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宋玮
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子细胞生物学重点实验室
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发文基金:
中国科学院知识创新工程
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
黄圣兵
中国科学院上海生命科学研究院生...
林其谁
中国科学院上海生命科学研究院生...
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2005
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大鼠电子传递黄素蛋白-泛醌氧化还原酶cDNA的克隆、功能表达和细胞定位
被引量:2
2005年
从大鼠肝线粒体纯化得到一个内膜结合蛋白,经蛋白酶水解发现丰度最高的两个肽段含有相同的一个14肽序列.BLAST同源搜索找到了与这个14肽对应的大鼠基因组DNA.利用RACE的方法得到一个完整开放阅读框的cDNA,编码含616个氨基酸残基的蛋白质序列.克隆得到的大鼠cDNA与人的ETF-QO具有很高的同源性.通过序列比较发现克隆得到的cDNA对应大鼠ETF-QO的蛋白前体ETF-QOp,而从大鼠肝线粒体纯化得到的内膜结合蛋白则是ETF—QO. 构建的pYES/ETF—QO在酵母中的表达产物富集于线粒体组分,并具有ETF—QO的氧化-还原活性, 因此获得了ETF-QO在酵母中的功能表达,表明ETF—QOpN端32肽是线粒体的引导肽,且FAD 及[4Fe-4S]被正确地组装.ETF—QO在大鼠的心、肝、肾表达较高,而在脾与肺却很低.在动物细胞中表达了ETF—QOp的GFP融合蛋白,它在细胞内与线粒体的特异染料呈共定位.
黄圣兵
宋玮
林其谁
关键词:
鼠肝
肝线粒体
动物细胞
克隆
泛醌
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