徐琦
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 现行麻疹病毒流行株在非洲绿猴肾细胞上连续传代后的性状研究被引量：6
- 2010年
- 目的研究现行麻疹病毒流行株连续传代后,对非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)感染能力的改变,并从基因层面分析引起麻疹病毒与细胞受体结合位点改变的可能原因。方法将现行麻疹病毒流行株Ningbo(宁波)05-2在Vero细胞上连续传代,观察并记录致细胞病变效应(Cytopathic Effect,CPE);采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)对原始株Ningbo05-2与第18代传代株Ningbo05-2/P18进行病毒鉴定后,通过血细胞凝集(Hemagglutination,HA)试验测定Ningbo05-2/P18的HA活性,并利用RT-PCR扩增其血凝素(Hemagglutinin,H)和核蛋白(Nucleoprotein,N)基因全序列。结果现行麻疹病毒流行株Ningbo05-2连续传代17次(P18),至第13代开始观察到在Vero细胞上融合样CPE;荧光定量RT-PCR鉴定传代株为麻疹病毒,但仍无对猴红细胞的凝集活性。与Ningbo05-2比较,传代株Ningbo05-2/P18在H蛋白上存在三个位点(312aa、314aa、546aa)的氨基酸突变,导致二级结构上311位的β折叠,以及312～316位的β转角转变为α螺旋。在H基因进化树上,传代株与原始株位于同一分支,仍属于H1b基因亚型。而在N蛋白核苷酸和氨基酸水平,传代株与原始株序列完全一致。结论现行麻疹病毒流行株在Vero细胞上连续传代后,H蛋白上个别氨基酸的突变可能导致与细胞结合位点的改变,从而影响病毒对细胞的感染能力。
- 傅燕冯燕董红军徐琦钟淑玲卢亦愚
- 关键词：麻疹病毒流行株基因突变
- 浙江省1999-2008年麻疹病毒流行株磷蛋白基因变异研究被引量：1
- 2010年
- 目的 了解浙江省麻疹病毒流行株磷蛋白（P）基因变异规律.方法 采用RT-PCR方法扩增1999-2008年浙江省麻疹病毒流行株P基因全序列,进行序列测定,并与疫苗株Shanghai191及其他麻疹流行株进行比较.结果 1999-2008年浙江省各流行株与疫苗株Shahghai191之间存在59～75个核苷酸的变异（变异率3.9%～4.9%）,导致36～42个氨基酸变异（变异率7.1%～8.3%）,它们在二级结构上也存在一定的差异.P基因系统进化树显示,其基因分型结果与WHO推荐的核蛋白（N）基因分型结果基本一致.P蛋白氨基酸的平均变异率要大于主要抗原基因N和H基因.结论 1999-2008年浙江省麻疹病毒流行株与疫苗株Shanghai191的P基因存在较大差异.
- 钟淑玲冯燕徐昌平徐琦卢亦愚
- 关键词：麻疹病毒磷蛋白核酸序列
