李冬冬 作品数:11 被引量:16 H指数:4 供职机构: 北京农学院 更多>> 发文基金: 北京市教委资助项目 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
一种用于培养猪孤雌激活胚及体外受精胚胎的体外培养液 本发明公开了一种猪体外胚胎培养液。本发明所提供的猪体外胚胎培养液,是在NCSU-23胚胎培养液中加入终浓度为0.1~1.0μg/mL的小檗碱后得到的培养液。本发明所提供的猪体外胚胎培养液中加入了中药单体成分——小檗碱,实... 高建明 史雅然 赵菊 李冬冬 张志刚 徐捷 张超文献传递 3种中药单体成分对猪孤雌激活胚胎体外发育效果的影响 被引量:5 2009年 为了建立良好的猪胚胎体外培养体系,以体外成熟培养的卵母细胞为材料,研究中药单体成分川芎嗪(Lig)、小檗碱(BR)和淫羊藿苷(Ica)对猪孤雌激活胚胎体外培养效果的影响。以NCSU-23基础培养液为对照组,采用同一种孤雌激活方案,在培养液NCSU-23中分别添加中药单体成分川芎嗪、小檗碱和淫羊藿苷的小、中、大剂量(Lig1、Lig2、Lig3;BR1、BR2、BR3;Ica1、Ica2、Ica3)为3个试验组,比较了各组猪孤雌激活早期胚胎的发育效果,从而进行中药单体成分最佳浓度的筛选。结果显示:①孤雌激活胚胎体外发育至48h的卵裂率和第7天的囊胚发育率,Lig1组与对照组和Lig2组之间差异显著(P<0.05),与Lig3组差异极显著(P<0.01)。②BR2组的卵裂率与对照组和BR3组之间差异显著(P<0.05),与BR1组无显著差异(P>0.05)。第7天囊胚发育率BR2组显著高于其他各组(P<0.05),其他各组之间无显著差异(P>0.05)。③Ica2组胚胎发育至48h的卵裂率和第7天的囊胚发育率均显著高于其他各组(P<0.05),而其他各组之间无显著差异(P>0.05)。由此可见,在NCSU-23基础液中添加3种中药单体成分最佳浓度均能显著提高猪孤雌胚体外发育效果。 徐捷 李冬冬 张志刚 刘笑然 赵曌 赵菊 相荣科 高建明关键词:孤雌激活 体外发育 3种中药有效成分对小鼠胚胎体外发育的影响 被引量:7 2006年 以mCZB添加抗生素为对照组,以分别添加0.1 mg/L小檗碱(berberine,BR)、0.5 mg/L川芎嗪(ligustrazine,Lig)和4 mg/L黄芩苷(baicalin,Bai)为试验组,比较各组胚胎孵化率、微滴中一氧化氮(Nitric oxide,NO)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及孵化胚胎的细胞数量,从而探讨中药有效成分对小鼠早期胚胎体外发育的影响。结果显示,Bai组(80.2%,81.3%)、Lig组(78.9%,77.6%)及BR组(76.7%,71.6%)胚胎孵化率极显著高于对照组(50.7%、47.8%)(P<0.01)。各组间NO含量,72 h较24 h均有减少,而120 h又均有增加且最高。各组间MDA含量,72 h和120 h与24 h比较呈现增加趋势,除Bai组120 h外,对照组均高于试验组。孵化胚胎细胞计数结果显示,BR组(87.2±8.6)、Lig组(83.9±7.7)和Bai组(81.9±6.2)与对照组(77.4±5.6)差异极显著(P<0.01)。结果表明:3种中药有效成分均能促进小鼠早期胚胎的体外发育及胚胎细胞增殖,并对NO和MDA含量有一定影响。 孙玉成 高建明 于同泉 陈武 杨柳 穆祥 张建芳 傅文栋 李冬冬关键词:中药有效成分 早期胚胎 体外发育 一氧化氮 丙二醛 三种中药单体成分对猪孤雌激活胚胎体外发育效果影响的研究 [目的]建立良好的猪胚胎体外培养体系。[方法]试验以体外成熟培养的卵母细胞为材料,研究中药单体成分川芎嗪(Lig)、小檗碱(BR)和淫羊藿苷(Ica)对猪孤雌激活胚胎体外培养效果的影响。以NCSU-23基础培养液为对照组... 徐捷 李冬冬 张志刚 刘笑然 赵璺 赵菊 相荣科 高建明关键词:中药成分 孤雌激活 体外培养 卵母细胞 文献传递 小鼠卵泡膜细胞成熟过程中Dnmts表达变化的研究 2011年 【目的】揭示小鼠卵泡膜细胞成熟过程中DNA甲基转移酶(Dnmts)表达的变化,并初步探讨其可能的机制。【方法】对新生昆明白小鼠第3、5及8天(days post parturition,dpp3、dpp5和dpp8)的卵巢进行切片,经H.E染色,分别观察原始、初级、次级卵泡膜细胞的形成情况,统计各级卵泡的比例并对卵泡外缘的膜细胞进行计数;半定量PCR检测成熟膜细胞特异性表达基因CYP17A1及Dnmts转录水平在dpp3、dpp5、dpp8卵巢中的变化;免疫组化观察Dnmt1蛋白在dpp3、dpp5、dpp8小鼠卵巢中的分布情况。【结果】小鼠dpp3卵巢中的初级卵泡外缘存在"梭形细胞";随出生后时间的推移,原始卵泡比例持续下降(P<0.01),次级卵泡比例持续升高(P<0.01),dpp3、dpp5初级卵泡比例无显著差异(P>0.05),而dpp8下降(P<0.05);初级卵泡周围"梭形细胞"数量的平均水平在dpp3和dpp5无显著差异(P>0.05),在dpp8上升(P<0.05);次级卵泡周围"梭形细胞"数量的平均水平在dpp3和dpp5无显著差异(P>0.05),在dpp8上升(P<0.01)。CYP17A1转录水平在dpp3、dpp5极低且无显著差异(P>0.05),在dpp8升高(P<0.01);Dnmt1s转录水平在dpp3、dpp5、dpp8持续升高(P<0.01);Dnmt1o转录水平在dpp5升高(P<0.05),在dpp8下降(P<0.01);Dnmt3a转录水平在dpp5升高(P<0.01),dpp3和dpp8转录水平无显著差异(P>0.05)。Dnmt1免疫组化显示,卵泡颗粒细胞在dpp5、dpp8卵巢中着色呈阳性,dpp3则呈阴性;同时,"梭形细胞"在dpp3、dpp5卵巢中着色呈阴性,dpp8则呈阳性。【结论】膜细胞成熟可能导致Dnmt3a转录水平下降。Dnmt1s转录及表达水平在膜细胞成熟前较低,分化成熟后上调从而在膜细胞增殖过程中维持新建立的甲基化模式。 刘笑然 李冬冬 钟友刚 史雅然 张超 张松 刘琳 高建明关键词:DNA甲基转移酶 卵泡膜细胞 小鼠 川芎嗪和小檗碱对猪卵母细胞体外成熟效果的影响 被引量:5 2007年 以mTCM-199添加抗生素为对照组,以分别添加0.5μg/mL川穹嗪(ligustrazine,Lig)和0.1μg/mL小檗碱(berberine,BR)为试验组,初步探讨川芎嗪、小檗碱对猪卵母细胞体外成熟效果的影响,以期提高猪卵母细胞体外成熟率。试验结果表明:以卵丘扩散和第一极体排出率分别作为猪卵母细胞体外成熟的判断标准,Lig组和BR组均显著高于对照组(P<0.05),Lig组和BR组间无显著差异(P>0.05)。结论:川芎嗪和小檗碱对猪卵母细胞体外成熟具有一定的促进作用。 张志刚 李冬冬 沈月娥 赵菊 赵瞾 徐捷 高建明关键词:川芎嗪 小檗碱 猪卵母细胞 体外成熟 三种中药单体成分对猪孤雌激活囊胚细胞数及细胞凋亡影响的研究 [目的]探讨中药单体成分川芎嗪(Ligust razine,Lig),小檗碱(Berberine,BR),淫羊藿苷(Icariin,Ica)对猪孤雌激活胚胎体外发育中的促细胞增殖作用,比较不同中药单体成分添加浓度对囊胚细... 李冬冬 徐捷 张志刚 赵曌 赵菊 相荣科 刘笑然 高建明关键词:中药单体 囊胚细胞 细胞凋亡 体外发育 胚胎培养 文献传递 哺乳动物附植前胚胎信号传导通路研究进展 细胞间信号传导影响着近乎每一个生理反应,它确保一特定类型的全部细胞都接收到并转化信号.细胞间联系在机体的分化和发育中有相当的重要性.本文综述了MAPK、Wnt、PKC、表皮生长因子家族、Hedgehog、PPARs、PI... 李冬冬 高建明关键词:哺乳动物 附植前胚胎 信号转导 文献传递 三种中药单体成分对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后卵裂效果的影响 卵母细胞是胚胎工程技术研究中重要的实验材料之一,研究和建立卵母细胞体外成熟培养方法,可以充分利用屠宰动物的卵巢资源,为体外胚胎生产、核移植.胚胎干细胞等的研究提供大量优质卵母细胞。目前,大量的研究人员就有关卵母细胞基础成... 赵墨 张志刚 李冬冬 徐捷 赵菊 相荣科 高建明关键词:中药单体 卵母细胞 体外成熟 孤雌激活 文献传递 用于培养猪孤雌激活胚及体外受精胚胎的体外培养液 本发明公开了一种猪体外胚胎培养液。本发明所提供的猪体外胚胎培养液,是在NCSU-23胚胎培养液中加入终浓度为0.05~5.00μg/mL的川芎嗪后得到的培养液。本发明所提供的猪体外胚胎培养液中加入了中药单体成分——川芎嗪... 高建明 史雅然 赵菊 李冬冬 张志刚 徐捷 张超文献传递