李疆
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 尾型同源盒转录因子2和NF-κB P65蛋白在胃印戒细胞癌组织中的表达及意义
- 2010年
- 目的观察尾型同源盒转录因子2(CDX2)和核转录因子(NF)-κBP65蛋白在胃印戒细胞癌组织中的表达。方法以癌旁正常胃黏膜和胃黏膜肠上皮化生作为对照,用免疫组织化学SABC法检测CDX2和NF-κBP65蛋白在胃印戒细胞癌组织中的表达情况。结果CDX2在正常胃黏膜中无表达,在肠上皮化生中表达明显增高,在胃印戒细胞癌组织中有CDX2的表达但水平低于肠上皮化生;胃印戒细胞癌组织中NF-κBP65则明显高于癌旁正常胃黏膜;胃印戒细胞癌中CDX2和NF-κBP65表达与肿瘤浸润深度有相关性。结论CDX2与NF-κBP65是胃印戒细胞癌重要的分子标志物。
- 李疆孙仁虎陶凯雄王国斌
- 关键词：NF-ΚB转录因子
- 白介素-1β诱导胃上皮细胞GES-1表达肠道特异性标志物被引量：2
- 2009年
- 目的观察白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的人胃黏膜上皮GES-1细胞中肠道特异性标志物尾侧型同源转录因子-1(CDX1)和肠道黏蛋白-2(MUC2)表达的诱导作用,探讨其作用机理。方法通过不同浓度及不同作用时间的IL-1β刺激人胃黏膜上皮GES-1细胞,采用实时定量PCR法检测CDX1mRNA和MUC2mRNA的表达水平;并使用NF-κB抑制剂PDTC预处理GES-1细胞,检测PDTC对IL-1β诱导的CDX1mRNA和MUC2mRNA表达水平的影响。结果正常情况下人胃黏膜上皮GES-1细胞不表达CDX1mRNA和MUC2mRNA,而IL-1β可以诱导GES-1细胞中CDX1mRNA和MUC2mRNA的表达,该作用在一定浓度范围内呈现剂量依赖性(P<0.05);IL-1β作用8h时,CDX1mRNA和MUC2mRNA的表达达到峰值(P<0.05),随后表达逐渐降低。经NF-κB抑制剂PDTC预处理后的GES-1细胞,CDX1mRNA和MUC2mRNA的表达水平明显下降(P<0.05)。结论IL-1β可能通过NF-κB信号通路促进人胃黏膜上皮细胞中CDX1mRNA和MUC2mRNA的表达,在胃黏膜肠上皮化生中发挥作用。
- 孙仁虎李疆童强舒晓刚王国斌
- 关键词：白细胞介素-1Β肠上皮化生
- 雷帕霉素抑制人结肠癌细胞体外增殖及其机制研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)对体外培养的人结肠癌Lovo细胞生长的抑制作用,并初步探讨其机制。方法分别用0.5、1.0、2.5和5.0μg/mL雷帕霉素对Lovo细胞进行干预,采用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Westernblot检测凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达。结果雷帕霉素对Lovo细胞表现出明显的增殖抑制作用,细胞增殖活性随浓度增加、时间延长逐渐降低,呈现量-效、时-效关系。雷帕霉素呈浓度依赖性诱导细胞凋亡,并明显降低Lovo细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达水平。结论雷帕霉素通过下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,诱导结肠癌Lovo细胞凋亡,从而抑制其增殖及生长。
- 孙仁虎李疆崔静吕清刘兴华王国斌
- 关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉素凋亡BCL-2
- 白介素-1β诱导尾型同源盒转录因子2异位表达在胃黏膜肠上皮化生中的意义被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨白介素（IL）-1β对人胃黏膜上皮细胞尾型同源盒转录因子2（CDX2）表达的调控及其在胃黏膜肠上皮化生中的作用.方法 用不同浓度IL-1β刺激人胃黏膜上皮GES-1细胞,采用实时荧光定量PCR法、免疫细胞化学染色法及免疫印迹方法,在不同时间点检测CDX2 mRNA和蛋白表达水平.使用NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）预处理GES-1细胞,观察PDTC对IL-1β诱导的CDX2 mRNA和蛋白表达的影响.电镜观察IL-1β长期刺激下GES-1细胞超微结构的改变.结果 IL-1β可以诱导人胃黏膜上皮细胞上调CDX2 mRNA的表达.予1μg/LIL-1β刺激后,GES-1细胞CDX2 mRNA和蛋白表达水平分别为0.0749±0.0021和0.56±0.04;加入PDTC后,CDX2 mRNA和蛋白表达水平分别为0.0006±0.0002和0.40±0.06;差异均有统计学意义（均P＜0.05）.IL-1β长期刺激后,GES-1细胞表面会长出很多较长的微绒毛,同时细胞质内的分泌小泡也相应增加,胃上皮细胞开始出现肠上皮细胞的特征.结论 IL-1β能够通过NF-κB通路促进人胃黏膜上皮细胞CDX2 mRNA和蛋白表达上调,在胃黏膜肠上皮化生中发挥重要作用.
- 李疆王国斌孙仁虎陶凯雄
- 关键词：白细胞介素-1Β肠上皮化生
- 靶向CCR7基因shRNA表达载体的构建及鉴定
- 2009年
- 目的设计并构建靶向CCR7基因shRNA真核表达质粒,并检测其干扰效果。方法以CCR7为靶基因设计具有短发夹结构的模板寡核苷酸,退火形成互补双链结构,再克隆至pGC-silencer-CRM30载体,构建的3条重组短发夹shR-NA表达载体分别命名为pGC-silencer-CRM30-CCR7A、-CCR7B和-CCR7C。采用测序法鉴定寡核苷酸序列。将构建好的真核表达载体转染人结肠癌SW480细胞,荧光显微镜观察转染效果,RT-PCR法检测CCR7干扰效率。结果重组质粒测序结果与Genebank中的CCR7cDNA序列相符,转染SW480细胞后,荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白,RT-PCR结果表明,pGC-silencer-CRM30-CCR7C干扰效果最强。结论靶向CCR7基因shRNA表达载体构建无误,为进一步探讨趋化因子受体CCR7在胃肠道恶性肿瘤生物学行为中的作用奠定了基础。
- 孙仁虎李疆崔静吕清刘兴华王国斌
- 关键词：RNA干扰短发卡RNA趋化因子CCR7
- CCL21在人结肠癌SW480细胞侵袭过程中的作用被引量：12
- 2009年
- 背景与目的:既往研究显示趋化因子受体CCR7在胃肠道肿瘤中表达上调,并与淋巴管浸润和淋巴结转移相关。本研究旨在探讨趋化因子CCL21及其受体CCR7在人结肠癌SW480细胞体外侵袭中的作用。方法:在趋化因子CCL21作用的条件下,用划痕实验和Transwell小室检测SW480细胞侵袭能力,免疫印迹检测SW480细胞中金属基质蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达;CCL21预处理的SW480细胞在含足叶乙甙(VP-16)的体系中培养,MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞术和Hoechst33258染色检测细胞凋亡。结果:CCL21(100ng/mL)组中SW480细胞向划痕处爬行的速度明显快于阴性对照组;阴性对照组与CCL21(100ng/mL)组中穿膜细胞数分别为(48±4)个和(113±7)个,差异有统计学意义(P<0.05);CCL21(100ng/mL)组中MMP-9的相对表达水平为0.83±0.02,高于阴性对照组的0.38±0.01(P<0.05)。CCL21单独作用不能促进SW480细胞增殖;VP-16组中SW480细胞的增殖抑制率为68.3%,CCL21预处理增强SW480细胞活力,CCL21(100ng/mL)中抑制率降至47.4%;VP-16组与CCL21(100ng/mL)组中凋亡率分别为(65.2±5.2)%和(48.7±3.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CCL21/CCR7可以促进结肠癌SW480细胞的体外侵袭力,并增强其在微环境中的生存能力。
- 孙仁虎王国斌李疆崔静
- 关键词：趋化因子CCL21CCR7结肠肿瘤SW480细胞
