李君华 作品数:29 被引量:40 H指数:4 供职机构: 河北省科学院 更多>> 发文基金: 河北省科技支撑计划项目 石家庄市科技局“科技支撑计划项目” 河北省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 更多>>
西马特罗单克隆抗体的制备及免疫学特性鉴定 被引量:5 2016年 为建立检测西马特罗(CIM)的免疫学方法,本试验采用重氮化法成功合成了人工免疫抗原CIM-BSA,并用人工合成的抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术制备抗CIM的单克隆抗体(CIM m Ab),并对其效价、敏感性、特异性和亲和性等免疫学特性进行了鉴定。结果表明,免疫的5只小鼠血清效价均达到1∶1×105,IC50均在10ng/m L以下,其中4号、5号小鼠的效价达2×105,IC50小于1ng/m L。融合后筛选出1C8、2G11、2D4共3株分泌抗CIM小分子的高特异、高灵敏的单克隆抗体的细胞株,细胞培养上清ELISA效价分别为1∶1.28×104、1∶6.4×103、1∶3.2×103,腹水效价分别为1∶4.1×105、1∶2.0×105、1∶2.0×105,3株细胞株分泌的抗CIM的单克隆抗体经亚型试剂盒测定均为Ig G1/λ链,亲和常数(Ka)经测定分别为5.5×108、2.4×108、1.0×108(L/mol),其中亲和力最高的细胞株1C8对CIM的IC50为0.288 ng/m L,与CL小分子的CR%为0.576%,与其他类似物的CR%均小于0.02%。本试验获得了灵敏度高、特异性好的CIM m Ab,为CIM残留检测的免疫学方法的建立奠定了基础。 李君华 吴萌 程华 李亚璞 闫静辉 李春生关键词:单克隆抗体 免疫学特性 ELISA 磺胺二甲嘧啶酶联免疫检测试剂盒 本发明涉及一种磺胺二甲嘧啶酶联免疫检测试剂盒,其盒体中包括:(1)包被有磺胺二甲嘧啶抗原的酶标板;(2)磺胺二甲嘧啶特异性抗体;(3)酶标记物;(4)磺胺二甲嘧啶标准品溶液; (5)A底物显色液和B底物显色液; (6)终... 李君华 吴萌 李春生 程华 闫静辉 齐颖颖文献传递 沙丁胺醇人工抗原的合成研究 目的:试验旨在研究沙丁胺醇(Sal)人工抗原的合成。方法与结果:本试验采用琥珀酸酐法和碳二亚胺法使沙丁胺醇与蛋白质分子偶联合成人工抗原,并对合成的抗原进行鉴定,为进一步开发其残留检测的ELISA试剂盒、胶体金试纸和免疫传... 李春生 李君华 闫静辉文献传递 一种快速免疫检测牛奶中β-内酰胺酶的方法 本发明提供了一种快速免疫检测牛奶中β-内酰胺酶的方法,属于免疫检测技术领域。其特征在于利用包被于酶标板上的鼠抗β-内酰胺酶单克隆抗体,与兔抗β-内酰胺酶多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔抗体组成三抗体夹心法试剂,进行三... 闫静辉 张小兵 吴萌 李春生 邸禄芹 齐颖颖 李君华 高志肖 陈英珠 程华 董超 李亚璞 谢莉 时玮文献传递 西马特罗免疫抗原合成方法的比较 被引量:7 2014年 为探讨西马特罗(CIM)免疫抗原合成的有效途径,本研究采用重氮化法、碳化二亚胺法和BS3法分别合成CIM免疫抗原,并采用SDSPAGE和紫外光谱扫描对合成抗原进行了鉴定,并将3种免疫抗原免疫BALB/c小鼠,对免疫效果进行了比较。试验表明,3种方法均合成了CIM免疫抗原,经偶联比的计算,重氮化法的偶联比比较理想,且免疫小鼠后可获得高效价、高特异的抗体。 李春生 李君华 武孝利 李素红 闫静辉 吴萌关键词:半抗原 沙丁胺醇人工抗原的合成研究 目的:试验旨在研究沙丁胺醇(Sal)人工抗原的合成.方法与结果:本试验采用琥珀酸酐法和碳二亚胺法使沙丁胺醇与蛋白质分子偶联合成人工抗原,并对合成的抗原进行鉴定,为进一步开发其残留检测的ELISA试剂盒、胶体金试纸和免疫传... 李春生 李君华 闫静辉抗苯乙醇胺A单克隆抗体、抗原检测试剂盒及应用 本发明涉及抗苯乙醇胺A单克隆抗体,以及产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、含有该抗苯乙醇胺A单克隆抗体的检测试剂盒,属于免疫学技术领域和瘦肉精检测技术领域。本发明所述的抗苯乙醇胺A单克隆抗体的效价高达1:409600,亲和常... 李春生 李君华 吴萌 李亚璞 程华 陈英珠 张小兵 董超 闫静辉文献传递 乳及乳制品中β-内酰胺酶标准化检测技术研究-免疫快速检测方法研究 张小兵 吴萌 李春生 邸禄芹 齐颖颖 李君华 霍惠玲 刘松雁 高志肖 李亚璞 陈英珠 程华 董超 谢莉 时玮 闫静辉 该项目研制并制备出鼠抗β-内酰胺酶单克隆抗体,效价高达1:1310万;亲和力高达1×1010L/mol。研制并制备出兔抗β-内酰胺酶多克隆抗体。效价高达1:655万。研制出鼠抗β-内酰胺酶单克隆抗体三夹心检测方法,实现了...关键词:关键词:乳制品 Β-内酰胺酶检测 赭曲霉毒素A人工抗原合成及多克隆抗体的制备 2015年 试验采用活性酯法将赭曲霉毒素A(OTA)分别与BSA、KLH偶联,合成人工免疫抗原OTA-BSA和人工检测抗原OTA-KLH,并通过紫外光谱扫描(UV)、SDS-PAGE验证偶联成功,OTA-BSA的偶联比为12.5∶1,OTA-KLH的偶联比为10∶1。用OTA-BSA免疫BALB/c小鼠,获得高效价、高特异的小鼠多抗血清,多抗血清效价达1∶2×105以上,在0.1 ng/m L^8.1 ng/m L的范围内,线性关系良好,R2=0.996 1,IC50为0.18 ng/m L。鼠多抗血清除与赭曲霉毒素B有18%的交叉反应率外,与玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B 1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇等类似物的交叉反应率(CR)均小于0.2%,特异性良好。 吴萌 李君华 李春生 齐颖颖 程华 闫静辉 张娜关键词:赭曲霉毒素A 人工抗原 ELISA 沙丁胺醇半定量检测试剂卡 本发明涉及一种沙丁胺醇半定量检测试剂卡,其包括外壳和设置在外壳内的试纸条;所述试纸条包括基层PVC板、粘贴在所述基层PVC板中央部位的检测反应部分、分别粘贴在所述检测反应部分左、右两端的胶体金垫和吸水垫,以及粘贴在所述胶... 李春生 吴萌 李君华 程华 闫静辉 齐颖颖 张小兵 陈英珠 李亚璞 董超文献传递