曹菁
- 作品数:4 被引量:21H指数:3
- 供职机构:郑州大学第五附属医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 膨体聚四氟乙烯与人脂肪干细胞的体外生物相容性被引量:7
- 2014年
- 背景:膨体聚四氟乙烯多孔高分子聚合材料是临床常用的植入假体,具有良好的生物相容性,不易变形、变质,不产生炎症吸收反应,可允许细胞游走和组织向内生长。目的:观察人脂肪干细胞与膨体聚四氟乙烯材料的生物相容性。方法:将第4代人脂肪干细胞与膨体聚四氟乙烯体外复合培养,采用倒置相差显微镜观察细胞在支架上黏附、生长及增殖情况,计算细胞黏附率,MTT比色法检测细胞增殖率。结果与结论:刚接种的细胞呈圆形透亮,在支架材料表面分布均匀,细胞活性佳,3 h后大量细胞贴壁,24 h后可见少量呈短梭形的脂肪干细胞贴壁,3 d首次换液,细胞清晰可见,低密度生长时呈短梭形或多角形,分布均匀,种植7 d后细胞数量明显增加,极少细胞从支架上掉落,细胞黏附率平均达95.7%,并且细胞仍保持正常的分裂增殖速度。说明膨体聚四氟乙烯材料具有良好的细胞相容性。
- 杨柳姜南徐扬阳朱梦琳曹菁
- 关键词:生物材料聚四氟乙烯人脂肪干细胞生物相容性
- 重组人碱性成纤维细胞生长因子对人脂肪干细胞分化为脂肪细胞的影响被引量:7
- 2013年
- 目的探讨不同浓度重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rh-bFGF)对体外培养的人脂肪来源干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)诱导分化为脂肪细胞的影响,通过实验寻找促进hASCs向脂肪细胞转化的最佳浓度。方法取健康脂肪抽吸者脂肪混悬液进行分离提取hASCs,进行hASCs的培养、鉴定和成脂诱导分化,并在成脂诱导的细胞中分别加入0ng/ml rh-bFGF作为对照组,加入10、20、40ng/ml外源性rh—bFGF作为实验组。MTT比色法检测成脂细胞的增殖速率,油红O染色定性分析新形成脂肪细胞的时间,利用Western印迹法检测成熟脂滴表面标记蛋白CIDEC的表达。结果添加40ng/ml rh-bFGF的脂滴形成平均时间为(11.5±1.9)h,检测细胞增殖的吸光度值平均为0.52±0.10,10、20、40ng/ml rh-bFGF对细胞的增殖均有促进作用,尤以40ng/ml浓度最为明显,40ng/ml rh-bFGF成熟脂滴表面蛋白CIDEC的表达量高于其他组。结论在hASCs成脂诱导剂中添加rh-bFGF能有效促进成脂细胞的增殖速率,加速hASCs向脂肪细胞的分化,其中以40ng/ml rh-bFGF为最佳浓度。
- 徐扬阳姜南杨柳赵勇谷玮炜曹菁朱梦琳
- 关键词:重组人碱性成纤维细胞生长因子脂肪细胞
- 碱性成纤维细胞生长因子影响脂肪干细胞的血管内皮迁移被引量:3
- 2014年
- 背景:良好血运机制的建立是工程化组织成功植入的关键。目的:观察外源性碱性成纤维细胞生长因子对植入小鼠皮下的人脂肪来源干细胞-透明质酸钠复合物中人脂肪来源干细胞向血管内皮迁移情况的影响。方法:由吸脂术所得的脂肪组织中分离提取人脂肪来源干细胞进行培养传代,取第3代人脂肪来源干细胞进行cm-dil荧光标记后制成5×109 L-1的细胞悬液,碱性成纤维细胞生长因子配成2 mg/L的工作液。将由0.25 mL透明质酸钠凝胶、0.2 mL细胞悬液和0.05 mL工作液/DMEM混合制成的碱性成纤维细胞生长因子组/对照组移植物分别植入小鼠背部左右两侧皮下作自身对照,6周后取材,行苏木精-伊红染色和免疫荧光标记血管内皮细胞进行观察分析。结果与结论:植入处未出现结节、坏死及液化,取材时无凝胶残留。苏木精-伊红染色见标本性质多为脂肪组织及疏松结缔组织。荧光显微镜下仍可见标记人脂肪来源干细胞的cm-dil荧光,其与标记小鼠血管内皮的FITC荧光重合数碱性成纤维细胞生长因子组多于对照组(P<0.05)。提示碱性成纤维细胞生长因子促进透明质酸钠支架中的人脂肪来源干细胞向血管内皮迁移、分化。
- 朱梦琳姜南徐扬阳曹菁杨柳
- 关键词:干细胞脂肪干细胞碱性成纤维细胞生长因子透明质酸钠血管生成
- 人脂肪干细胞促进小鼠随意型皮瓣血管的新生被引量:5
- 2014年
- 背景:脂肪干细胞是从脂肪组织中分离提取的一种具有多向分化潜能的干细胞,对缺血性疾病的治疗有积极作用。目的:观察局部移植人来源脂肪干细胞对小鼠随意型皮瓣成活能力及血管新生效应的影响。方法:体外经分离、培养及传代健康成人脂肪干细胞。于SPF小鼠背部设计蒂在头侧的随意型皮瓣设为实验组,随后于皮瓣蒂部、中部、远端分3次注射脂肪干细胞悬液、并设置以同法注射等量PBS的小鼠作对照组。移植后7 d,计算各组皮瓣成活率。移植后14 d,取皮瓣组织,随机作冰冻切片CD31免疫荧光染色,荧光显微镜下观察皮瓣组织微血管分布情况,并对CM-Dil标记的脂肪干细胞示踪;ELISA法检测皮瓣组织中血管内皮生长因子水平;Western blot法检测皮瓣组织中基质细胞衍生因子1蛋白的表达。结果与结论:与对照组相比,实验组小鼠背部随意皮瓣成活率明显提高,皮瓣组织中微血管数目明显增多,血管内皮生长因子分泌水平明显升高,基质细胞衍生因子1蛋白表达明显增多(P<0.05)。结果证实,人脂肪干细胞局部移植到随意型皮瓣后,可上调血管内皮生长因子和基质细胞衍生因子1的表达,促进皮瓣的血管新生。
- 曹菁姜南徐扬阳朱梦琳杨柳
- 关键词:干细胞脂肪干细胞外科皮瓣细胞移植血管新生