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李会广
作品数:
2
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供职机构:
中国科学院生物物理研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
施庆利
香港浸会大学
黄岳顺
香港浸会大学
董贻诚
香港浸会大学
李建辉
香港浸会大学
颜丽
香港浸会大学
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作者
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吴伸
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颜丽
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李建辉
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董贻诚
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黄岳顺
2篇
李会广
2篇
施庆利
传媒
2篇
生物物理学报
年份
2篇
1999
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亚天花粉蛋白突变体(R163H n-TCS和R163Q n-TCS)的晶体结构研究
1999年
用悬滴汽相扩散法得到了R163Hn-TCS和R613Qn-TCS的晶体,在Mar-Research面探测器系统上分别收集了0.200和0.205nm分辨率的X-射线衍射数据。采用同晶差值傅立叶法解析结构,用X-PLOR软件包进行修正,最后的晶体学R因子分别为0.184和0.185,键长偏差分别为0.0013nm和0.0014nm,键角偏差分别为2.590°和2.815°。结构测定显示R163Hn-TCS和R163Qn-TCS与n-TCS的主链结构无较大变化,活性口袋区的结构和氢键体系发生了明显变化。生化分析表明R163Hn-TCS具有糖苷酶活性,R163Qn-TCS没有糖苷酶活性。这说明,第163位侧链的H+对n-TCS发挥N-糖苷酶活性至关重要。
李会广
吴伸
颜丽
李建辉
李建辉
施庆利
黄岳顺
关键词:
突变体
晶体结构
neo Trichosanthin及其突变体Y70A neo Trichosanthin的晶体结构研究
1999年
天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)的一个亚型,neoTrichosanthin(n-TCS),及其突变体Y70An-TCS被克隆和表达为重组蛋白。用悬滴汽相扩散法得到n-TCS和Y70An-TCS的晶体。在MarResearch面探测器系统上分别收集了0.20nm和0.205nm分辨率的X射线衍射数据。用同晶差值傅立叶法解析了结构。最后晶体学R因子分别为0.183和0.184。键长的r.m.s.偏差分别为0.0016nm和0.0014nm,键角的r.m.s.偏差分别为2.930°和2.732°。n-TCS虽然与TCS有11个氨基酸的差别,但它们都不是活性口袋区的关键残基。并且这些氨基酸的替换绝大多数属于保守替换。和TCS相比,这11个残基及其附近残基的主链间形成的保守氢键在n-TCS中没被破坏,它们所处的二级结构也保持不变。所以n-TCS的整体结构与TCS十分相近。Y70An-TCS的晶体在收集数据前曾用含5'AMP的缓冲液浸泡过,活性口袋区没发现可与Adenine相匹配的密度。用HPLC检测Y70An-TCS与5'AMP作用后产物,层析图谱上相应位置也没有出现Adenine。上述结果表明,7?
颜丽
吴伸
李会广
李建辉
黄岳顺
施庆利
董贻诚
关键词:
天花粉蛋白
失活蛋白
晶体结构
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