李宏博
- 作品数：13 被引量：44H指数：4
- 供职机构：河北医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金河北省教育厅高等学校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞因子在狼疮性肾炎发病中的作用及机制研究
- 刘淑霞封晓娟刘青娟郝军张玮邢玲玲郭惠芳李宏博张玉军杜云霞
- 随着医学的发展和进步，系统性红斑狼疮(SLE)的治疗措施不断得以完善，病人死亡率显著降低，病人的生存期得以延长，但在中国该病的患病率却逐年上升，明显高于其他亚太地区。2015年的研究数据显示：肾脏受累仍是中国SLE患者死...
- 关键词：
- 关键词：系统性红斑狼疮免疫抑制剂
- SIRT1对高糖刺激下肾小管上皮细胞HK-2影响及机制研究
- 吴海江邓新娜李宏博郭庆军韦金英杜春阳史永红段惠军
- 该研究采用细胞培养、质粒构建、基因转染、Real-time PCR、Western blot、免疫共沉淀、TUNEL、免疫组化等技术，研究了高糖培养条件下人肾小管上皮细胞表型转化的机制；证明SIRT1参与了人肾小管上皮细...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病肾病肾小管上皮细胞药物防治
- 沉默调节蛋白1过表达通过抑制结缔组织生长因子改善转化生长因子-β_1诱导人肾小管上皮细胞株的凋亡被引量：5
- 2015年
- 目的观察沉默调节蛋白1(Sirt1)过表达对转化生长因子(TGF)-β1诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制研究。方法将体外培养人肾小管上皮细胞分为正常对照组、TGF-β1刺激组及TGF-β1+Sirt1过表达组。采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;流式细胞术及hoechst33258染色法分别检测细胞凋亡百分比;蛋白质印迹法检测Sirt1、结缔组织生长因子(CTGF)、Bax、Bcl-2的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Real time-PCR)检测Sirt1、CTGF、Bax、Bcl-2m RNA水平;活性比色法检测Sirt1活性;免疫细胞化学方法检测Sirt1表达。结果与正常对照组相比,TGF-β1刺激组肾小管上皮细胞Sirt1表达及活性均显著下降,同时CTGFm RNA及蛋白水平显著上升,细胞凋亡百分比明显增加(P<0.01),Bax/Bcl-2比率明显升高(P<0.05)。Sirt1过表达能够显著抑制TGF-β1诱导的CTGF水平升高,降低肾小管上皮细胞凋亡百分比,减少Bax/Bcl-2比率(P<0.05)。结论 Sirt1过表达能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞凋亡,并且该作用的实现可能是部分通过抑制CTGF实现的。
- 董莉王晨史永红韦金英杜春阳李宏博吴海江任韫卓
- 关键词：转化生长因子Β肾小管上皮细胞
- 狼疮性肾炎肾小球中nestin和活化型Caspase 3的表达及意义被引量：10
- 2016年
- 目的探讨狼疮鼠肾小球中nestin和足细胞中活化型Caspase 3的表达变化及其与小鼠蛋白尿的关系。方法选取30周龄雌性MRL/MPJ小鼠和MRL/faslpr小鼠为研究对象,分别设为对照组和狼疮性肾炎模型组。血、尿生化检测小鼠肾功能改变;采用免疫组化和Western blot技术检测小鼠肾小球中活化型Caspase 3蛋白的表达;免疫组化法检测小鼠肾小球中nestin蛋白的表达;免疫荧光双染技术检测肾小球中活化型Caspase 3与nestin共表达。结果 (1)与正常对照组相比,狼疮组小鼠24 h尿蛋白(Upro)明显升高(P<0.05),而尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)在两组之间差异无显著性。(2)透射电镜结构显示,狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球上皮细胞出现足突融合,基膜出现明显的不规则增厚。(3)与正常对照组相比,活化型Caspase 3在狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球中表达增高;(4)免疫组化结果显示,nestin阳性信号主要定位于细胞质和细胞核,定量分析结果显示,与正常对照组相比,狼疮性肾炎模型组肾小球中nestin蛋白表达上调。(5)免疫荧光双染检测结果显示,正常对照组中仅见nestin蛋白表达,未见明显的nestin和Caspase 3共定位表达,在狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球中出现了nestin蛋白和Caspase 3蛋白明显共定位。(6)相关性分析:狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球中活化型Caspase 3蛋白的表达量与24 h Upro呈明显正相关(r=0.827,P=0.006)。结论足细胞骨架结构的改变和(或)足细胞凋亡可能在狼疮性肾炎发病过程中发挥重要的作用。
- 杨敏封晓娟吴超董娜刘金熹李宏博张玉军刘淑霞
- 关键词：狼疮性肾炎足细胞CASPASE3NESTIN
- 戊地昔布对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察戊地昔布(Valdecoxib)对COX-2高表达的人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响。方法将体外培养HT-29细胞分为正常组(C)、药物处理组(V)及溶剂对照组(S)。采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测COX-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Bcl-2、p38 MAPK、p-p38MAPK。结果与正常组相比,药物处理组细胞凋亡明显增加(P<0.05),cleaved caspase-3和p-p38MAPK表达增高,Bax/Bcl-2比率明显升高(P<0.05)。Valdecoxib干预能够显著促进HT-29细胞凋亡,上调cleaved caspase-3和p-p38 MAPK的表达,增加Bax/Bcl-2比率。结论 COX-2选择性抑制剂Valdecoxib能够促进HT-29细胞凋亡部分可能是通过激活p38MAPK信号通路而实现的。
- 韦金英刘玉李宏博王烨张海强韩彩丽
- 关键词：结肠癌HT-29细胞戊地昔布凋亡
- 缬沙坦对尾加压素Ⅱ诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察缬沙坦对尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)对肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将体外培养人肾小管上皮细胞(human kidney proximal tubular cell,HK-2)分为正常对照组、10^(-8)mol/L UⅡ刺激组和10^(-8)mol/L UⅡ+10μmol/L缬沙坦组。采用Armexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡百分比;Western-Blot检测Bax、Bcl-2的表达;荧光实时定量PCR(Real time-PCR)检测Bax、Bcl-2mRNA水平变化。结果①FCM法检测显示,与正常对照组相比,10^(-8)mol/L UⅡ刺激组细胞凋亡百分比显著升高(P<0.01)。10μmol/L缬沙坦能显著降低10^(-8)mol/L UⅡ诱导细胞凋亡的百分比(P<0.01)。②Western-Blot显示,10^(-8)mol/L UⅡ刺激组,与正常对照组相比,Bcl-2表达显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达无明显变化(P>0.05),Bax/Bcl-2比率明显升高(P<0.01)。与UⅡ刺激组相比,缬沙坦使Bcl-2表达显著升高(P<0.01),Bax蛋白表达无明显变化(P>0.05),Bax/Bcl-2比率明显降低(P<0.01)。③Real time-PCR显示,10^(-8)mol/L UⅡ刺激组细胞Bcl-2mRNA表达显著减少(P<0.01),BaxmRNA无明显变化(P>0.05)。与UⅡ刺激组相比,缬沙坦显著升高Bcl-2mRNA水平(P<0.01),BaxmRNA无明显变化(P>0.05)。结论缬沙坦的肾脏保护作用可能部分是通过抑制UⅡ诱导的肾小管上皮细胞凋亡实现的。
- 任韫卓史永红韦金英杜春阳李宏博段惠军
- 关键词：上皮细胞
- S3I-201在狼疮鼠肾小管间质病变中的作用被引量：2
- 2016年
- 目的探讨STAT3信号抑制剂S3I-201在狼疮性肾炎小鼠肾小管间质病变中的作用。方法 MRL/lpr鼠随机分为狼疮肾炎组、S3I-201处理组和溶剂对照组,以MRL/Mp J鼠作为正常对照组,收集血、尿进行生化指标检测;收集肾组织后免疫组化染色检测FN蛋白的表达;Western blot法检测E-cadherin、α-SMA、MCP-1、ICAM-1及STAT3和p-STAT3的表达水平。结果与正常对照鼠相比,MRL/lpr鼠肾小管上皮细胞E-cadherin表达减少,而α-SMA表达增多,肾组织中炎症因子MCP-1和ICAM-1以及细胞外基质蛋白FN的表达上调,同时存在STAT3信号的磷酸化激活。S3I-201干预可抑制STAT3的磷酸化,同时下调E-cadherin、α-SMA、MCP-1、ICAM-1及FN的表达。结论 S3I-201可能通过抑制STAT3活化改善狼疮鼠肾小管间质病变。
- 杜云霞张玮李宏博封晓娟王沁华邢玲玲王辉刘青娟
- 关键词：狼疮性肾炎肾小管间质病变STAT3
- 白藜芦醇对高糖刺激下人肾小管上皮细胞发生EMT的作用被引量：8
- 2015年
- 该文研究了白藜芦醇及其下游信号分子沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对高糖培养条件下人肾小管上皮细胞(HK-2)转化的作用和机制。体外常规培养HK-2细胞,采用Western blot检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)及信号蛋白SIRT1、过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1α,PGC-1α)的蛋白表达,采用细胞免疫荧光对SIRT1的表达进行检测。与高糖刺激0 h组相比,高糖刺激12,24,48 h均导致HK-2细胞SIRT1蛋白明显减少,且随时间呈下降趋势;低糖培养细胞0,12,24,48 h的SIRT1蛋白表达没有明显差异。白藜芦醇明显提高高糖培养条件下HK-2细胞的SIRT1表达,而SIRT1特异性抑制剂EX527能够减弱白藜芦醇的作用。进一步的研究表明,白藜芦醇能够明显增加HK-2细胞中E-钙黏着蛋白的表达,抑制高糖导致的α-SMA表达升高,而EX527对高糖诱导的HK-2细胞转分化没有显著影响。此外,研究发现,白藜芦醇能够明显增加高糖刺激下HK-2细胞PGC-1α蛋白表达。该研究结果提示,白藜芦醇可能通过SIRT1和PGC-1α信号通路抑制了高糖诱导的HK-2细胞转化过程。
- 吴海江邓新娜史永红郭庆军李宏博彭金凯庞磊崔桂鹏段惠军
- 关键词：白藜芦醇HK-2细胞PGC-1Α
- 抑瘤素M在狼疮鼠肾组织中的表达及意义
- 2017年
- 该文探讨了抑瘤素M(oncostatin M,OSM)在狼疮鼠肾组织中的表达及意义。以MRL/Mp J鼠作为正常对照鼠,MRL/lpr鼠随作为狼疮鼠。收集动物血、尿进行生化指标检测;收集肾组织后免疫组织化学和酶联免疫吸附实验检测OSM的表达情况;qRT-PCR和Western blot分别检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及I型胶原(collagen I,Col I)mRNA和蛋白的表达;实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)mRNA的表达。结果发现,与对照鼠相比,狼疮鼠肾组织中OSM的表达明显增多,且其表达与血尿素氮、24 h尿蛋白及α-SMA、Col I和FN的表达呈正相关,而与E-cadherin的表达呈负相关。结果表明,OSM在狼疮鼠肾组织中的表达升高,且其高表达可能与狼疮鼠肾功能减退及肾小管上皮细胞转分化有一定的关系。
- 张玮王辉李宏博杜云霞邢玲玲徐宁刘青娟
- 关键词：狼疮性肾炎MRL/LPR小鼠抑瘤素M肾小管上皮细胞
- Foxo1在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞的表达研究被引量：4
- 2013年
- 目的探究Foxo1在糖尿病大鼠肾脏的表达和脂质代谢的关系。方法构建1型糖尿病大鼠模型,喂养2个月后处死,取肾脏组织,免疫组织化学和Western blot检测Foxo1、Akt和SREBP-1在肾脏的表达;油红O染色及组织脂质定量检测肾组织中脂质含量。结果糖尿病大鼠出现明显的多饮、多食、多尿症状,体重较正常组明显下降,血糖、血甘油三酯及血尿素氮升高。免疫组织化学检测显示,磷酸化Foxo1和Foxo1表达定位于肾小管上皮细胞。Western blot检测可见与正常组大鼠相比,磷酸化Foxo1在糖尿病大鼠表达升高;而总Foxo1在两组间表达未见差异。相似地,磷酸化Akt和SREBP-1在糖尿病组大鼠表达也均明显升高。油红O染色表明脂滴沉积于糖尿病大鼠肾小管上皮细胞,定量甘油三酯测定显示糖尿病组肾脏脂质含量高于正常对照大鼠。结论磷酸化Foxo1在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞表达升高,可能和SREBP-1上调及细胞内脂质沉积相关。
- 郝军朱琳李凡刘巍刘淑霞刘青娟赵松李宏博段惠军
- 关键词：蛋白激酶B脂质沉积肾小管上皮细胞
