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PINCH-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定被引量：1: 2011年; 目的构建人PINCH-1基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,并转染人骨髓基质细胞初鉴定转染效果。方法利用RNAi设计软件,设计合成针对人PINCH-1基因的特异性siRNA序列,利用酶切反应合成包含特异性shRNA序列的pGC-SIL-GFP慢病毒载体GC-shBC047440,通过GC-shBC047440与pHelper 1.0载体和pHelper 2.0载体共转染包装293FT细胞产毒,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定。获取的病毒上清筛选最适感染复数(MOI值),并感染骨髓基质细胞,RT-PCR和Western blot检测重组慢病毒对骨髓基质细胞PINCH-1蛋白和RNA表达的影响。结果酶切鉴定证实成功构建针对人PINCH-1基因的RNAi慢病毒干扰载体GC-shBC047440,载体感染人骨髓基质细胞后PINCH-1RNA表达较未感染组和空载体对照组显著下降。结论成功构建针对人PINCH-1基因的RNAi慢病毒载体,该载体能有效沉默PINCH-1基因的表达。; 曾东风陈幸华孔佩艳徐葳张曦; 关键词：RNA干扰慢病毒属绿色荧光蛋白质类

PINCH-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定: 目的:构建人PINCH-1基因的RNAi慢病毒载体。并转染人骨髓基质细胞初鉴定转染效果。方法:利用RNA干扰设计软件,设计合成针对人PINCH-1基因的特异性siRNA序列,利用酶切反应合成包含特异性shRNA序列的pG...; 曾东风陈幸华孔佩艳徐葳张曦; 文献传递

PINCH-1因子在白血病骨髓基质细胞中的表达及意义被引量：1: 2009年; 目的研究PINCH-1因子在急性白血病骨髓基质细胞中的表达及意义。方法培养骨髓基质细胞,用West-ern-blotting和RT-PCR观察PINCH-1 mRNA和蛋白的表达情况;进行免疫细胞化学和免疫荧光染色,观察PINCH-1蛋白的表达及其在细胞内的分布情况。结果在急性淋巴细胞白血病和急性髓系白血病患者骨髓基质细胞中,PINCH-1在mRNA水平和蛋白水平均比正常骨髓基质细胞增高(P<0.01);急性淋巴白血病与急性髓系白血病之间PINCH-1蛋白的表达有显著差异(P<0.01),但mRNA表达无明显差别。结论PINCH-1在急性白血病骨髓基质细胞表达明显高于正常骨髓基质细胞,可能与急性白血病发生发展相关。; 徐葳曾东风孔佩艳梁雪王金良张江彭贤贵; 关键词：骨髓基质细胞白血病

应用蛋白质芯片检测白血病细胞株耐药相关蛋白的表达被引量：3: 2010年; 目的利用低密度蛋白质芯片检测白血病细胞株耐药相关蛋白的表达。方法选择与白血病耐药密切相关的11种蛋白为检测指标,制备低密度蛋白质芯片,对人白血病细胞株HL-60、K562、Jurkat及耐药细胞株HL-60/VCR、K562/ADM、人Burkitt淋巴瘤Raji细胞株细胞裂解物进行检测。结果髓系白血病耐药细胞株P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白/主要穹窿蛋白(LRP/MVP)、谷胱甘肽-硫-转移酶-π(GST-π)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、黏附分子淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)表达高于非耐药细胞株,而淋巴系白血病细胞株P-糖蛋白及趋化因子受体CXCR4均有高表达。结论检测白血病耐药相关蛋白的蛋白质芯片可发现不同的白血病细胞株的耐药相关蛋白表达的差异,联合检测多种耐药相关蛋白有助于更好的研究白血病的耐药机制。; 张江孔佩艳曾东风徐葳王金良陈幸华张曦彭贤贵王平刘思恒曹正怀; 关键词：蛋白质芯片多药耐药白血病细胞株

人参皂苷Rg3抑制急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α及VEGF的表达及其机制探讨被引量：24: 2010年; 目的探讨人参皂苷Rg3对急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α及VEGF表达的作用及其可能的机制。方法培养正常人及急性白血病患者的骨髓基质细胞,MTT法检测人参皂苷Rg3对正常及急性白血病骨髓基质细胞增殖的抑制作用;RT-PCR检测人参皂苷Rg3处理前后急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α及VEGF mRNA表达的变化;Western blot、免疫荧光检测人参皂苷Rg3处理前后急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α、VEGF、p-Akt、p-ERK蛋白表达的变化。结果人参皂苷Rg3对骨髓基质细胞增殖抑制的最适作用时间为24h,最适作用浓度为40μg/ml;处理24h后,急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α、VEGF mRNA表达及蛋白表达均明显减少(P<0.05);p-Akt及p-ERK蛋白表达亦较处理前明显减少(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可明显抑制急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α、VEGF mRNA及蛋白水平的表达,同时可抑制与血管形成密切相关的MAPK、PI3K/Akt途径中Akt、ERK蛋白的磷酸化,提示人参皂苷Rg3可能通过阻断PI3K/Akt、MAPK信号途径抑制急性白血病骨髓的血管生成。; 王金良孔佩艳徐葳曾东风; 关键词：人参皂苷RG3 急性白血病骨髓基质细胞低氧诱导因子-1Α

PINCH-1蛋白研究进展及其与疾病的关系（英文）: ＜正＞PINCH（Particulary interesting new cysteine-histicline rich protein）,also called LIMS（LIM and senescent cell...; 徐葳孔佩艳; 文献传递

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徐葳