尹彦涛
- 作品数：15 被引量：57H指数：5
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划中国博士后科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒河南分离株的遗传变异分析
- 经间接免疫荧光试验和RT-PCR鉴定,用Marc-145细胞从河南省不同地区送检的疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征的病料中分离到16株猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV).扩增分离株的ORF5基因并进行序列测定.比较分析和...
- 李伟娟夏平安卢高峰党占国尹彦涛王中明邱璜崔保安
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒ORF5基因基因克隆
- 一例笼养蛋鸡痛风病的诊治被引量：2
- 2007年
- 鸡痛风病是由于蛋白质代谢障碍或药物中毒等原因导致肾脏受到损伤，进而使尿酸或尿酸盐大量沉积在关节囊、关节软骨、关节周围、胸腹腔及各种脏器表面和其他问质组织中的一种疾病。临床上以病鸡行动迟缓、腿与翅关节肿大、厌食、跛行、衰弱和腹泻等为特征。而且近年来该病的发生有增多的趋势，特别是集约化笼养的蛋鸡，由于饲料生产、饲养管理水平中有许多诱发痛风的因素，因此，痛风是我国养鸡业所面临的重要疾病之一。
- 尹彦涛周海范林秀芬赵云航柴春霞
- 关键词：蛋白质代谢障碍集约化笼养鸡痛风病诊治关节肿大
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白的高效表达及间接ELISA方法的建立被引量：19
- 2009年
- 根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株ATCC VR2332的N蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从PRRSV Hn-1/06株中克隆了大小为372bp的N蛋白基因(EU025136)。将N蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-N,在IPTG的诱导下成功表达了相对分子质量约为33000的可溶性融合蛋白N-His;经SDS-PAGE和凝胶薄层扫描分析,融合蛋白的表达量约占细菌总蛋白量的29%。将融合蛋白加入镍琼脂糖凝胶树脂层析柱,经300mmol/L咪唑磷酸盐缓冲液洗脱,其纯度可达91%。用Western blotting分析纯化后的融合蛋白,显示良好的生物学活性。利用纯化融合蛋白作包被抗原及优化ELISA反应条件,建立了可检测抗PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法(N-ELISA),并将所建立的N-ELISA与国外进口的PRRS检测试剂盒IDEXX-ELISA对200份临床送检血清进行平行检测,阳性符合率为92.7%。结果表明,本试验建立的N-ELISA与IDEXX-ELISA具有同样高的特异性。
- 夏平安尹彦涛李素平党占国王建举王中明李伟娟崔保安
- 关键词：PRRSVN蛋白ELISA
- 整合猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的重组鼠白血病病毒特性被引量：1
- 2008年
- 通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒完整的GP5基因并进行了克隆与鉴定。序列测定结果与已经登陆GenBank的EF488048高致病性江西株比对分析表明碱基同源性达98.7%。构建含GP5基因的真核表达载体pcDNA-GP5,通过与鼠白血病病毒(MuLV)假病毒构建体系的两种质粒pHIT60和pHIT111共转染人胚肾细胞293T,48h后收集假病毒上清,超离后通过Western-blot证明GP5蛋白在假型病毒颗粒表面存在,表明GP5蛋白被整合到此假型病毒粒子表面。通过感染293T、Mark-145不同的靶细胞,证实所构建的假型病毒粒子具有感染性。成功构建了具有感染性的MuLV-GP5假病毒体系,为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入细胞的机理及其组织嗜性的变异提供一种新方法。
- 党占国夏平安周斌尹彦涛王建举柴春霞崔保安陈溥言
- 关键词：鼠白血病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因假病毒
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1//06株N蛋白基因克隆与表达及间接ELISA方法的建立
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征/(Porcine Reproductive and Respiration Syndrome,PRRS/)是目前引起猪场繁殖障碍的主要疫病之一,PRRSV基因组中一共有6种结构蛋白基因,分别由OR...
- 尹彦涛
- 关键词：PRRSN蛋白ELISA
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2009年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）属于动脉炎病毒科、动脉炎病毒属的单股正链RNA病毒，是目前引起猪繁殖障碍的主要疫病之一，临床上以母猪发热、厌食、早产、流产和产木乃伊胎、死胎、弱仔等繁殖障碍及各种年龄猪的呼吸困难和仔猪的高死亡率为特征。
- 李素平夏平安汪银锋尹彦涛王中明卢高峰
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒间接ELISA方法重组N蛋白正链RNA病毒猪繁殖障碍动脉炎
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株GP3蛋白的原核表达与纯化被引量：8
- 2009年
- 根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成了1对特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为765 bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF3的阳性克隆pTG19-T-GP3。将此基因亚克隆到原核表达载体pET-32a,经筛选获得了阳性重组质粒pET-GP3,进而在IPTG的诱导下成功表达,获得了大小约为45 kDa的融合蛋白GP3-His,纯化后经Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。从而为进一步研究PRRSV次要结构蛋白GP3的免疫特性和功能奠定了基础。
- 王中明李素平夏平安尹彦涛李伟娟邱璜刘明莉刘玉松崔保安
- 关键词：PRRSVGP3蛋白原核表达
- 鸡干扰素的研究进展被引量：7
- 2008年
- 干扰素自发现以来,它的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节机制逐渐清晰,而现在它的抗病毒机制中信号传导途经及分泌表达的调节正成为研究热点。作者就上述方面作一综述。
- 王建举夏平安尹彦涛柴春霞党占国王彦彬高卫科
- 关键词：鸡干扰素抗病毒作用信号传导分泌调节
- 假基因的研究现状及展望被引量：6
- 2008年
- 在庞大的基因组序列中数量占绝对优势的序列因为不编码蛋白质或RNA产物,但在结构和DNA序列上与相应的活性基因具有相似性,一直被人们认为是假基因。作者对假基因的来源、特性、分布特点、作用机理、功能、假基因与进化及对假基因的展望进行了综述。
- 赵云航康相涛孙桂荣尹彦涛白义春
- 关键词：假基因基因组
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒河南分离株ORF3-7基因克隆与序列分析被引量：12
- 2008年
- 参照GenBank中公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株ATCC VR2332的ORF3～7基因序列,利用Pri mer软件分别设计合成了针对PRRSV ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株分别扩增得到了大小约964、675、718、566和501 bp的片段,并将扩增的片段插入PGEM-T-easy载体进行测序。利用DNAStar软件进行序列分析表明,河南分离株Hn-1/06株属于美洲型,同时将Hn-1/06株ORF3～7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR2332、LV、Resp、CH-1a、BJ-4、S1、CC-1、HB-1、JX0612、HUB1等分离株进行了同源性分析。
- 尹彦涛夏平安崔保安王建举党占国柴春霞陈红英李新生
- 关键词：PRRSV克隆与序列分析
