张金强
- 作品数：13 被引量：45H指数：4
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- 猪繁殖与呼吸综合征病毒WF-1株的分离鉴定及NSP2和ORF5基因的变异分析被引量：2
- 2010年
- 从山东某大型猪场患"猪高热病"的病料中分离到1株病毒,该病毒可在Marc-145细胞上增殖,产生细胞病变。经RT-PCR鉴定证明,该病毒为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),将其命名为WF-1株。用RT-PCR法分别扩增该分离株的NSP2基因和ORF5基因,并进行核苷酸序列测定和分析。结果表明,PRRSV WF-1株的NSP2发生30个氨基酸的不连续缺失,缺失位置与PRRSV参考变异株JXA1相同;ORF5基因与JXA1、CH-1a、VR2332核苷酸同源性分别为98.0%、94.2%、86.4%,氨基酸同源性分别为97.5%、94.0%、87.5%。基因遗传进化树分析结果显示,WF-1株与2006～2008年期间分离的JXA1、SX-1等高致病性变异株的亲缘关系很近,与1996年分离的中等毒力毒株CH-1a亲缘关系较远,与VR2332、CC-1、MLV等弱毒株或疫苗株处于不同的分支。
- 李坤吴家强张金强李俊于江刘洋张玉玉刘少宁王兆周顺王金宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因ORF5基因
- 多重RT-PCR检测PRRSV和CSFV及PRRSV ORF5基因遗传变异分析被引量：4
- 2011年
- 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪瘟病毒（CSFV）的基因组序列设计了2对特异性引物,建立了同时检测PRRSV和CSFV的多重RT-PCR方法。2008年1月至2009年12月期间,采集山东各地71个不同规模猪场及农村散养户212份病料,采用建立的多重RT-PCR技术同时检测PRRSV和CSFV的感染状况。检测结果显示,病料中高致病性PRRSV占57.1%（121/212）,CSFV占29.2%（62/212）。应用RT-PCR方法扩增山东不同地区16株PRRSV的ORF5基因,并进行了序列分析。结果表明,16株PRRSV的ORF5基因核苷酸同源性为97.0%~100.0%;与参考变异毒株JXA1、传统毒株VR2332核苷酸同源性分别为98.0%~99.5%和86.4%~87.7%。推导的氨基酸序列分析表明,16株毒株GP5蛋白氨基酸不存在缺失,但存在位点突变。12株在非中和表位29位点与准种进化34位点发生了突变,分别由V→A和N→S;1株在非中和表位185位点发生突变,由A→V;这与2007年流行的PRRSV毒株JXA1、HUN等不同。
- 张金强吴家强孟斌郭文龙王希辉李坤于江刘少宁张玉玉王金宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因
- 斑点杂交法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 2009年
- 斑点杂交技术是一种快速、稳定、高通量的检测方法,在动物疫病的诊断和流行病学调查中发挥着重要作用。在本研究中,通过RT-PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD1株ORF7基因,并以其为模板,制备地高辛标记cDNA探针,并进行了特异性和敏感性检测。利用该探针对50份临床病料进行PRRSV检测,并与RT-PCR进行了比较,结果显示,斑点杂交结果与RT-PCR结果完全一致,探针敏感性和特异性亦较高,说明本研究建立的斑点杂交方法可用于PRRSV临床检测与免疫监测。
- 白华张金强于美芳刘玉庆吴家强
- 关键词：地高辛标记探针斑点杂交猪繁殖与呼吸综合征病毒
- PRRSV SX-1株的分离与NSP2和ORF5基因的克隆及变异分析被引量：5
- 2009年
- 从山东莘县恒顺猪场发病猪群中分离到PRRSV病毒(SX-1株)。用RT-PCR法对该分离株的NSP2和ORF5基因进行了扩增和克隆,并对其进行核苷酸序列测定和分析。结果表明,PRRSV SX-1株的NSP2发生30个氨基酸的不连续缺失,缺失位置与JXA1毒株相同;ORF5基因与JXA1、CH-1a、VR2332核苷酸同源性分别为98.8%、94.9%、88.9%,氨基酸同源性分别为99.0%、93%、87.5%。基因系统发育树分析结果显示,SX-1与JXA1、HUN株的亲缘关系很近,与CH-1a亲缘关系较近,与VR2332、CC-1、RespPRRS/ReproMLV等毒株处于不同分支。
- 张金强吴家强朱向福于美芳白华孟斌任素芳王文志王金宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因ORF5基因
- 山东省白羽肉鸡中MDV、REV、CAV和ARV感染状况的病原学调查被引量：7
- 2010年
- 为了解鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性贫血病毒(CAV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)和禽呼肠孤病毒(ARV)在山东省白羽肉用型鸡中的流行情况,试验采用地高辛标记的核酸探针-斑点杂交法对淘汰的商品肉鸡、病死商品肉鸡及淘汰肉种鸡进行了上述4种病毒病原的检测。结果表明:ARV主要以单一形式感染,在病死商品肉鸡中感染率最高(30.07%),在3种类型鸡中ARV感染率高于MDV,REV,CAV。MDV在淘汰肉种鸡中感染率(12.82%)高于其他2种鸡群,而REV,CAV,ARV感染率在病死商品肉鸡中最高。混合感染亦相当普遍,以淘汰肉种鸡最高(混合感染率达10.25%),高于任一病毒单独感染率,其次为病死商品肉鸡。
- 孟斌胡北侠许晓云路希山张金强李建亮张秀美崔言顺
- 关键词：白羽肉鸡鸡传染性贫血病毒禽网状内皮增生病病毒禽呼肠孤病毒
- 山东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒感染状况调查与遗传变异分析
- 近年来，山东地区许多中小规模猪场或散养猪场爆发主要由猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）引起的“猪高热病”。2008年以前猪群发病主要感染新生仔猪和保育猪，2008年至2010年期间发生的“猪高热病”对母猪和育成猪也有较高的发...
- 张金强
- 关键词：PRRSV多重RT-PCR
- PRRSV SX-1株的分离与NSP2基因和ORF5基因的克隆及变异分析
- ＜正＞1材料与方法1.1材料山东省某大型猪场的发病死亡猪病料;细胞、载体、菌种Marc-145细胞、受体菌E.coliDH5a。根据GeneBank中已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒JXA1毒株,设计合成目的基因引物。1....
- 张金强吴家强朱向福于美芳白华孟斌任素芳牛钟相
- 关键词：测序方法猪生殖与呼吸综合征病毒
- 文献传递
- PRRSV山东变异缺失株SX-1的全基因序列分子特征分析被引量：2
- 2011年
- 对从山东某发病猪场采集的猪繁殖与呼吸综合征疑似病料中分离到的PRRSV病毒(SX-1株),应用RTPCR方法分段扩增出PRRSV SX-1毒株的各基因片段,扩增后的产物分别克隆于pMD-18T载体鉴定后测序。序列号GQ875656。序列分析结果表明SX-1株基因组全长15 320nt(不包括poly尾),包含9个开放阅读框,5′UTR长189 nt,3′UTR长150 nt;SX-1株在分子遗传演化上属于PRRSV变异毒株,与参考毒株JXA1的核苷酸同源性为98.9%;与CH-1a和VR2332的同源性为94.8%和89.5%;而与LV的同源性仅为59.3%。基因系统发育树分析结果显示,SX-1与JXA1、GDBY1株的亲缘关系很近,与CH-1a亲缘关系较近,与VR2332、CC-1、RespPRRS/Repro MLV等毒株处于不同的分支。
- 张金强吴家强石峰孟斌刘少宁牛钟相
- 关键词：PRRSV全基因组
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒传统毒株与变异毒株的鉴别诊断被引量：1
- 2009年
- 从山东各地猪场采集了50份疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)感染的病料,采用RT-PCR技术扩增出PRRS病毒(PRRSV)的ORF7基因和Nsp2基因,并对Nsp2基因进行了序列同源性比较和遗传进化树分析,从RT-PCR阳性病料中进行病毒分离,然后应用Nsp2单克隆抗体对分离毒株进行鉴别诊断。结果表明,从8份病料中同时扩增出病毒的ORF7基因和Nsp2基因,序列分析显示其中6株病毒的Nsp2缺失30个氨基酸,与Nsp2单克隆抗体不发生反应,属于变异毒株;另外两株病毒的Nsp2未见氨基酸缺失,与Nsp2单克隆抗体发生特异性反应,属于传统毒株。序列同源性和系统进化分析表明,6株变异毒株与其他高致病性毒株亲缘关系很近,而与经典毒株的遗传距离较远。
- 于美芳吴家强张金强李俊张秀美景田军王雪红王金宝
- 关键词：繁殖与呼吸综合征病毒变异株
- 不同日龄肉鸡感染网状内皮增生症和传染性贫血动态分布及抗体产生规律
- 2010年
- 为了解禽网状内皮增生症(REV)和传染性贫血(CAV)在商品肉鸡中的感染情况,对某鸡场不同日龄商品肉鸡,通过斑点杂交和ELISA,对这两种免疫抑制病进行抗原和抗体检测。结果表明:137份病料中REV感染率为2.19%,高于CAV的感染率(1.46%),相对应的90份血清样品中REV抗体水平都低于相同日龄CAV抗体水平(42日龄除外),且都低于50%。这些检测结果为该商品肉鸡制定合理的免疫程序提供可靠生物学背景,具有重要的兽医临床指导意义。
- 孟斌胡北侠许传田张金强王希军任海松朱雯迎张秀美
- 关键词：传染性贫血兽医临床
