岳军 作品数:8 被引量:13 H指数:1 供职机构: 徐州医学院 更多>> 发文基金: 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 江苏省教育厅重大基础研究项目 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 经济管理 更多>>
抗HIF-1αmRNA锤头状核酶的计算机设计 2007年 设计一个抗缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶为构建它的基因表达载体选择靶点,以便用于肿瘤的基因治疗。从GenBank寻找缺氧诱导因子-1αmRNA的全序列,用RNA结构分析软件预测HIF-1αmRNA的二级结构并选择合适的核酶作用靶点,从而设计相应的锤头状核酶。HIF-1αmRNA的577位含有GUC三联体,可以作为核酶的切割靶点,设计的核酶包括22nt的催化活性中心和16nt的侧翼序列。计算机辅助预测证明此位点为合适的靶点,用Basic Local Alignment Search Tool(BLAST)筛选以确定的靶点序列的唯一性。成功设计抗HIF-1αmRNA锤头状核酶基因表达载体,为进一步运用核酶切割HIF-1αmRNA基因来抑制肿瘤生长铺平了道路。 岳军 金玉关键词:锤头状核酶 缺氧诱导因子-1Α 基因治疗 酶联免疫吸附法测定全血普乐可复浓度 2007年 目的探讨酶联免疫吸附法(ELISA)测定全血普乐可复(FK506)浓度的准确性及其在器官移植术后抗排斥治疗中的应用。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对27例肾移植术后患者不同时期全血中FK506谷值浓度进行监测,并结合临床调整剂量,分析该法准确性及对临床FK506应用的指导作用。结果在256个血样的50次检测中,质控检测结果全部在控制范围内,高低浓度两个质控与文献报道一致。结论ELISA法灵敏度高、特异性强,是一种较为理想的FK506血药浓度常规检测方法,适宜医院开展,是目前国内检测全血FK506浓度的首选方法。 岳军 张颖关键词:酶联免疫检测 普乐可复 肾移植 硫酸链霉素对小肠推进运动的作用 2003年 马鸿基 岳军关键词:硫酸链霉素 小肠 平滑肌 野生型MLK3真核表达载体的构建及其表达 2010年 目的构建野生型MLK3真核表达质粒并转染至COS-7细胞中表达。方法以大鼠海马总RNA为模板,通过RT-PCR分段扩增MLK3的序列,采用酶切、链接的方法先将目的基因克隆至pGEM-T,筛选正确的质粒后,再亚克隆至pcDNA3.1(+)。以脂质体转染法将构建好的重组质粒转染至COS-7细胞,通过免疫印迹鉴定重组质粒的表达。结果限制性内切酶酶切和测序结果表明,扩增出的野生型MLK3的序列正确。免疫印迹显示,转染的重组质粒在相对分子质量92×103处有相应条带出现。结论成功构建了MLK3的真核表达质粒,重组质粒在COS-7细胞中高效表达。 金磊 岳军 杜彩萍 侯筱宇关键词:克隆 真核表达 p38α半胱氨酸点突变体真核表达载体的构建和表达 被引量:1 2015年 以pFLAG-CMV-5.1-p38α为模板,应用PCR定点突变技术将p38α的第39、119、162和211位半胱氨酸(Cys)点突变体定点突变为丙氨酸(Ala)(C39A、C119A、C162A、C211A),使用琼脂糖凝胶电泳及基因测序检测其结果;并采用脂质体转染法将p38α的野生型和突变体质粒分别转入HEK293细胞,免疫印迹鉴定野生型及其突变体p38蛋白表达。结果显示,构建的C39ApFLAG-CMV-5.1、C119ApFLAGCMV-5.1、C162ApFLAG-CMV-5.1和C211ApFLAG-CMV-5.1重组载体成功点突变,并在HEK293细胞中高效表达,为深入研究p38在缺血性脑损伤中的作用及机制打下基础。 岳军 齐素华关键词:真核表达载体 HEK293细胞 新形势下高校实验技术人员的素质 被引量:11 2007年 文阐述实验技术人员作为培养高素质、高水平的医学人才的主要执行者,必须面对现实、开拓进取、不断提高自身素质,才能更好地为实验教学和科研服务。 岳军关键词:实验教学 L型电压门控钙通道α_(1C)亚基羧基末端肽段真核表达载体的构建和表达 2008年 目的构建增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记的L型电压门控钙通道(L-type voltage-gated calcium channels,L-VGCCs)α1C亚基羧基末端肽段(CT,1587-2169)的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达。方法采用RT-PCR方法扩增CT的cDNA,克隆至真核表达载体pcDNA3.1;采用PCR方法扩增标签蛋白EGFP的cDNA,克隆至重组体pcDNA3.1-CT,EGFP位于CT的羧基末端;采用脂质体转染法将重组体pcDNA3.1-CT-EGFP转染COS-7细胞,通过荧光显微镜和免疫印迹等方法检测重组体的表达。结果扩增了CT和EGFP的cDNA;构建的pcDNA3.1-CT-EGFP真核表达载体经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实了其序列的正确性;荧光显微镜下转染重组质粒的COS-7细胞中观察到绿色荧光,免疫印迹分析显示pcDNA3.1-CT-EGFP转染组有明显条带。结论成功构建pcDNA3.1-CT-EGFP真核表达载体,并且在COS-7细胞中得到表达。 彭冰 岳军 杜彩萍 侯筱宇关键词:克隆 海人藻酸受体亚基GluR6真核表达载体的构建及其表达 被引量:1 2007年 目的构建海人藻酸受体亚基GluR6的真核细胞表达载体,并在COS-7细胞中表达。方法根据GenBank数据库中GluR6的cDNA序列(Z11548),分3段分别设计并合成3对引物。从大鼠海马组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得目的基因片段,分别克隆至pGEM-T载体中。经测序确证后,将该3段cDNA片段依次与pcDNA3.1(+)载体定向连接。将鉴定正确的重组体以脂质体法转染至COS-7细胞中,免疫印迹法检测GluR6蛋白质表达水平。结果克隆了GluR6的cDNA,并构建了其真核表达载体GluR6-pcDNA3.1,经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实了其序列的正确性;免疫印迹分析显示,GluR6在COS-7细胞中表达水平较高。结论成功构建GluR6-pcDNA3.1真核表达载体,并且在COS-7细胞中得到高效表达。 岳军 侯筱宇 杜彩萍关键词:GLUR6 克隆