方泽强
- 作品数：11 被引量：61H指数：5
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 切断面神经干后大鼠面神经元bcl-2、bax基因表达变化及意义被引量：2
- 2000年
- 目的 观察面神经干切断后面神经元bcl 2、bax基因表达与面神经元凋亡的关系。方法 采用大鼠面神经干切断模型 ,应用免疫组织化学方法观察面神经干切断后面神经元内bcl 2、bax基因表达变化和对面神经元凋亡的影响。结果 面神经干切断后可以导致bcl 2、bax基因表达的明显变化及面神经元的凋亡。结论 bcl 2。
- 杨军方泽强李慧增张从纪
- 关键词：BCL-2BAX
- 星形胶质细胞在大鼠面神经断裂后的变化和面神经元凋亡的实验研究被引量：1
- 2002年
- 目的 :研究大鼠面神经断裂后面神经元凋亡和星形胶质细胞的变化。方法 :采用大鼠面神经离断的动物模型 ,运用免疫组织化学的方法 ,对面神经元的凋亡和面神经核星形胶质细胞的变化进行了研究。结果 :面神经元在面神经断裂后 15天达到凋亡高峰 ,与正常对照组相差显著 (P <0 .0 1) ;GFAP阳性细胞 (星形胶质细胞 )达最多 ,细胞着色最明显 ,与正常对照组相差显著 (P <0 .0 1)。结论
- 方泽强扬军李慧增孙远
- 关键词：星形胶质细胞面神经元细胞凋亡
- 骨髓间质干细胞复合生物陶瓷构建组织工程化人工软骨被引量：19
- 2003年
- 目的 探索以多孔β-磷酸三钙 (β- TCP)生物陶瓷材料为支架 ,经体外诱导的骨髓间质干细胞 (MSCs)为种子细胞 ,构建组织工程化软骨修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 将 2 8只中国美利奴绵羊分为三组。实验组 (n=12 ) :分离培养羊自体第 7代 MSCs,经转化生长因子 - β诱导后接种到预制的 β- TCP多孔生物陶瓷材料上 ,细胞 -材料复合体经体外孵育后 ,无菌条件下植入预制的羊单侧肱骨近端关节面缺损处 ;单纯材料组 (n=12 ) :采用单纯β- TCP材料修复羊关节软骨缺损 ;空白对照组 (n=4 ) :制备的羊关节软骨缺损区未做任何修复。术后 12周和 2 4周分别取材 ,进行组织学、组织化学和免疫组织化学分析。结果 实验组术后 12周羊关节软骨缺损处肉眼可见透明软骨样组织形成 ,组织学检查发现 ,材料降解明显 ,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生软骨组织 ,软骨细胞外基质丰富 , 型胶原染色阳性 ;术后 2 4周 ,支架材料几乎完全降解 ,缺损区被新生软骨组织所取代。单纯材料组术后 12周 ,缺损区边缘有新生软骨组织向支架材料内长入 ,支架材料吸收明显 ;术后 2 4周 ,见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生软骨组织逐渐增多 ,但材料的中心部位未发现新生软骨形成。空白对照组至术后 2 4周 。
- 郭希民王常勇薄斌方泽强段翠密赵强王永红张旭辉范明卢建熙
- 关键词：骨髓间质干细胞人工软骨生物陶瓷材料Β-磷酸三钙
- bcl-2、Bax基因在面神经损伤后面神经元的表达及对神经元凋亡的调节被引量：5
- 2001年
- 目的 :探讨切断面神经干后面神经元bcl_2、Bax基因表达变化与面神经元细胞凋亡的关系。方法 :将 6 0只成年Wistar大白鼠左侧面神经干切断作为实验组 ,右侧面神经干未切断作为对照组。应用ABC免疫组化染色方法和原位末端标记法 (TUNEL)观察术后 3、7、15、2 1、30、6 0d实验组与对照组面神经元内bcl_2、Bax基因的表达及面神经元凋亡的情况。结果 :切断面神经干后 3d ,bcl_2、Bax基因表达开始增多 ,2 1d达高峰 (P <0 0 1) ,bcl_2 /Bax比值达最低 (P <0 0 1) ;切断面神经干后 3d ,实验组面神经元凋亡较对照组增多 ,2 1d达凋亡高峰 (P <0 0 1)。结论 :bcl_2。
- 杨军方泽强李慧增张从纪
- 关键词：BCL-2BAX面神经元基因调控面神经损伤
- 永生化软骨细胞为基础的工程化软骨修复软骨缺损的实验研究被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨用永生化软骨细胞作为种子细胞修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 把人端粒酶催化亚基(hTERT)转染羊关节软骨细胞,筛选阳性克隆并通过旋转生物反应器-微载体技术进行大量扩增;将扩增的永生化软骨细胞与β-磷酸三钙复合并在体外培育后,植入羊前肢肱骨头关节面软骨缺损处;3和6个月取材,进行形态学和免疫组织化学评价。结果 实验组,术后6个月,缺损区被新生的软骨组织所充填,Ⅱ型胶原染色呈强阳性,与对照组差别有显著性差异(P<0.01)。在材料组,缺损区边缘可见部分新生软骨组织;空白对照组,缺损区新生软骨组织形成。结论 永生化软骨细胞在软骨组织工程中具有潜在的应用前景。
- 方泽强李慧增王常勇孙远
- 关键词：永生化软骨
- 面神经断裂后大鼠面神经核区神经元凋亡和星形胶质细胞变化的实验研究被引量：5
- 2002年
- 目的 研究面神经断裂后面神经核区神经元凋亡基因bcl 2 ,bax和星形胶质细胞变化及其意义。方法 大鼠面神经离断后 ,采用免疫组化的方法 ,通过图像分析对面神经核区神经元bcl 2 ,bax的表达和星形胶质细胞变化进行定量分析。结果 面神经断裂后 15d面神经核区神经元出现凋亡高峰 ,bcl 2 bax在面神经断裂后 15d达最低 ,与正常对照组相差显著 (P <0 .0 1) ;GFAP阳性细胞达最多 ,细胞着色最明显 ,与正常对照组相差显著 (P <0 .0 1)。结论 bcl 2和bax可能在面神经元凋亡过程中发挥重要作用 ;星形胶质细胞反应与面神经元的损伤和修复关系密切。
- 方泽强杨军李慧增孙远
- 关键词：凋亡BAX星形胶质细胞
- 永生化软骨细胞体外快速扩增的实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨获取大量软骨组织工程种子细胞的方法和技术。方法 通过真核表达载体 ,把人端粒酶逆转录酶基因 (hTERT)转入兔髁状突软骨细胞 ,筛选、挑选阳性克隆在微载体 RCCS内快速扩增永生化软骨细胞。观测RCCS中微载体培养永生化软骨细胞的生长情况和检测细胞代谢率 ,进行Ⅱ型胶原免疫组化染色 ,并与常规培养方法进行比较。结果 永生化软骨细胞在微载体 RCCS中生长迅速、细胞代谢率高、倍增时间缩短 (P <0 0 1)。在培养第 8天 ,细胞数量可达最初接种的 95倍 (P <0 0 1)。结论 联合应用微载体和RCCS培养技术 ,能够在体外快速。
- 方泽强王常勇李慧增孙远杨军
- 关键词：永生化软骨组织工程旋转生物反应器微载体
- 永生化软骨细胞体内软骨形成的实验研究被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨以永生化软骨细胞作为种子细胞构建和形成软骨的可能性。方法 把人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)导入兔髁状突软骨细胞 ,G418筛选 ,挑选阳性克隆扩增培养 ;实验组将扩增培养的转染细胞与细胞支架材料 β 磷酸三钙 ( β TCP)复合 ,对照组将正常软骨细胞与 β TCP复合或单纯 β TCP在体外培育后种植于裸鼠皮下 ,3和 6个月取材进行组织学和免疫化学检测 ,并与对照 1组和对照 2组进行比较。结果 实验组和对照 1组可见复合体包裹软骨样组织 ,对照 2组有少量纤维样组织形成。免疫组化染色显示 ,实验组番红“O”、甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原染色呈强阳性 ,有明显软骨组织形成 ,与对照组有显著性差异 (P <0 0 1) ,对照 1组染色呈弱阳性 ,对照 2组则为阴性。结论 永生化软骨细胞可以作为软骨组织工程的种子细胞 。
- 方泽强李慧增王常勇郭希民
- 关键词：永生化软骨细胞
- 基于永生化软骨细胞和骨髓基质干细胞的工程化软骨形成的实验研究被引量：9
- 2003年
- 目的 :探讨hTERT转染的永生化软骨细胞和骨髓基质干细胞 (MSCs)裸鼠体内形成软骨的能力。方法 :通过真核表达载体 ,把人端粒酶逆转录酶基因转入兔髁状突软骨细胞 ,筛选并挑选阳性克隆进行扩增培养 ;取兔骨髓 ,密度梯度离心和培养 ,经诱导、扩增后与支架材料 β 磷酸三钙 (β TCP)复合 ,构建细胞 β TCP复合体 ,体外培育 1～ 2d后 ,植入裸鼠体内。通过粘多糖 (GAG)含量和Ⅱ型胶原的表达来检测 3和 6个月复合体软骨形成情况。结果 :两种细胞和 β TCP复合体在裸鼠体内均能形成软骨样组织 ;6个月 ,工程化软骨GAG含量和Ⅱ型胶原的表达均低于正常软骨组织 ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :hTERT转染的永生化软骨细胞和骨髓基质干细胞均具有良好的软骨形成能力 ,在软骨组织工程修复软骨缺损方面具有重要的应用前景。
- 方泽强王常勇李慧增杨军
- 关键词：软骨细胞软骨形成骨髓基质干细胞永生化
- 应用组织工程化人工软骨修复羊关节软骨缺损的实验研究被引量：11
- 2002年
- 目的 :探索以多孔磷酸三钙生物陶瓷材料为支架构建组织工程化软骨修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 :实验分 3组。实验组 (n =12 ) :分离培养羊自体关节软骨细胞 ,采用微载体技术在旋转生物反应器内进行扩增 ,扩增后的软骨细胞接种到预制的 β_磷酸三钙 (β_TCP)多孔生物陶瓷材料上 ,细胞_材料复合体经体外孵育后 ,无菌条件下植入预制的羊前肢肱骨头关节面缺损处 ;单纯材料组 (n =12 ) :采用单纯 β_TCP材料修复羊关节软骨缺损 ;空白对照组 (n =4 ) :制备的羊关节软骨缺损区未做任何修复。术后 3和 6个月分别取材 ,进行缺损区组织学、组织化学和免疫组织化学分析。结果 :在实验组羊关节软骨缺损处表面肉眼可见透明软骨样组织形成。组织学检查发现 ,术后 3个月时材料降解明显 ,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生软骨组织 ,软骨细胞外基质丰富 ,Ⅱ型胶原染色阳性。至术后 6个月 ,支架材料几乎完全降解 ,缺损区被新生软骨组织所取代。在单纯材料组羊关节软骨缺损处术后 3个月时 ,可见从缺损区边缘有新生软骨组织向支架材料内长入 ,支架材料吸收明显。至术后 6个月 ,可见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生软骨组织逐渐增多 ,但材料的中心部位未发现新生软骨形成。空白对照组羊关节软骨缺损区至术后
- 王常勇郭希民方泽强段翠密赵强王永红陈惠华薄斌范明卢建熙
- 关键词：生物陶瓷生物相容性材料
