徐丽 作品数:63 被引量:402 H指数:13 供职机构: 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 World Health Organization 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
鉴别29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌聚合酶链反应方法的建立及应用 被引量:3 2009年 目的建立鉴别29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌的聚合酶链反应(PCR)方法。方法针对脑膜炎奈瑟菌ctrA基因变异区序列,设计合成PCR引物,分别用于扩增29E群、X群和Z群等3个血清群脑膜炎奈瑟菌。并将该方法应用于41份疑似脑膜炎奈瑟菌菌株标本的检测。结果3对引物分别能够特异性PCR扩增29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌菌株的ctrA基因,扩增片段大小分别为667 bp、525 bp和667 bp,3个血清群之间以及与其他血清群脑膜炎奈瑟菌之间未出现交叉PCR扩增。41份疑似脑膜炎奈瑟菌菌株标本中,29E群和X群PCR阳性的标本分别有7份和2份,未检测出Z群菌株。结论本研究建立的PCR方法能准确、特异地鉴定29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌菌株。 徐丽 朱兵清 高源 任红宇 邵祝军关键词:脑膜炎奈瑟菌 聚合酶链反应 B群脑膜炎球菌疫苗免疫原性评价技术研究进展 被引量:5 2022年 流行性脑脊髓膜炎(流脑)是一种病死率高且后遗症严重的急性呼吸道传染病,脑膜炎球菌疫苗是预防控制流脑的有效措施。目前,包括中国在内,B群流脑已成为全球主要流行的血清群。脑膜炎球菌ACYW等疫苗主要成分为荚膜多糖,而B群脑膜炎球菌疫苗主要成分为蛋白,有外膜囊泡(OMV)疫苗和重组蛋白疫苗两种。B群脑膜炎球菌疫苗免疫原性的评价方法包括人补体血清杀菌试验(hSBA)及脑膜炎球菌抗原分型系统(MATS)、脑膜炎球菌表面抗原表达试验(MEASURE)、脑膜炎球菌抗原分型系统(gMATS)和Bexsero疫苗抗原序列分型(BAST)等替代方法。疫苗免疫原性评价技术是疫苗研发和临床试验研究的基础,而我国目前尚无B群脑膜炎球菌疫苗。因此,本文就B群脑膜炎球菌疫苗免疫原性评价技术研究进展进行综述,以期为我国B群脑膜炎球菌疫苗研发和后期免疫原性评价及临床试验研究提供技术指导。 韩馥伊 徐娟 徐丽 邵祝军关键词:疫苗免疫原性 C群和不可分群脑膜炎奈瑟菌对人喉癌上皮细胞黏附能力的研究 2012年 目的建立和优化脑膜炎奈瑟菌(Neisseria Meningitidis,Nm)对人喉癌上皮细胞(Human Larynx Carcinoma Epithelial Cell,HEp-2)的黏附实验方法,检测C群序列型(SequenceType,ST)4821序列群和不可分群(Nongroupable,NG)Nm对HEp-2黏附能力的差异性。方法以C群Nm疫苗株C11作为靶菌,选用HEp-2,选择不同的黏附时间和不同的感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)确定Nm与HEp-2黏附作用的最适条件,对中国分离的26株C群ST-4821序列群和8株NG Nm菌株进行HEp-2黏附能力研究。结果 Nm与HEp-2黏附研究最适作用时间为4h,最适MOI为100~1000;各血清群参考菌株的黏附菌落数在1.46×105~1.63×106菌落形成单位/毫升(Colony Form ingUnit,CFU/ml);26株ST-4821序列群的C群Nm对HEp-2的黏附菌落数在1.33×105~9.53×106CFU/ml;8株NGNm的黏附菌落数在3.04×105~8.52×106CFU/ml。结论不同血清群Nm对HEp-2的黏附能力存在差异;同是ST-4821序列群的C群Nm对HEp-2的黏附能力存在差异;同是NG Nm对HEp-2的黏附能力存在差异。 杨郝亮 秦天 徐丽 任红宇 朱兵清 邵祝军关键词:脑膜炎奈瑟菌 2008-2009年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌对体外抗生素敏感性检测 被引量:9 2010年 目的了解2008-2009年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌(Nm)分离株的抗生素敏感性变化趋势。方法药敏纸片扩散(K-B)法和E-test试纸条检测方法对本研究室2008-2009年收集的68株分离自患者和健康带菌者菌株进行体外抗菌药物敏感性检测。结果所有菌株对3种治疗药物头孢噻肟、头孢曲松和氯霉素均敏感,1株C群患者菌株对美洛培南耐药,13株对青霉素不敏感菌株,6株对氨苄西林不敏感菌株。6种预防用药组中,除1株Y群带菌者菌株对利福平耐药外,其他菌株对阿奇霉素、米诺环素和利福平均敏感,70.59%菌株对萘啶酸,72.06%对环丙沙星,95.59%对复方新诺明耐药。W135群带菌者菌株对青霉素和氨苄西林敏感株比例较大,2株对磺胺类药物敏感。患者菌株和带菌者菌株药敏谱略有不同。结论磺胺类和喹诺酮类药物仍不被考虑作为流脑的预防性药物,加强对青霉素和氨苄西林治疗药物在各种血清群Nm的耐药性监测。长期对Nm药敏监测非常必要,对流行性脑脊髓膜炎预防和治疗药物的选择应因时因地而宜。 张麒 徐丽 邵祝军关键词:脑膜炎奈瑟菌 药敏 E-TEST 中国2005/2006年度流行性脑脊髓膜炎流行病学特征分析 被引量:29 2007年 目的分析全国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)流行性脑脊髓膜炎(流脑)流行病学特征,为控制流脑提供依据。方法运用描述流行病学方法分析2005/2006年度(2005年10月~2006年9月)全国网络直报流脑疫情。结果2005/2006年度全国流脑报告发病率为0.13/10万,与2004/2005年度相比,报告病例数减少29.0%,死亡病例数减少21.9%;病例相对集中于6个省,其发病数占全国病例总数的52%;0~19岁病例占病例总数的77.3%,但<10岁儿童发病率较高;学生、散居儿童、农民和民工分别占病例总数的42.7%、22.1%、16.1%。结论为控制流脑爆发或流行,将脑膜炎球菌多糖疫苗纳入全国免疫规划,具有重要意义。 李艺星 李军宏 尹遵栋 宁夏 邵祝军 徐丽 高源 李马超 梁晓峰关键词:流行性脑脊髓膜炎 流行病学特征 中国2004~2006年流行性脑脊髓膜炎病原学监测 被引量:40 2007年 目的对中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2004~2005年度(2004年10月~2005年9月)、2005~2006年度(2005年10月~2006年9月)流行性脑脊髓膜炎(流脑)病原学监测结果进行分析,了解脑膜炎奈瑟菌(Nm)菌株血清群分布及变迁趋势,C群Nm菌株的分布特征和Nm菌株的耐药性。方法2004~2005、2005~2006年度共收集送检菌株1 125株,均进行复核鉴定、血清分群和药物敏感性检测。结果1 125株送检菌株中,经鉴定Nm菌株为892株,菌株送检有效存活率为79.29%。2004~2005年度有效存活572株的血清群构成为:A群26.0%,B群28.6%,C群14.9%,其它血清群11.0%;2005~2006年度有效存活325株的血清群构成为:A群33.1%,B群14.3%,C群26.3%,其它群4.8%。已有20个省(自治区、直辖市,下同)分离到C群Nm菌株,其中15个省发现C群流脑病例。A群和C群Nm菌株表现出不同的抗生素敏感性。结论应加强流脑病原学监测工作,提高Nm监测中有效菌株的数量,密切关注C群流脑扩散趋势,及时监测Nm菌株的耐药性特征。 徐丽 邵祝军 高源 田国忠 李马超 李艺星 尹遵栋 李军宏关键词:流行性脑脊髓膜炎 病原学 血清群 一组用于脑膜炎败血伊丽莎白菌PCR检测的引物组合 本发明公开了一组引物序列组合以及将其用于PCR扩增的方法,所述方法以脑膜炎败血伊丽莎白菌基因组中的特异性片段EMA为扩增目标,所述方法显示了优异的特异性和敏感性,对在细菌鉴定中容易与脑膜炎败血伊丽莎白菌混淆的脑膜炎奈瑟菌... 高源 邵祝军 朱兵清 徐丽可变数目串联重复序列技术用于中国C群脑膜炎奈瑟菌基因分型的研究 被引量:2 2006年 目的利用脑膜炎奈瑟菌基因组中可变数目串联重复序列(VNTR)特征,对中国C群脑膜炎奈瑟菌菌株进行基因分型。方法中国C群脑膜炎奈瑟菌菌株109株,选择脑膜炎奈瑟菌DNA中4个VNTR位点,PCR扩增含有串联重复序列的DNA片段,选择每一个VNTR位点有差别的PCR产物进行测序,序列比对,测算串联重复序列的拷贝数。Bio-Rad Gel DocTM XR凝胶成像分析系统计算PCR产物DNA片段的碱基含量,换算成串联重复数;对109株菌株4个位点的串联重复序列拷贝数进行聚类分析,依据聚类分析结果进行基因分型,并将VNTR基因分型结果与脉冲场凝胶电泳基因分型(PFGE)结果进行比较。结果109株C群脑膜炎奈瑟菌菌株分为22个VNTR基因型,同一暴发来源的菌株具有相同VNTR特征;VNTR基因分型方法与PFGE基因分型具有相关关系。结论应用VNTR技术可以对中国C群脑膜炎奈瑟菌进行基因分型和分子流行病学方面的研究,VNTR基因分型可较好地应用于追溯流行性脑脊髓膜炎暴发传染源。 田国忠 邵祝军 李马超 高源 徐丽 崔志刚 任红宇 王艳华关键词:C群脑膜炎奈瑟菌 可变数目串联重复序列 基因分型 中国不可分群脑膜炎奈瑟菌的分子分型分析 被引量:9 2014年 目的了解我国血清不可分群(non-serogroupable,NG)脑膜炎奈瑟菌分子分型特征。方法选取我国2005-2011年分离的104株血清不可分群脑膜炎奈瑟菌作为研究对象,采用多位点序列分型(MLST)和聚合酶链反应(PCR)基因分群(A、B、C、W、E、X、Y、Z、H、I、L、K、cnl)方法,检测其ST序列群及基因群。结果 104株不可分群脑膜炎奈瑟菌中,基因群分布为荚膜基因缺失菌株(capsule null locus,cnl)(36株)、B群(20株)、C群(14株)、W群(9株)、E群(9株)、X群(3株)和Y群(3株),余下10株未鉴定出基因群;未发现其他基因群菌株。MLST分型将104株NG菌株分为45种ST型,其中14种为新的ST型;17种ST型可归为7个序列群(65株);cnl菌株全属于ST-198序列群,B群和C群菌株以ST-4821为优势序列群,W群以ST-11和ST-174序列群为主。结论我国NG脑膜炎奈瑟菌具有基因多态性,其中ST-198序列群全部为cnl菌株。 徐征 朱兵清 高源 徐丽 邵祝军关键词:脑膜炎奈瑟菌 多位点序列分型 脑膜炎奈瑟菌4种聚合酶链反应检测方法的评价 被引量:5 2015年 目的对脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)检测中常用的聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法进行适用性评价。方法选取130株不同血清群Nm及109株其他种属细菌,通过PCR检测荚膜转移基因A(Capsule Transport A,ctr A)、铜-锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn Superoxide Dismutase C,sod C)和lysR家族转录调节基因A(LysR-family Transcriptional Regulator A,crg A),其中,荧光实时(Real Time)-PCR(RT-PCR)检测ctr A基因(ctr A-RT)和sod C基因(sod C-RT),普通PCR检测crg A(crg A)和sod C(sod C);并采用281份脑脊液(Cerebrospinal Fluid,CSF)标本和162份健康人群咽拭子标本对两种RT-PCR检测方法进行了比较。结果在菌株检测中,ctr A-RT法能检测出所有可分群Nm菌株和大部分不可分群菌株,未检出其他菌株;sod C-RT、crg A和sod C法除检测出所有Nm菌株,还能检测出部分其他菌株。在CSF标本检测中,ctr A-RT和sod C-RT法结果完全一致。在咽拭子标本检测中,ctr A-RT和sod C-RT法符合率低。结论 4种PCR检测方法中,单独采用任何1种,均不能将Nm与其他细菌完全区分开。建议根据不同的标本选择适宜的检测方法。 徐丽 朱兵清 徐征 高源 邵祝军关键词:脑膜炎奈瑟菌 聚合酶链反应