常灵竹
- 作品数：15 被引量：47H指数：5
- 供职机构：沈阳农业大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪血凝性脑脊髓炎诊断方法及其免疫病理学研究
- 研究目的:建立猪血凝性脑脊髓炎诊断方法;研究猪血凝性脑脊髓炎病毒(Hemagglu- tinating encephalomyelitis virus, HEV)感染后宿主的免疫应答反应;研究HEV S蛋白、M蛋白和N蛋...
- 常灵竹
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒荧光定量RT-PCR病毒分布免疫反应
- 疑似病毒感染金丝猴死亡病例报告被引量：5
- 2006年
- 高丰贺文琦陆慧君宋德光成军常灵竹赵魁
- 关键词：病毒感染金丝猴病例报告人工圈养大熊猫
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建猪血凝性脑脊髓炎病毒株(67N)血凝素酯酶蛋白(HE蛋白)原核表达系统,为建立特异性免疫学诊断方法提供备选材料。方法克隆猪血凝性脑脊髓炎病毒(67N)HE蛋白抗原表位富集区基因,构建重组表达质粒pET-HE,并在大肠杆菌中诱导表达。经包涵体的初步纯化,金属螯合层析进一步纯化HE蛋白,SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果大肠杆菌可高效表达HE蛋白,目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的42.2%。纯化后蛋白浓度为0.6 mg/ml,纯度为85.4%。所表达的蛋白可被兔抗猪血凝性脑脊髓炎阳性血清所识别。结论已成功构建猪血凝性脑脊髓炎病毒HE蛋白原核表达载体,重组HE蛋白抗原具有良好的特异性,可作为检测猪血凝性脑脊髓炎病毒血清抗体的候选抗原。
- 常灵竹宋德光贺文琦陆慧君李志萍陈克研高丰
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒克隆原核表达
- 1株高致病性血凝性脑脊髓炎病毒的分离与鉴定被引量：8
- 2007年
- 利用细胞培养方法从临床表现神经症状的死亡仔猪脑组织内分离获得1株病毒,同时对该病毒进行电镜负染观察、昆明种小鼠致病性试验、RT-PCR检测和部分基因测序分析。电镜观察可见细胞培养物中有大量的直径约115 nm的冠状病毒样粒子;接种病毒的小鼠均出现典型的神经症状,死亡率100%;血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)特异性引物RT-PCR扩增结果阳性;其S基因序列与GenBank中登录的HEV-67 N相应基因序列的同源性高达99.6%。结果表明,分离的病毒为猪血凝性脑脊髓炎病毒,分离株暂命名为HEV-CC-2007。
- 贺文琦陆慧君宋德光陈艳玲李志萍周玉常灵竹高丰
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒
- 猪血凝性脑脊髓炎研究进展被引量：2
- 2016年
- 猪血凝性脑脊髓炎（PHE）是由血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）感染引起猪的一种急性传染病,主要侵害1周龄~3周龄的哺乳仔猪。感染仔猪以呕吐、衰竭和神经症状为特征,病死率很高。血凝性脑脊髓炎病毒具有嗜神经性,主要从感染部位经外周神经向中枢神经系统传播,引起中枢神经系统损伤,从而造成非化脓性脑炎的病变。论文主要对猪血凝性脑脊髓炎的病原、临床症状和病理变化、致病机制、潜在危害及防治等方面进行综述。
- 徐囡吴长德张英俊常灵竹
- 关键词：致病机制病理变化
- 犬细小病毒的分离鉴定被引量：1
- 2012年
- 从吉林市某动物医院疑似犬细小病毒感染犬的粪便样本中分离出一株病毒,该病毒能在猫肾细胞上增殖,产生CPV典型性细胞病变。通过血凝效价测定、血清中和试验及PCR扩增对该病毒株进行鉴定。结果表明,该病变细胞的血凝效价为28,可被CPV阳性血清所抑制,PCR扩增可见650bp目的条带,说明所分离的病毒株为CPV。动物试验结果显示,1.5月龄犬感染CPV第5代细胞培养物后,幼犬出现典型的临床特征,表明该毒株具有一定的致病性。
- 辛秀常灵竹崔成邵媛媛邹艳茹李福强
- 关键词：犬细小病毒
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒S1蛋白基因在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2008年
- 应用特异性引物从猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)中扩增出S1蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体中,得到重组质粒pTS1。用EcoRI和Not I双酶切pTS1,回收目的基因S1片段将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαAS1。用BstXI酶切pPICZαAS1使其线性化,并电转至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子,用1%甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析。结果显示,在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为73000的重组蛋白,且该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明HEV的S1蛋白片段在毕赤酵母中获得成功表达。
- 陆慧君贺文琦高丰常灵竹赵魁盖显英王龙涛宋德光
- 关键词：血凝性脑脊髓炎病毒S1蛋白毕赤酵母
- 伪狂犬病病毒吉林分离株感染BHK-21细胞的超微结构变化被引量：7
- 2010年
- 以猪伪狂犬病病毒（PRV）吉林分离株PRV-JL感染体外培养的BHK-21细胞为模型,通过透射电镜对PRV的形态发生学和宿主细胞超微结构的动态变化规律进行研究。结果显示,PRV能导致BHK-21细胞圆缩,并发生细胞融合,形成合胞体;电镜观察到的病毒粒子呈球形或椭圆形,成熟的病毒粒子直径大小为140~210 nm,未成熟病毒粒子直径为90~150 nm,多呈中空状,部分呈致密核芯。病毒吸附于细胞后以膜融合的方式进入细胞,在胞核内复制,装配好的病毒粒子以出芽的方式离开细胞核,获得最初的囊膜,进入胞浆;在胞浆内的病毒粒子又利用高尔基体的膜结构合成第2层囊膜,形成完整的病毒粒子;最后包裹有完整病毒粒子的高尔基囊泡与细胞膜发生融合,将病毒粒子释放到细胞外。感染细胞超微结构变化主要表现为：细胞胞浆空泡增多,内质网扩张,线粒体增生、嵴肿胀、脱落,最后空泡化,整个细胞裂解、破碎。
- 初小辉常灵竹骆艳秋贺文琦陈克研高丰
- 关键词：猪伪狂犬病病毒BHK-21细胞超微结构
- 兔抗猪血凝性脑脊髓炎高免血清及IgG的制备
- 2011年
- 利用灭活的猪血凝性脑脊髓炎病毒加弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂免疫家兔,制备高免血清,测定其效价;用硫酸铵-蛋白A亲和层析法分离纯化兔血清IgG,并采用SDS-PAGE和ELISA对IgG纯化产物进行检测。结果表明,兔抗HEV高免血清的效价为1:12800;采血并分离血清,经过亲和层析纯化得到的兔抗HEVIgG,效价达150000。
- 常灵竹苗丽娟
- 关键词：高免血清IGG
- 鸡传染性贫血病毒辽宁株全基因克隆及遗传进化分析被引量：2
- 2020年
- 为了评估辽宁地区鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)的变异情况及致病能力,试验提取鸡传染性贫血发病鸡肝脏总DNA,依据GenBank中德国株CUX-1(M55918.1)基因序列设计3对特异性引物进行PCR扩增、测序及序列分析;然后对鸡传染性贫血发病鸡肝脏进行常规处理,取菌液接种1日龄SPF雏鸡,观察其是否具有致病性。结果表明:成功分离出1株CAV(DD-2016),该毒株基因编码区全长为2 297 bp,共编码764个氨基酸,与GenBank中南韩株South Kores(JF507715.1)核苷酸序列的同源性最高(99.17%);该分离株能引起SPF雏鸡发生贫血、皮下出血、胸腺萎缩、骨髓黄化等典型病理学损伤。说明辽宁地区目前流行毒株基因发生了较大变异且致病力较强。
- 蔡静何顺东王兴赫常灵竹吴长德
- 关键词：鸡传染性贫血鸡传染性贫血病毒全基因克隆进化分析
