左海斌
- 作品数：24 被引量：58H指数：5
- 供职机构：山东大学附属济南市中心医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学一般工业技术更多>>
- PHA、ConA及CD3ε单克隆抗体对小鼠淋巴细胞迁移及分泌趋化因子的影响
- 目的 探讨不同浓度的PHA、ConA及CD3ε单克隆抗体对BALB/c小鼠淋巴细胞迁移及分泌趋化因子的影响,初步了解这三种刺激剂与小鼠淋巴细胞迁移功能之间的关系.方法 通过研磨法分离BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞,用不同浓...
- 周灵彭代智陈博左海斌刘敬周新
- 新生小牛皮肤的形态学和生物力学特点及脱细胞方法探索被引量：6
- 2012年
- 目的通过新生小牛与成人皮肤组织在形态学和生物力学性能方面的对比研究,寻找临床应用牛真皮基质的可能证据,并初步探索对牛真皮组织进行脱细胞处理的方法。方法收集新生小牛和成人背部全层皮肤标本,采用大体观察、HE染色、Masson三色染色、天狼猩红染色、Gomori醛复红染色、扫描电镜和透射电镜的方法,显微照相后进行形态学观察和图像分析软件的测量;采用力学生物材料试验机检测皮肤的力学性能。采用胰蛋白酶与去污剂的不同浓度和时间组合方式对牛真皮组织进行脱细胞处理,初步观察其脱细胞效果。结果新生小牛与人的皮肤比较,真皮和表皮的厚度均明显变薄,两者的比值显著减小;真皮内Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维分别较人真皮增多和减少,但真皮胶原纤维束的间隙率[(41.72±1.81)∶(40.66±1.40),P=0.467]和胶原纤维束粗细[(11.28±0.18)μm∶(10.88±0.66)μm,P=0.368]差异却没有统计学意义。扫描电镜观察可见新生牛真皮胶纤维束与人真皮胶原纤维束均较纤细,排列疏松,且有一定的孔隙分布;透射电镜显示新生牛真皮胶原原纤维横纹周期长度较人真皮短,但两者的胶原原纤维直径显著差异。生物力学检测示新生牛皮肤最大应力[(21.08±0.91)MPa]和杨氏模量[(82.12±1.23)MPa]均要明显高于人皮肤的最大应力[(12.76±1.60)MPa,P=0.001]和杨氏模量[(48.63±5.50)MPa,P=0.001],而最大应变却明显低于人真皮[(0.51±0.002)mm∶(0.75±0.028)mm,P=0.001]。脱细胞方法探索显示随着胰酶浓度的增加、处理时间的延长,新生牛真皮基质内细胞核成分越来越少,但对真皮胶原结构的破坏也越来越大。结论新生牛皮肤虽然在表皮与真皮厚度、真皮胶原类型比例以及生物力学上与人皮肤有明显差异,但真皮的胶原纤维束三维结构两者之间存在较大相似性。适当浓度和时间的胰蛋白酶组合可制备出空间结构和脱细�
- 陈博彭代智左海斌郑必祥周灵
- 关键词：皮肤组织学生物力学脱细胞真皮基质
- 渗透冲击联合超声和去污剂处理对新生牛真皮组织学和生物活性成分的影响
- 2012年
- 目的采用渗透冲击联合超声和去污剂处理新生牛真皮,观察处理前后新生牛真皮基质的组织学和生物活性成分的变化。方法从8头健康雄性新生牛皮肤获取网状层真皮组织。采用反复渗透压改变、超声震荡和去污剂联合法对新生牛网状层真皮进行处理,HE染色、DAPI染色和核酸电泳检测细胞成分残留情况;扫描电镜(SEM)观察胶原束结构和细胞成分;PicoGreen法、DMMB法和BCA法对脱细胞前后真皮基质的DNA、sGAG和蛋白质含量进行定量分析;ELISA法测定脱细胞前后真皮基质内TGF-β1、EGF、bFGF和KGF含量。结果形态学观察可见脱细胞处理后的真皮三维结构完整,胶原纤维束排列较疏松,细胞清除较彻底,未见明显细胞及细胞碎片残留。与脱细胞处理前比较,脱细胞处理后的DNA含量[(2 516.1±324.2)ng/mg vs(249.5±53.8)ng/mg,P=0.000)]、sGAG含量[(5.92±0.50)μg/mg vs(2.48±0.24)μg/mg,P=0.000]、TGF-β1含量[(478.8±196.1)pg/g vs(180.3±111.0)pg/g,P=0.009]和EGF含量[(10.52±2.78)pg/g vs未能检测到EGF含量]均明显减少;而bFGF含量[(788.6±333.8)pg/g vs(364.8±294.8)pg/g,P=0.424]下降了53.7%,KGF含量[(0.033±0.000)pg/g vs(0.033±0.000)pg/g,P=0.433]变化不显著。结论反复渗透冲击联合超声和去污剂处理对新生牛真皮基质明显地清除了细胞及细胞碎片,较好地保留了真皮细胞外基质的三维结构和主要生物活性成分。
- 陈博彭代智左海斌郑必祥周灵周新刘敬
- 关键词：真皮细胞外基质超声
- CCL20基因敲低型人永生化角质形成细胞克隆的体外生长特性观察被引量：1
- 2009年
- 采用MTT比色法、碘化丙啶染色法和直接免疫荧光双标记法分别观察4个CCL20基因敲低型人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)克隆(代号分别为Ⅱ～Ⅴ)的生长曲线、细胞周期以及表皮干细胞相关表型,预期筛选出体外生物学性状良好的表皮种子细胞克隆。结果显示,与未转染的HaCaT细胞(代号为Ⅰ)比较,Ⅲ～Ⅴ在体外培养第5、6天的光密度值显著降低;Ⅲ和Ⅳ的G2+M期显著增多;Ⅳ和Ⅴ表达CD49f^+CD71-的百分率显著升高,而表达CD49f^+CD71^+、CD71^+的百分率显著降低。可见,4个CCL20基因敲低型HaCaT细胞克隆中仅有Ⅱ表现出与未转染HaCaT类似的体外生长特性,该克隆有可能成为构建低免疫原性组织工程皮肤的表皮种子细胞。
- 何斌彭代智何升东周新刘敬王勇王丽华郑必祥左海斌
- 关键词：角质形成细胞细胞周期
- 一种用于组织修复的颗粒状生物材料及其制备方法
- 一种用于组织修复的颗粒状生物材料及其制备方法，先将脱细胞组织基质、胶原、硫酸软骨素、透明质酸、壳聚糖、聚乳酸、聚羟基乙酸、藻酸盐中任一种或至少两种组合而制备的膜片状生物材料冻干，再在设定参数下常温切割成细长条，最后切割成...
- 彭代智左海斌郑必祥
- 超声清创在小面积慢性溃疡创面中的应用
- 石文辛乃军高聪左海斌张永虎宋国栋
- 颗粒状脱细胞真皮基质的形态学特征及理化性能体外研究被引量：4
- 2011年
- 目的研究颗粒状脱细胞真皮基质(particulate acellular dermal matrix,PADM)的体外形态学特征与理化性能。方法收集SD大鼠背部皮肤样本,采用本实验室的脱细胞方法制备片状脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)并分析其内胞核和DNA残留情况。将片状ADM切割成不同规格的PADM,并结合大体观察、组织学分析、电镜技术、激光粒度分析仪和傅里叶变换红外光谱仪检测其外观轮廓、形态学、粒径分布和胶原分子结构。并将其复合人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)体外培养24 h,观察PADM与HUVEC的黏附情况。结果脱细胞方法有效降低了ADM的DNA含量[(1.51±0.37)μg/mgvs(0.30±0.09)μg/mg]。制备的PADM为白色颗粒,外形近似于长方体或立方体,显微镜下HE染色观察显示颗粒内部胶原纤维束结构疏松。扫描电镜显示颗粒断面结构疏松,透射电镜显示胶原原纤维周期性横纹结构和均匀分布的胶原原纤维间隙。激光粒度分析仪检测显示其粒度分布集中,例如,规格为0.2 mm的PADM,其80%(d0.1～d0.9)的粒径分布于233～487μm。FTIR结果显示,PADM分别在1 659、1 549、1 239 cm-1处出现的特征吸收峰,表明其保留了胶原分子的α-helix、β-sheet和β-turn二级结构,且体外HUVEC较易黏附于PADM。结论室温条件下,切割法制备的新型PADM形态规则,粒径分布集中,胶原纤维束形态和胶原分子的二级结构保存良好。
- 左海斌彭代智郑必祥何升东周新刘敬
- 关键词：细胞外基质粒径分布
- 保留细胞外基质成分和生物活性成分皮肤组织工程支架的制备
- 彭代智陈博左海斌郑必祥周新刘敬
- 微等离子体治疗烧伤后色素沉着的疗效观察
- 石文辛乃军高聪左海斌张永虎宋国栋
- PHA、ConA及CD3ε单克隆抗体对小鼠淋巴细胞迁移及分泌趋化因子的影响
- 目的 探讨不同浓度的PHA、ConA及CD3 ε单克隆抗体对BALB/c小鼠淋巴细胞迁移及分泌趋化因子的影响,初步了解这三种刺激剂与小鼠淋巴细胞迁移功能之间的关系.方法 通过研磨法分离BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞,用不同...
- 周灵彭代智陈博左海斌刘敬周新
- 关键词：PHACONA淋巴细胞细胞迁移趋化因子
