张舟
- 作品数:5 被引量:4H指数:2
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- 相关领域:生物学更多>>
- 一株明串珠菌突变菌株及其构建方法和应用方法
- 本发明一株明串珠菌突变菌株及其构建方法和应用方法,涉及细菌,是葡聚糖蔗糖酶基因敲除的明串珠菌突变菌株,为肠膜明串珠菌Δdtsl(即Leuconostoc?MesenteroidesΔdtsl)菌株,其在中国典型培养物保藏...
- 金红星成文玉张舟
- 文献传递
- 肠膜明串珠菌基因失活体系的建立
- 2014年
- 构建肠膜明串珠菌的基因失活体系。四环素抗性基因表达盒连接到pTA2 T载体上,在T载体的左右多克隆位点上分别定向插入ack(乙酸激酶)的上、下游同源臂,构建成自杀性同源重组载体,转化明串珠菌,使染色体的ack失活,得到突变型。检测突变型产乙酸的量并利用PCR验证ack失活。与原始菌株相比,突变型的乙酸产量减少49.1%;突变型的ack PCR扩增产物比原始菌株的大1200 bp左右。成功地使ack基因失活,说明肠膜明串珠菌基因失活体系的构建成功。
- 莒晓艳张舟成文玉金红星
- 关键词:明串珠菌基因失活同源重组
- 一株明串珠菌突变菌株及其构建方法和应用方法
- 本发明一株明串珠菌突变菌株及其构建方法和应用方法,涉及细菌,是葡聚糖蔗糖酶基因敲除的明串珠菌突变菌株,为肠膜明串珠菌Δdtsl(即Leuconostoc MesenteroidesΔdtsl)菌株,其在中国典型培养物保藏...
- 金红星成文玉张舟
- 文献传递
- 明串珠菌的稳定高效电转化被引量:2
- 2014年
- 明串珠菌电转化的再现性差、效率稍低,因此重新优化了电转化方法。以pCW4为载体,明串珠菌为受体菌,固定接菌量和氨苄浓度,优化了PBS溶液的pH值、LiAc-DTT孵育时间、溶菌酶的量和孵育液中蔗糖浓度。利用MRS(含质量浓度0.48 mg·L-1氨苄)培养明串珠菌(初始OD600为0.048),OD600为0.5左右时收集菌体,用LiAc-DTT溶液(含100 U·mL-1溶菌酶、浓度0.5 mol·L-1蔗糖)孵育20 min,再用pH值为6.9的PBS洗涤和电转化,得到较高的转化率,为2.47×105μg-1DNA。
- 张舟成文玉金红星
- 关键词:明串珠菌电转化稳定性
- 明串珠菌乙酸激酶和葡聚糖蔗糖酶基因失活的研究
- 明串珠菌(Leuconostoc)是腌菜、韩国泡菜和德国泡菜等发酵蔬菜中的优势菌株,也是美国FDA认可的GRAS菌,不生产内毒素,能分泌特异性胞外蛋白且没有降解蛋白活性,所以明串珠菌是表达外源蛋白的很好的候选菌,在食品工...
- 张舟
- 关键词:明串珠菌基因失活同源重组生理生化特性
- 文献传递