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朱利塞: 作品数：34 被引量：101H指数：7; 供职机构：吉林大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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猪流行性腹泻病毒病S蛋白单抗制备及夹心ELISA检测PEDV方法的建立与应用被引量：15: 2017年; 应用PCR扩增出PEDV毒株的纤突糖蛋白S基因序列,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建出pGEX-4T-1-S表达载体。应用IPTG诱导表达重组S蛋白,并将重组蛋白以弗氏完全/不完全佐剂乳化后免疫小鼠,制备抗PEDV S蛋白的单克隆抗体,并以此建立了检测PEDV抗原的双抗体夹心ELISA方法,确定、优化了所建立的ELISA反应条件。以建立的双抗体夹心ELISA和RT-PCR方法对PEDV样品进行了比较检测,两者的符合率为100%。应用ELISA检测了吉林省疑似PED流行猪场的粪便样品,发现PEDV阳性检出率为68%。该研究为PED诊断及流行病学调查提供了一种特异、敏感、快速和易于在基层应用的技术方法及本病的防治提供了流行病学理论依据。; 王明月王明月刘亚静郭昌明朱利塞邢泽黎朱利塞欧阳红生王新平; 关键词：猪流行性腹泻猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA S蛋白

检测E种肠道病毒的免疫荧光试剂及其检测试剂盒: 本发明公开了检测E种肠道病毒的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，是应用本发明的检测E种肠道病毒的免疫荧光试剂，试剂建立的直接免疫荧光检测方法，既可用于临床快速诊断E种肠道病毒感染，也可用于E种肠道病毒抗原在组织中的定位与鉴定。...; 王新平邢泽黎朱利塞郭昌明刘丹盖小春张群袁悦刘亚静王方; 文献传递

吉林省不同地区牛肠道病毒遗传变异分析被引量：7: 2018年; 为了解近年来吉林省牛肠道病毒（bovine enteroviruses，BEV）感染流行情况及病毒株分子变异特征，本研究利用双抗体夹心ELISA方法，对采集于吉林省不同地区的326份疑似BEV感染的牛粪便样品进行检测，并对ELISA检测出的阳性样品进行病毒分离培养；同时对分离毒株5’UTR基因序列进行扩增、序列比对分析。结果表明，不同地区的牛群均存在程度不同的肠道病毒感染；BEV分离毒株的核苷酸序列与本实验室2012年分离的国内首株E种牛肠道病毒HY12基因序列的同源性为86．2％～96．9％。其中从公主岭地区分离的毒株GZL-6与HY12毒株差异性最大，其同源性只有86．2％；而与HY12同地区分离出的HY68毒株同源性只有86．3％。国内外现有BEV毒株序列遗传进化树分析结果显示，从吉林省新分离到11株BEV与HY12处在同一个分支。上述结果表明，新近分离的BEV毒株，无论源于HY12毒株的原地区还是其他不同地区，均有不同程度的核苷酸序列差异。本研究为BEV感染的诊断、防治及肠道病毒进化变异研究打下基础。; 刘亚静李欣张群赵又霓贾英琪鲁海冰郭昌明朱利塞朱利塞

G种肠道病毒检测抗体双夹心ELISA检测试剂盒: 本发明公开了检测G种肠道病毒病原的双抗体夹心ELISA试剂盒，它采用其碱基序列如序列表SEQ ID NO.1所示的VP1基因，表达的VP1蛋白，免疫BALB/C小鼠后制备的单克隆抗体为捕获抗体，免疫成年健康家兔后制备的多...; 王新平鲁海冰王明月朱利塞郭昌明刘亚静张群王芳; 文献传递

G种肠道病毒直接免疫荧光试剂及其试剂盒: 本发明公开了检测G种肠道病毒的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，是用荧光染料也可标记的VP1单克隆抗体，所述的VP1单克隆抗体，是利用G种肠道病毒的VP1蛋白，采用杂交瘤单抗制备技术获得；所述的VP1蛋白的氨基酸序列如序列表S...; 王新平鲁海冰郭昌明王明月刘亚静张群朱利塞王芳; 文献传递

从吉林省肉牛场新发疫病分离出E种肠道病毒被引量：25: 2014年; 从吉林省某牛场发生的临床上以发热、咳嗽、呼吸困难、严重腹泻、高发病率和死亡率为特征的新发疫病病牛体内分离到大小为20～30nm和150～250nm的2株病毒。病毒生物学特性、理化学特性和分子生物学特性显示，20～30nm的病毒粒子为牛肠道病毒。该病毒命名为HYi2毒株。病毒5’端非编码区的核苷酸序列分析结果表明，HY12毒株与国外分离株SL305的同源性最高，为90％；而与国内分离毒株的同源性只有75％。系统进化树分析发现，HY12毒株属于肠道病毒属的E种肠道病毒。本研究首次在国内从临床表现为呼吸道和消化道症状的病牛体内分离出E种肠道病毒，该结果将为牛肠道病毒感染的诊断及防治提供依据。; 邢泽黎朱利塞王新平李苏靖郭昌明杨丽

鉴别经典PRRS和HPRRS的胶体金快速诊断试纸条: 本发明涉及一种鉴别经典PRRS和HPRRS的胶体金快速诊断试纸条，其特征在于：试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫依次粘附在不吸水的支撑薄片上；其中结合垫上包被有胶体金标记的经典PRRSV特有抗原；硝酸纤维素膜上...; 丁壮刘慧母连志韩明明姜翠翠李想朱利塞黄志强

检测E种肠道病毒抗体的诊断抗原VP1及试剂盒: 本发明公开了一种E种肠道病毒基因<i>VP1</i>，它的碱基序列如序列表SEQ？ID？NO.1所示，表达的氨基酸序列如序列表SEQ？ID？NO.2所示的蛋白VP1作为包被抗原制备的一种用于检测动...; 王新平盖小春邢泽黎朱利塞鲁海冰王明月郭昌明刘亚静张群袁悦; 文献传递

双抗体夹心ELISA检测牛肠道病毒抗原方法的建立及流行病学调查被引量：24: 2016年; 应用大肠杆菌表达纯化的E种肠道病毒HY12 VP1和VP2重组蛋白制备的抗体,建立了检测牛肠道病毒病原的双抗体夹心ELISA方法,并对吉林省不同地区的牛群感染BEV进行了病原流行病学调查。结果,应用方阵法确定的抗VP1鼠源Ig G作为捕获抗体的最佳包被量为0.75 g/100 L,酶标抗体的最佳稀释度为1∶3 600。对大量阴性粪便样品进行了检测及其统计学处理,确定了双抗体夹心ELISA检测BEV的判定标准,样品D_（490）值≥0.143判定为阳性。特异性、敏感性等试验结果表明,所建立的检测BEV抗原方法具有特异、敏感和快速等特点。与RT-PCR方法相比,该方法操作简单快速,易在基层推广应用。对吉林省不同地区牛群粪便样品进行了检测,发现不同地区牛群的BEV感染率为8.16%~58.7%。本研究首次建立了检测BEV的双抗体夹心ELISA方法,为BEV感染的诊断、流行病学调查及本病防治提供了方法和理论依据。; 邢泽黎王新平朱利塞鲁海冰郭昌明盖小春王明月; 关键词：VP1 VP2 双抗体夹心ELISA 流行病学调查

同时检测AIV-HPAIV-NDV的一步法荧光RT-PCR试剂盒: 本发明提供了一种同时检测AI-HPAI-ND病毒的一步法荧光RT-PCR试剂盒，其特征在于：该试剂盒由反转录引物、反转录体系、PCR体系、阳性对照、阴性对照组成，其中反转录引物为通用的随机引物；反转录体系包括反转录酶、R...; 丁壮姜翠翠丛彦龙张晓东李鑫朱利塞李想韩明明刘慧母连志; 文献传递