹达赵修龙郑洁单虎刘焕奇刘西峰刘玉庆
- 关键词：抗菌药物
