李忠浩 作品数:10 被引量:41 H指数:5 供职机构: 兰州大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省中青年科技研究基金 甘肃省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
1,25二羟维生素D_3通过ERK5通路调节破骨细胞分化 被引量:5 2018年 [目的]探讨体外1,25二羟维生素D_3(1,25-(OH)_2-VitD_3)通过细胞外信号调节激酶5(extracellularregulated kinase 5,ERK5)信号通路在诱导破骨细胞分化中的作用。[方法]对骨髓来源巨噬细胞(bone marrow macrophages,BMMs)进行不同浓度(0,10^(-9),10^(-8),10^(-7)mol/L)1,25-(OH)_2-VitD_3孵育,明确1,25-(OH)_2-VitD_3能否激活ERK5信号通路,并筛选出合适浓度的1,25-(OH)_2-VitD_3激活ERK5。调配不同工作液,分为正常细胞对照组、XMD8-92组、1,25-(OH)_2-VitD_3组及1,25-(OH)_2-VitD_3+XMD8-92组,分别孵育BMMs细胞6 d。采用TRAP染色检测4组破骨细胞的分化水平;Western Blot分别检测p-ERK5、ERK5等蛋白水平变化;RT-PCR检测NFATc1、CAMKⅡmRNA相对表达量。[结果]10^(-8)mol/L的1,25-(OH)_2-VitD_3可显著激活ERK5磷酸化(P<0.05)并通过ERK5通路促进破骨细胞分化(P<0.01),但此效应可被ERK5高选择性抑制剂XMD8-92抑制(P<0.05)。ERK5激活可显著上调破骨细胞CAMKⅡ、NFATc1 mRNA的表达(P<0.01);而XMD8-92可显著抑制CAMKⅡm RNA的表达(P<0.01),但对NFATc1 mRNA无显著影响(P>0.05)。[结论]体外低浓度(10^(-8)mol/L)的1,25-(OH)_2-VitD_3通过激活ERK5信号通路促进破骨细胞分化,CAMKⅡ是破骨细胞中ERK5信号下游通路的重要靶点。 李忠浩 闫亮 闫亮 丁宁 杨全增 丁宁关键词:1,25二羟维生素D3 破骨细胞 分化 流体剪切力对破骨细胞的影响 被引量:3 2016年 骨组织受到成骨细胞成骨作用和破骨细胞溶骨作用共同影响。与成骨细胞和骨细胞不同,破骨细胞起源于造血干细胞,由单核巨噬细胞发育而来,具有吞噬功能,能对多种刺激因素产生效应,其中机械刺激是始终存在的影响方式。机械刺激诱导的成骨细胞的正性调节对于骨生成、骨修复有至关重要的作用,而破骨细胞在这些方面的效应也十分关键。流体剪切力作为骨组织内机械刺激的一种常见形式,作用于成骨细胞和骨细胞的时候,通过对Ca2+、前列腺素、NO、RANKL和OPG等信号因子的影响,表现出介导破骨细胞迁移、分化、吸收和生存维持等现象的功能,这承载了骨代谢必不可少的一部分。同时这些因子相互交错,表现出复杂信息网络及阶段特异性。但总的来说,人们对流体剪切力调节破骨细胞生理及病理功能具体信号传导的了解还不是很深入,需要用更多的研究来阐明流体剪切力和破骨细胞之间的关系。本文就流体剪切力对破骨细胞相关分子信号影响做一综述,简要展示流体剪切力影响破骨细胞的相关机理。 丁宁 姜金 杨全增 李忠浩 夏亚一关键词:流体剪切力 破骨细胞 信号分子 不同加载时间流体剪切力对成骨细胞中基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响 被引量:1 2018年 目的:研究加载不同时间流体剪切力对成骨细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)表达的影响。方法:利用自行设计的平行平板流体剪切力加载装置,对MC3T3-E1成骨细胞施加12 dyn/cm2流体剪切力0、15、30、45、60 min,采用蛋白免疫印记实验检测MMP-1和其抑制剂TIMP-1的表达水平。结果:对体外培养的MC3T3-E1细胞加载12 dyn/cm2流体剪切力,随着加载时间的延长,MMP-1表达上调,TIMP-1表达水平下调,在45 min左右达到高峰。结论:加载不同时间的12 dyn/cm2流体剪切力能够上调MC3T3-E1成骨细胞MMP-I的表达,下调TIMP-1的表达,加载45 min最合适。 杨全增 张成俊 丁宁 丁宁 夏亚一关键词:流体剪切力 MC3T3-E1细胞 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂 ERK5信号通路介导流体剪切力对MC3T3-E1成骨细胞MMPs、TIMPs表达的影响 被引量:5 2018年 目的观察流体剪切力(fluid shear stress,FSS)作用下,MC3T3-E1成骨细胞中细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)和基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)的表达情况,并探讨ERK5信号通路在其中的作用。方法对MC3T3-E1成骨细胞进行不同的处理,分为正常组、XMD8-92组、FSS组和FSS+XMD8-92组,对FSS组施加12 dyn/cm^2流体剪切力,采用蛋白免疫印迹法分别检测P-ERK5、ERK5、MMPs和TIMPs蛋白水平的变化。结果生理强度(12 dyn/cm^2)的流体剪切力作用于MC3T3-E1成骨细胞45 min后能显著上调MMPs的表达,下调TIMPs的表达,但此效应可被ERK5高选择性抑制剂XMD8-92阻断。结论 ERK5信号通路调控流体剪切力对成骨细胞MMPs、TIMPs蛋白的表达。 杨全增 张成俊 丁宁 丁宁 夏亚一关键词:流体剪切力 MC3T3-E1细胞 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂 代谢综合征老年男性患者骨代谢物和骨密度的关系研究 被引量:7 2014年 目的了解代谢综合征老年男性患者的骨代谢物和骨密度的关系。方法对照组210例、代谢综合征组378例、代谢综合征合并骨质疏松组80例、代谢综合征合并骨量减少组121例。比较各组的血压、血糖、血脂、骨代谢指标和骨密度水平。结果代谢综合征组、代谢综合征合并骨质疏松组、代谢综合征合并骨量减少组的骨密度值、骨密度T值和Z值均显著低于对照组(P均<0.05),骨钙素(OCN)、甲状旁腺素(PTH)、总-Ⅰ型胶原氨基端延长肽(tP1NP)、β-胶原特殊序列(β-CTx)均显著高于对照组(P均<0.05),VitD3显著低于对照组(P<0.05)。代谢综合征合并骨质疏松组的OCN与骨密度值呈正相关性(r=0.269,P<0.05),PTH与骨密度值呈负相关性(r=-0.244,P<0.05);TC、SBP、DBP与骨密度值呈负相关性(r=-0.195、-2.163、-2.037,P均<0.05)。结论骨代谢指标可作为代谢综合征老年男性患者骨量减少和骨质疏松的早期指标。 洪宝建 梁丽娟 李忠浩 朱月霞 方亚奇 徐芳关键词:代谢综合征 老年男性患者 骨密度 破骨细胞中NFATc1相关调节研究进展 被引量:8 2017年 活化T细胞核因子(nuclear factor-activated T cell 1,NFATc1)是一种重要的转录因子。在破骨细胞中,它由上游RANKL信号通路的诱导、Ca^(2+)相关协同刺激信号通路与Ca^(2+)非依赖信号通路的扩增,Lhx2、IRF8、Mafb及Bcl6等细胞因子负反馈诱导,在NFATc1转录过程中的启动、扩增及靶向作用三个阶段通过复杂交互的调节影响其下游各种靶基因及蛋白,最终介导破骨细胞的分化、融合及对无机和有机骨基质的降解作用。宏观上,NFATc1还受到外界机械应力的影响从而在破骨细胞生长过程中发挥作用;并且NFATc1的调节过程受其自身节律的影响。本文就NFATc1的结构、相关调节机制和对破骨细胞的作用研究进展进行综述。 李忠浩 丁宁 杨全增 闫亮 夏亚一关键词:破骨细胞 信号通路 沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞迁移的影响 被引量:6 2017年 目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入大鼠星形胶质细胞。采用Western blotting检测各组ski蛋白的表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测ski-siRNA转染后星形胶质细胞迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ski-siRNA转染组细胞内ski蛋白的相对表达水平显著降低(F=132.957,P<0.001)。Transwell细胞迁移实验发现,ski-siRNA转染组每孔迁移细胞数少于空白对照组和阴性对照组(F>47.197,P<0.05)。细胞划痕实验显示,转染组细胞1~5 d的划痕愈合率均明显低于对照组(F>69.187,P<0.01)。结论沉默ski基因能显著抑制星形胶质细胞的迁移能力,ski可能参与星形胶质细胞的转移过程,进而调控胶质瘢痕的形成。 赵鑫 王兴文 寇江力 李忠浩 郭永强 伍亚民 张海鸿关键词:SKI 星形胶质细胞 股骨下端骨折合并髌骨外侧脱位1例病例报告 被引量:2 2017年 文献报道称急性髌骨脱位首诊漏诊误诊率达50%-75%。通过回顾相关文献,可以找到大量单一髌骨脱位或者合并股骨髁软骨骨折的病例,但股骨干骨折合并髌骨脱位的报道非常少见,仅WajidMA等报道1例13岁男孩股骨干骨折伴同侧髌骨脱位,一期同时治疗未漏诊。本例患者股骨干骨折切开复位钢板内固定术后短期内发生急性髌骨脱位,行内侧髌股韧带(MPFL)重建术后膝关节功能恢复良好,屈曲畸形明显改善,现总结报道如下。 闫亮 吴萌 万浪 李忠浩 李忠浩关键词:创伤 髌骨脱位 股骨干骨折 漏诊 ERK5信号通路介导1,25二羟维生素D3调节破骨细胞分化 目的:探讨体外1,25二羟维生素D3(1,25-(OH)2-VitD3)通过细胞外信号调节激酶5(extracellular-regulated kinase 5,ERK5)信号通路在诱导破骨细胞分化中发挥的作用。方法:... 李忠浩关键词:1,25二羟维生素D3 破骨细胞 分化 文献传递 骨细胞力学信号转导功能研究被引最高50篇相关文献分析 被引量:4 2017年 目的本文拟分析和研究骨细胞受机械应力刺激相关方面被引率最高的50篇文献的基本特征,为临床相关研究提供一定的参考。方法计算机检索"Pubmed","Web of Science"等英文数据库,以"Compressive stress,Tensile stress,Fluid shear stress,stretch stress,centrifugal force,Micropipette stimulation,Electromagnetic force mode,Mechanical stress,mechanotransduction"和"osteocyte,osteoblast"为关键词进行检索,筛选出被引频次最高的50篇文献,排除与该研究不相关的其他文献,对文献的标题、第一作者、发表年份、期刊来源、地区分布、作者单位、被引频次等重要信息进行统计分析。结果被引最高的50篇文献的频次从239次到20次,发表于1999年至2015年,其中以2009年最多为9篇,文献刊登于27本期刊,其中以《Journal of Bone and Mineral Research》发表最多(11篇),其次是《Journal of Biological Chemistry》(6篇)、《Bone》(5篇);来源于12个国家,其中美国最多(21篇),发表2篇及2篇以上文献的大学或医院有7家,排名前两名的为印第安纳大学(4篇)、上海交通大学(3篇),共两位作者发表2篇以上文献,研究最多的信号通路依次为MAPK-ERK signaling pathway(11)篇、Wnt/beta-catenin signaling(9篇)、PI3K/AKT signaling pathway(4篇)、BMP signaling pathway(2篇)。结论被引最高文献的分析不仅有助于了解骨细胞机械应力刺激相关研究的发展状况,指导未来研究方向,还可以为广大研究者阅读文献提供参考。 杨全增 张成俊 姜金 丁宁 李忠浩 夏亚一关键词:骨细胞 文献计量学