时成波
- 作品数：17 被引量：46H指数：3
- 供职机构：中国科学院沈阳应用生态研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆
- 随着抗肿瘤药物研究的进展,肠毒素逐渐成为人们注意的焦点.利用PCR方法从金葡菌基因组DNA中扩增出约720bp的DNA片段,将之克隆到pGEM-7Zf载体上并转化E.coli DH5α菌株.重组质粒的洌序结果表明,我们克...
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国
- 关键词：大肠杆菌金黄色葡萄球菌基因克隆抗肿瘤药物核苷酸序列
- 文献传递
- 新型多功能大肠杆菌非融合蛋白表达载体及其用途
- 本发明是根据表达载体结构原理，利用DNA重组技术构建的一种新型原核生物非融合蛋白表达载体。主要特点是以pGEM系列克隆载体为出发质粒，在其多克隆位点的两端加上T7噬菌体基因10的SD序列和T7终止子序列，从而具备表达载体...
- 吕安国时成波吴文芳杨立泉
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227Ala基因的克隆及表达被引量：4
- 2003年
- 目的 :金黄色葡萄球菌肠毒素AAsp2 2 7ala基因的克隆及表达。方法 :利用错配PCR方法 ,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A(StaphylococcalenterotoxinA ,SEA)基因的质粒中扩增出约 72 0bp的DNA片段 ,将其克隆到表达载体 7ZTS中 ,并转化于JM10 9(DE3)。结果 :重组质粒的测序结果表明 ,它含有 70 2bp(不包括N端 72bp的信号肽编码区 ) ,其核苷酸序列与文献报道完全一致 ,推导的氨基酸序列显示 2 2 7位的天冬氨酸已突变为丙氨酸。结论 :该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白 ,表达量占总蛋白 5 1.5 %。表达的蛋白与天然肠毒素A产生的抗体能发生凝集作用 ,具有与天然SEA类同的抗原活性。
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国冯家勋柏学亮
- 关键词：金黄色葡萄球菌克隆
- SEA的基因克隆
- 利用PCR方法从金葡菌基因组DNA中扩增出约800bp的DNA片段,将之克隆到pUC19-T载体上并转化E.coli DH5α菌株.重组质粒的测序结果表明,克隆到了sea基因,其核苷酸序列与文献完全一致。
- 时成波吕安国杨立泉吴文芳
- 关键词：金葡菌基因组DNA基因克隆SEA基因PCR方法
- 文献传递
- SEA突变基因及其与ScFv基因的融合蛋白的应用
- 2005年
- 该发明专利涉及SEA突变基因及其与ScFv基因融合蛋白的应用，属于制药技术领域。
- 吴文芳孙静时成波吕安国
- 关键词：SEA突变基因融合蛋白制药技术
- IL-2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :IL - 2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达。方法 :分别在金黄色葡萄球菌肠毒素A2 2 7Ala、B基因的两端克隆上两个酶切位点HindⅢ ,KpnⅠ。将IL - 2基因突变 ,设计一段linker使之分别与SEA2 2 7Ala和SEB相连并克隆到PET表达载体中 ,在大肠杆菌DH5α(DE3) -Pass中表达。结果 :表达的蛋白占总蛋白 15 %。结论 :IL -
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国冯家勋柏学亮
- 关键词：融合蛋白IL-2
- 多功能大肠杆菌非融合蛋白表达载体
- 本发明是根据表达载体结构原理，利用DNA重组技术构建的一种新型原核生物非融合蛋白表达载体。主要特点是以pGEM系列克隆载体为出发质粒，在其多克隆位点的两端加上T7噬菌体基因10的SD序列和T7终止子序列，从而具备表达载体...
- 吕安国时成波吴文芳杨立泉
- 文献传递
- 金葡菌肠毒素B及抗肿瘤效果研究进展
- 自1954年发现肠毒素B以来,人们对它的研究就一直没有停止.随着对治疗恶性肿瘤药物研究的进展,肠毒素B逐渐成为人们注意的焦点.肠毒素B作为超级抗原,激活T淋巴细胞,致使其释放细胞活素,从而达到杀伤肿瘤细胞的目的.不同细胞...
- 杨立泉时成波吴文芳
- 关键词：肠毒素B肿瘤治疗T淋巴细胞黑色素瘤
- 文献传递
- SEA的基因克隆及高效表达工程菌的构建
- Staphylococcal enterotoxin A(SEA)是由金黄色葡萄球菌分泌至胞外的一种单亚基蛋白质.它能与抗原递呈细胞上的MHCⅡ受体结合,激发大量T细胞活化,释放多种细胞因子.正是由于SEA是一种强的T细...
- 时成波
- 关键词：SEA克隆重叠PCR均匀设计
- 文献传递
- 一种新型原核生物表达载体的构建
- 以pGEM7Zf(+))为出发质粒,在其多克隆位点两端加入T7 phage gene 10的SD序列和T7 terminator 序列,构建成一个新的表达载体,它具有如下特点:1.SD 保守序列AGGAG 至ATG 之间...
- 时成波吕安国杨立泉吴文芳
- 关键词：原核表达载体SD序列
- 文献传递
