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张俨
作品数:
3
被引量:4
H指数:1
供职机构:
上海交通大学医学院
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
李振海
上海市儿童医院
马晴雯
卫生部
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张俨
1篇
李振海
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马晴雯
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生物技术通讯
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医学分子生物...
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1篇
2014
2篇
2012
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3
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利用自裂解多肽T2A在牛耳皮肤成纤维细胞中实现多基因共同表达
被引量:1
2014年
目的:探讨利用自裂解多肽2A构建的多顺反子载体能否在牛耳皮肤成纤维细胞中实现多基因的有效表达。方法:利用来自一点褐翅蛾病毒(TaV)的2A元件(T2A)将GFP和Neo基因连接到同一载体中,构建pCMV-GFP-T2A-Neo质粒,将其转染牛耳皮肤成纤维细胞,以FACS检测GFP基因的表达,RT-qPCR检测GFP、T2A和Neo的表达。结果:由T2A连接的GFP和Neo基因在mRNA水平上都有显著表达,且表达水平相当。结论:以T2A连接的基因在转入细胞后能正常翻译和表达,显示T2A在牛耳皮肤成纤维细胞中具有自裂解功能,可作为一种构建多顺反子载体的有效工具用于牛耳皮肤成纤维细胞的基因转移,为其将来在转基因牛研制中的应用奠定了基础。
张俨
马晴雯
多顺反子载体构建的策略及进展
被引量:3
2012年
多顺反子载体在基因治疗中具有重要的应用价值。目前常用的构建策略有多启动子载体,融合蛋白,插入内切蛋白酶位点,内部核糖体插入位点IRES等,但是这些构建方法往往有载体容量有限.受细胞类型限制,不能表达多个蛋白等缺点。自裂解多肽2A可应用在多顺反子载体构建中,并且具有结构短小,上下游基因表达平衡性好,可用于共表达多个蛋白等优点,是一种构建多顺反子载体的有效工具。
张俨
李振海
关键词:
基因治疗
IRES
利用φC31整合酶系统和Cre重组酶系统构建安全高效的转基因动物制备体系
φC31整合酶是一个位点特异的重组酶,可有效介导细菌附着位点(attB)和噬菌体附着位点(attP)之间的特异重组。研究发现其也可介导携带有attB序列的外源基因定点整合入哺乳动物基因组中的假attP位点。 Cre/L...
张俨
关键词:
转基因动物
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