张旭霞
- 作品数：18 被引量：6H指数：1
- 供职机构：复旦大学上海医学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- α粒子照射诱发DNA双链断裂修复及其在染色质中的分布
- 2014年
- 目的 探索α粒子照射诱发人外周血淋巴细胞双链断裂（DSB）的修复特点及与染色质结构的关系,为其作为α核素内照射鉴定指标和生物剂量估算指标提供实验依据.方法 取4名健康成人外周血淋巴细胞,0.5 Gyα粒子和γ射线照射,采用免疫荧光技术检测照射后10 min～48 h DSB分子标志物γH2AX焦点、同源重组（HR）修复蛋白Rad51焦点的形成及其消除过程,以及它们在染色质中的分布.结果 与未照射时相比,人淋巴细胞经0.5 Gyα粒子照射后10 min ～2 h,可见明显的线性γH2AX焦点径迹形成（t=ll.12、14.40、16.56,P＜0.05）,至照后6h基本消失;而γH2AX焦点形成数在α粒子照射后30 min达到最大值（t=51.72,P＜0.05）,6h内快速下降（t=29.83,P＜0.05）,至照后24 ～ 48 h残留焦点数约为16％;照后10 min,约27％的γH2AX焦点位于DAPI亮染的异染色质区,可能降低了其修复效率.而0.5 Gyγ射线照射后10 min ～48 h,未见线性γH2AX焦点径迹形成,随机、散在分布的γH2AX焦点均位于DAPI淡染的常染色质区,焦点形成数与残留数均显著低于α粒子照射诱发的焦点数.修复蛋白Rad51焦点在α粒子和γ射线照射后30min ～2 h有升高趋势,但与本底值无明显差异,且与γH2AX焦点的共定位仅占3％ ～8％.结论 α粒子照射诱发入外周血淋巴细胞线性γH2AX焦点径迹形成可作为判断是否存在α粒子内照射的生物指标,其在照射后稳定存在一定时间的特性,为其作为生物剂量估算指标提供了可能.
- 张亚平张旭霞王晶暴一众李佳颖殷丽娜陈红红
- 关键词：Α粒子染色质人外周血淋巴细胞
- 一种用于铀U(VI)促排药物体外筛选的竞争酶联免疫吸附测定方法
- 本发明属于生化分析与药物筛选技术领域。涉及用于铀促排药物体外筛选的方法，尤其涉及一种基于竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)测定促排药物与金属硫蛋白(MT1/2)竞争结合U(VI)或Zn<Sup>2+</Sup>作用的方法...
- 陈红红暴一众张旭霞王梦梦
- 文献传递
- 溶酶体膜通透化在铀诱导肾近端小管上皮细胞死亡中的作用及机制
- 2022年
- 目的探究铀(Uranium,U)暴露诱导人肾近端小管上皮HK-2细胞溶酶体膜通透化(LMP)致细胞死亡的作用及机制。方法以100、300、600μmol/L铀染毒HK-2细胞24 h,分别采用DCFH-DA荧光探针法和MitoSOX荧光探针法检测不同浓度铀染毒的HK-2细胞内氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和线粒体超氧化物的生成。将HK-2细胞分为:空白对照组、单纯N-乙酰半胱氨酸(NAC)或CA-074 Me组、单纯铀染毒组和铀联合NAC或CA-074 Me组,采用双色免疫荧光法检测HK-2细胞内半乳凝素-1(Galectin-1)与溶酶体相关膜蛋白-1(LAMP-1)共定位情况以检测溶酶体膜通透化(lysosomal membrane permeability,LMP)程度,或检测Cathepsin B与LAMP-1非共定位情况以反映溶酶体内Cathepsin B的释放情况,钙黄绿素(Calcein-AM)-碘化丙啶(PI)双染色法检测HK-2细胞死亡情况,单色免疫荧光法检测HK-2细胞内Cleaved-caspase-3表达以检测细胞凋亡情况。结果100、300、600μmol/L铀染毒HK-2细胞24 h诱导细胞内ROS或线粒体超氧化物生成与0μmol/L铀对照组比较明显增加,分别为1.1~2.5倍或4.0~28倍(t_(ROS)=17.98、11.84、11.75,P<0.05;t线粒体超氧化物=6.14、16.02、13.06,P<0.05),且随铀浓度增加而显著增加(t_(ROS)=10.10、10.37、5.59,P<0.05;t线粒体超氧化物=21.50、15.16、5.93,P<0.05)。与空白对照组相比,600μmol/L铀染毒24 h使HK-2细胞中Galectin-1和LAMP-1共定位率及Cathepsin B和LAMP-1非共定位率显著增加,分别为5.4~6.7倍或1.5~2.1倍(t_(Galectin-1)=15.85、12.70,P<0.05;t_(Cathepsin) B=5.95、6.69,P<0.05),而给予NAC处理则能抑制其增加(t_(Galectin-1)=4.74,P<0.05;t_(Cathepsin) B=4.51,P<0.05);而且,600μmol/L铀染毒24 h使HK-2细胞死亡率及Cleaved-caspase-3表达水平较空白对照组显著增加,分别为28~47倍或2.4~6.0倍(tPI=30.40、10.34,P<0.05;t_(Cleaved-caspase-3)=18.49、9.52,P<0.05),而给予CA-074 Me处理则能显著降低铀暴露HK-2细胞的死亡率及Cleaved-caspase-3表达水平(tPI=6.76,P<0.05;t_(C
- 钟登琴李强张旭霞王梦梦王睿云陈红红
- 关键词：铀氧自由基HK-2细胞
- 注射用双酚二胺四乙酸钙钠盐及其制备方法
- 本发明属化学制药领域，涉及一种注射用双酚二胺四乙酸钙钠盐冻干粉针剂及其制备方法。本发明的注射用双酚二胺四乙酸钙钠盐主要由主药双酚二胺四乙酸钙钠盐和抗氧化剂焦亚硫酸钠组成，主药双酚二胺四乙酸钙钠盐由双酚二胺四乙酸、碳酸氢钠...
- 陈红红王全瑞沙先谊卢建忠张旭霞李强胡昱兴徐爱红邹美君
- 文献传递
- 基于竞争ELISA法的铀促排螯合剂体外筛选模型的建立
- 2020年
- 血液中的铀[U(Ⅵ)]与去铁转铁蛋白(apotransferrin,apo-Tf)形成稳定的络合物在U(Ⅵ)进入细胞致细胞毒性中发挥重要作用。本研究通过探讨螯合剂与apo-Tf竞争结合U(Ⅵ)的作用,建立了一种基于酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的U(Ⅵ)促排螯合剂体外筛选新模型,通过方法学研究确定了该检测方法的最佳包被抗原apo-Tf、Tf抗体、二抗稀释比例和U(Ⅵ)处理的浓度,验证了该方法的稳定性和重现性,并采用该模型考察了4种螯合剂邻苯二酚-3,6二甲撑亚氨基四乙酸(CBMIDA)、Tiron、DTPA-CaNa3、DTPA-ZnNa3与apo-Tf竞争结合U(Ⅵ)的能力,其强弱顺序为:CBMIDA≈Tiron>apo-Tf>DTPA-CaNa3≈DTPA-ZnNa3;采用动物实验观察以上螯合剂的排U(Ⅵ)效果发现,CBMIDA和Tiron立即给药能显著提高U(Ⅵ)内污染小鼠24 h尿U(Ⅵ)排出、明显降低肾脏和股骨U(Ⅵ)蓄积;而DTPA-CaNa3和DTPA-ZnNa3则无明显促排效果,与竞争ELISA法的检测结果相一致。动物实验符合复旦大学药学院动物伦理委员会规程。以上结果表明,该方法快速、简便、重现性好,能够用于U(Ⅵ)促排螯合剂的快速筛选。
- 王梦梦张旭霞尹俊任湘祎李欣悦陈红红
- 关键词：铀螯合剂
- TRPML1激动剂ML-SA5对铀暴露人肾近端小管上皮细胞的促排解毒作用及机制
- 2024年
- 目的探究溶酶体Ca^(2+)通道瞬时受体电位粘脂蛋白1(TRPML1)激动剂ML-SA5通过促进溶酶体胞吐促进醋酸铀酰暴露的人肾近端小管上皮HK-2细胞内铀的排出及减轻铀致细胞损伤的作用及机制。方法将HK-2细胞分为空白对照组(Ctrl组)、ML-SA5组(M组)、Vacuolin-1组(V组)、ML-SA5+Vacuolin-1组(M+V组)、单纯铀染毒组(U组)、铀染毒+ML-SA5组(U+M组)、铀染毒+Vacuolin-1组(U+V组)和铀染毒+ML-SA5+Vacuolin-1组(U+M+V组),分别给予0和300μmol/L醋酸铀酰暴露24 h后加入ML-SA5和/或溶酶体胞吐抑制剂Vacuolin-1作用0.5 h。采用免疫荧光法检测溶酶体相关膜蛋白-1(LAMP-1)在细胞质膜的定位情况,ICP-MS检测细胞内铀含量,免疫荧光法检测肾损伤分子1(KIM-1)蛋白表达,Calcein-AM/PI双染色法检测细胞死亡率,免疫荧光法检测转录因子EB(TFEB)的亚细胞定位、LAMP-1及TRPML1蛋白表达,采用溶酶体LysoTracker荧光探针检测溶酶体数量。结果与Ctrl组相比,U组细胞质膜定位的LAMP-1蛋白、细胞KIM-1蛋白表达、细胞死亡率明显增加(t=12.86、18.86、38.53,P<0.05),TFEB核转位、TFEB下游靶基因LAMP-1和TRPML1蛋白表达及LysoTracker探针标记的溶酶体数量明显增加(t=9.12、16.47、32.33、7.75,P<0.05);与U组相比,U+M组HK-2细胞质膜定位的LAMP-1明显增加(t=3.33,P<0.05),细胞内铀含量明显减少(t=5.01,P<0.05),细胞内KIM-1蛋白表达和细胞死亡率显著降低(t=3.81、3.24,P<0.05),这些作用均能被溶酶体胞吐抑制剂Vacuolin-1所抵消;ML-SA5还可明显提高负载铀HK-2细胞的TFEB核转位(t=9.20,P<0.05)、TFEB下游靶基因LAMP-1及TRPML1蛋白表达(t=3.05、3.17,P<0.05)以及LysoTracker标记的溶酶体数量(t=3.13,P<0.05)。结论TRPML1激动剂ML-SA5通过刺激溶酶体胞吐,促进负载铀的HK-2细胞内铀排出及降低铀致细胞损伤/死亡,与其激活TFEB上调溶酶体生物发生和TRPML1蛋白表达有关。
- 张洪静王睿云王毅斐张旭霞陈红红
- 关键词：铀HK-2细胞
- 注射用双酚二胺四乙酸钙钠盐及其制备方法
- 本发明属化学制药领域，涉及一种注射用双酚二胺四乙酸钙钠盐冻干粉针剂及其制备方法。本发明的注射用双酚二胺四乙酸钙钠盐主要由主药双酚二胺四乙酸钙钠盐和抗氧化剂焦亚硫酸钠组成，主药双酚二胺四乙酸钙钠盐由双酚二胺四乙酸、碳酸氢钠...
- 陈红红王全瑞沙先谊卢建忠张旭霞李强胡昱兴徐爱红邹美君
- 文献传递
- Wnt/β-catenin信号通路——乳腺癌的潜在治疗靶点
- 2014年
- 乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤之一,目前主要采取手术结合放化疗的综合治疗手段进行治疗,但是乳腺癌的异质性使得部分亚型尤其是三阴性乳腺癌的治疗疗效欠佳,预后也相对较差.目前研究表明Wnt/β-catenin信号通路异常表达在乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌中广泛存在,其与乳腺癌的发生、发展、侵袭、转移和预后不良密切相关;抑制Wnt/β-catenin信号通路能有效抑制乳腺癌细胞的生长和对化疗药物的多药耐药,而且Wnt/β-catenin信号通路与辐射抗性密切相关.随着对Wnt/β-catenin信号通路的深入了解,它将有希望成为乳腺癌特别是三阴性乳腺癌靶向治疗和放射增敏治疗的新靶点.
- 殷丽娜张旭霞张俊香陈红红
- 关键词：乳腺肿瘤放射疗法辐射耐受性
- 氯硝柳胺或其药学上可接受的盐在制药中的用途
- 本发明属于医药技术领域。涉及氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的新的医药用途，具体涉及氯硝柳胺或其药学上可接受的盐在制备恶性肿瘤放射增敏制剂中的用途。本发明经试验显示，氯硝柳胺在对三阴性乳腺癌细胞无细胞毒作用的<20%I...
- 陈红红殷丽娜张旭霞王晶暴一众高赟胡昱兴徐爱红
- 文献传递
- Ta_(4)C_(3)-PVP纳米片对4T1三阴性乳腺癌小鼠移植瘤的放射增敏作用
- 2021年
- 目的研究Ta_(4)C_(3)-PVP纳米片对三阴性乳腺癌4T1细胞小鼠移植瘤的放射增敏作用.方法于雌性BALB/c小鼠右侧腹皮下注射4T1细胞建立4T1荷瘤小鼠模型,按肿瘤体积大小均匀分为空白对照组、单纯Ta_(4)C_(3)-PVP组、单纯照射组、Ta_(4)C_(3)-PVP联合照射组.尾静脉注射20 mg/kg Ta_(4)C_(3)-PVP预处理24 h后给予8 Gy单次肿瘤局部X射线照射,测量移植瘤体积、瘤重,检测肿瘤细胞增殖标志物Ki-67蛋白表达、DNA双链断裂(DSBs)分子标志物γ-H2AX焦点形成,绘制肿瘤生长曲线并计算放射增敏系数(EF)及抑瘤率.结果与空白对照组相比,单纯照射组、Ta_(4)C_(3)-PVP联合照射组于照射后16d均能明显抑制肿瘤生长(t=5.41、9.59,P<0.05)、降低瘤重(t=2.67、4.40,P<0.05),其中Ta_(4)C_(3)-PVP联合照射组的EF达1.57,抑瘤率约为64%,明显优于单纯照射组(42%).免疫组织化学结果显示,与空白对照组相比,单纯照射组和Ta_(4)C_(3)-PVP联合照射组肿瘤细胞Ki-67蛋白表达受到明显抑制(t=5.73、8.02,P<0.05)、γ-H2AX焦点产额明显增加(t=2.97、9.86,P<0.05),且Ta_(4)C_(3)-PVP联合照射组较单纯照射组Ki-67表达抑制更显著(t=4.75,P<0.05)、γ-H2AX焦点产额更多(t=4.42,P<0.05).结论Ta_(4)C_(3)-PVP纳米片可通过增加射线诱导的DNA DSBs,增强4T1荷瘤小鼠移植瘤的放射敏感性.
- 李欣悦尹俊张旭霞钟登琴陈雨陈红红
- 关键词：三阴性乳腺癌
