朱智强
- 作品数：26 被引量：17H指数：2
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市中医管理局青年科学研究资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 羟基脲诱导神经管畸形小鼠模型及与其他小鼠模型的比较研究被引量：1
- 2021年
- 目的本研究拟通过干扰新的叶酸相关代谢-核苷三磷酸还原成相应的脱氧核苷三磷酸通路中的关键酶-核苷酸还原酶,诱导构建神经管畸形(NTDs)小鼠模型,并且与前期构建的NTDs小鼠模型进行比较。方法实验小鼠选用C57BL/6J小鼠,购自北京华阜康公司,雌鼠60只,雄鼠30只,小鼠年龄7~8周,体重18~20 g,常规饲养于SPF级动物房。小鼠饲养一周后,晚上18∶00按照雄雌(1∶2)进行合拢,早上分笼将有阴栓的小鼠标记为孕0.5 d(E 0.5)。按照随机分组的方法将小鼠分为6组。其中实验组5组,在神经管闭合前的孕7.5 d(E 7.5),给予5种剂量的羟基脲进行腹腔注射;正常对照组,采用0.9%的氯化钠水溶液注射。采用不同剂量的羟基脲(HU)腹腔注射C57BL/6J孕鼠,诱导构建最佳小鼠NTDs模型,筛选出HU的最佳造模剂量为NTDs组。利用Western blot方法和免疫组化方法观察神经上皮细胞增殖和凋亡的情况,与前期诱导的NTDs小鼠模型中的结果进行对比。结果HU可诱导出NTDs的小鼠模型,免疫组化检测结果显示,畸形胚胎中的PCNA的阳性细胞低于正常胚胎组;Caspase3的阳性细胞高于正常组(P<0.05)。PCNA蛋白在NTDs组中的表达水平明显低于正常对照组(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白在NTDs组中的表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),并且与前期诱导模型的结果一致。结论本研究通过干扰核苷酸还原酶,引起了神经管发育过程中细胞增殖和凋亡的失衡,从而诱导构建出NTDs小鼠模型,为进一步研究NTDs的机制提供了新的动物模型。
- 官臻王秀伟朱智强岳慧轩李莘秦佳星牛勃王建华
- 关键词：羟基脲神经管畸形细胞增殖凋亡小鼠
- 一种引流管液中的微生物收集装置
- 本实用新型涉及医学和实验动物医疗器械技术领域，具体为一种引流管液中的微生物收集装置，包括装置主体，所述装置主体的一侧安装有引流液收集端，所述引流液收集端的一侧设置有收集接口端，所述引流液收集端的右侧连接有引流管出口端，所...
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- 一种引流管样本收集装置
- 本发明涉及医学和实验动物医疗器械技术领域，且公开了一种引流管样本收集装置，包括：吸附装置，所述吸附装置安装于装置主体内；用于吸附尿液中的微生物或蛋白质的吸附材料，所述吸附材料填充于吸附装置内；本发明，结构创新，不仅能选择...
- 朱智强张霆崔晓岱谢向辉邱颖段顺王浩然韩金
- 甲氨蝶呤对早期神经胚基因表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:利用甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)干预孕鼠,探讨MTX对早期神经胚基因表达的影响。方法:用MTX(4.5 mg/kg体重)干预孕鼠,通过NimbleGene表达谱芯片、Real time-PCR及免疫组化等方法进行差异表达基因的筛选和验证。结果:MTX处理后神经管畸形(NTDs)发生率为32.1%。表达谱芯片筛选出166个差异表达基因,其中4个凋亡相关基因(Endog,Trp53,Casp3,Bax)均表现为上调(fold change>1.5,P<0.05),3个增殖相关基因(Ptch1,Pla2g4a,Foxg1)均表现为下调(fold change<0.67,P<0.05);NTDs胚胎神经上皮Caspase-3表达显著升高(P<0.05),phospho-histone H3(pH3)表达显著降低(P<0.05)。结论:MTX影响了早期神经胚的基因表达,尤其是引起了凋亡、增殖相关基因表达的异常,这可能在叶酸缺乏引起NTDs发生的相关机制之一。
- 季成王秀伟王建华官臻朱智强谢秋张霆牛勃
- 关键词：神经管畸形甲氨蝶呤凋亡增殖
- 地龙祛痰组份的纯化效率及其溶菌作用
- 2018年
- 目的了解地龙祛痰组份的纯化效率,检测其对不同类型核酸的降解作用、溶菌酶活性以及EDTA对其溶菌活性的影响。方法酸、碱变性沉淀及丙酮沉淀法制备祛痰组份粗提物,Bradford法检测蛋白含量,Yasuda法检测比活力,紫外光吸收法、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳检测对不同类型核酸的降解作用,比浊法检测地龙祛痰组份对溶壁微球菌的降解作用,将所得数据用多因素方差分析,比较EDTA对酶比活力的影响。结果 1000g鲜地龙纯化出4.12g粗提物,比活力纯化倍数为69。对环状、线状双链和单链DNA均有降解作用。对RNA无降解作用。含和不含EDTA的反应体系中,溶菌酶样比活力分别为400U/mg和410U/mg;EDTA对溶菌酶样作用没有差异(P>0.05)。结论地龙祛痰组份纯化后蛋白含量减少,脱氧核糖核酸酶样活性提高,对不同类型的DNA具有降解作用,不能降RNA,具有溶菌酶样活性。EDTA不影响其溶菌酶样活性。
- 朱智强孙春容王秀伟官臻牛勃
- 关键词：地龙祛痰脱氧核糖核酸酶溶菌酶比活力
- 胸苷酸合成酶抑制剂在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用
- 本发明涉及胸苷酸合成酶抑制剂在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用，具体而言，是采用胸苷酸合成酶抑制剂干预孕鼠，造成胸腺嘧啶脱氧核苷的代谢障碍，引起鼠胚胎发育异常，从而建立神经管畸形小鼠模型；所述应用，可行性强，容易操作，...
- 官臻牛勃张霆王秀伟王建华朱智强王芳
- 一种生物抑菌制剂及其应用
- 本发明属于制药领域，提供了一种生物抑菌制剂，所述制剂由蚯蚓提取物、核酸酶激活剂和溶菌酶组成，所述蚯蚓提取物的含量为0.01g/L‑2g/L，所述核酸酶激活剂的含量为1mM‑1000mM，所述溶菌酶的含量为0.1 g/L‑...
- 朱智强孙春荣王秀伟官臻杨爱云
- 一种超滤管电洗脱装置及应用研究
- 2010年
- 目的介绍一种自制超滤管电洗脱装置的制作方法,并与其他洗脱方法进行比较。方法以超滤管离心管、滤网和海绵制作成超滤电洗脱装置。待分离的蛋白样品用非变性聚丙酰胺凝胶电泳分离后染色、切胶、碎胶后,分别用上述自制超滤电洗脱装置、被动洗脱法和半透膜电洗脱法回收凝胶中的蛋白样品,再通过超滤离心进行脱盐浓缩。最后用Bradford法测定样品浓度,并比较三种洗脱方法的洗脱效率。结果超滤管电洗脱、被动洗脱和半透膜电洗脱分成0.5μg和5μg两组,以三种电洗脱法的蛋白回收率依次为:0.5μg组82%、44%、46%;5μg组77%、58.6%、63.6%。结论用超滤管自制的电洗脱装置制作简单方便,其回收效率比被动扩散法和半透膜电洗脱法高,特别适用于小量蛋白样品的回收。
- 朱智强牛勃
- 关键词：电洗脱超滤
- 5-氟尿嘧啶对神经管畸形胎鼠脑组织基因表达的影响被引量：2
- 2020年
- 目的利用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导C57BL/6J小鼠神经管畸形(neural tube defects,NTDs),观察5-FU对NTDs胎鼠脑组织基因表达的影响。方法采用无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6J小鼠,孕鼠随机分为实验组和对照组。在孕7.5 d时,实验组孕鼠腹腔注射12.5 mg/kg的5-FU(叶酸相关代谢通路中关键酶胸苷酸合成酶抑制剂);对照组孕鼠腹腔注射等体积的生理盐水。孕13.5 d时通过体视显微镜及HE染色观察胎鼠畸形及神经管发育情况。在此基础上利用表达谱芯片分析NTDs胎鼠脑组织中基因表达的变化,并利用实时荧光定量PCR进行验证。统计学方法采用t检验。结果实验组小鼠NTDs的发生率为42.3%(22/52),主要为露脑畸形;对照组无一例NTDs。HE染色可见NTDs胎鼠的端脑和后脑结构紊乱。表达谱芯片筛选出差异表达基因137个,其中表达上调的基因40个,表达下调的基因97个,这些基因主要参与了多器官发育、细胞增殖及分化等生物过程以及与脑部发育相关的重要通路。选择表达差异明显且与胚胎神经发育相关的基因Avp、Hes3和Wnt1进行实时荧光定量PCR验证,结果发现所验证的基因表达情况与表达谱芯片的结果一致。结论5-FU可能通过影响胚胎神经发育过程中与神经发育相关基因Avp、Hes3及Wnt1等的表达,进而导致NTDs的发生。
- 王秀伟官臻朱智强牛勃王建华
- 关键词：神经管畸形胚胎5-氟尿嘧啶基因芯片
- 抗叶酸药物在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用
- 本发明涉及抗叶酸药物在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用，具体而言，是采用抗叶酸代谢药物干预孕鼠，造成叶酸代谢障碍，引起鼠胚胎发育异常，从而建立起神经管畸形小鼠模型；本发明所采用的方法操作简单，重复性好，致畸率高，效果稳...
- 张霆谢秋牛勃向前王明生关涛王秀伟官臻王建华王国亮朱智强
- 文献传递
