宋承辉
- 作品数：27 被引量：109H指数：6
- 供职机构：中国人民解放军沈阳军区联勒部更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省科技厅资助项目更多>>
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- SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段原核表达载体的构建及表达
- 2004年
- 为构建SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段的原核表达载体,采用人工合成法合成SARS病毒E2蛋白3′端cDNA;用常规分子克隆方法将此cDNA片段克隆入原核表达载体pBV220中,经温度诱导和SDS-PAGE电泳证明外源蛋白表达。结果表明合成的E2蛋白cDNA经序列测定,与报道的SARS病毒相应序列一致,内切酶酶切及PCR均得到456bp的cDNA片段,与实验设计一致,证明此cDNA片段已插入pBV220载体中;SDS-PAGE电泳表明有外源蛋白表达。结论:用本文介绍的方法可成功地合成并克隆SARS病毒E2蛋白原核表达载体,此项研究结果为SARS的诊断和预防奠定了基础。
- 聂晶宋承辉赵洪礼张伟建吴益民王继群
- 关键词：SARS病毒E2蛋白原核表达载体分子克隆
- 构建SARS病毒E2蛋白保护性抗原原核表达载体
- 2004年
- 目的 构建SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段的原核表达载体 ,为SARS的诊断和预防奠定基础。方法 采用人工合成法合成SARS病毒E2蛋白 3’端cDNA ;采用常规分子克隆方法将此cDNA片段克隆入原核表达载体 pBV2 2 0中 ,经温度诱导和SDS -PAGE电泳证明外源蛋白表达。 结果 合成的E2蛋白cDNA经序列测定表明 ,与报道的SARS病毒相应序列一致 ,内切酶酶切及PCR均得到 4 5 6bp的cDNA片段 ,与实验设计一致 ,证明该cDNA片段插入了 pBV2 2 0载体中 ;SDS -PAGE电泳表明有外源蛋白表达。
- 赵洪礼宋承辉聂晶张伟建吴益民王继群
- 关键词：SARS病毒抗原基因克隆
- 改良淋病奈瑟菌选择性培养基的研制与试用
- 2001年
- 为了检测本室研制的改良淋球菌选择性培养基的性能,以英国 OXOID 公司的 TM 培养基作为参考培养基,分别接种淋球菌标准菌株 ATCC20916和30例怀疑为淋病的临床患者标本,比较生长情况:再挑取标准菌株单个菌落用三线法划线接种于两种培养基,在低倍显微镜下测量直径,比较菌落直径大小。结果表明,经37℃培养18h 后,标准菌株在 TM 培养基中菌落直径为0.53±0.03mm,在自制培养基中为0.52±0.04mm,经 t 检验,差异无统计学意义(P>0.05)。临床患者标本各有24例呈淋球菌阳性,阳性率一致。结论:本室研制的改良淋球菌培养基与参考培养基特异性、敏感性相同,淋球菌在上述两种培养基中生长速度相同,有望成为进口产品的替代品。
- 宋承辉聂晶赵洪礼王洪军张伟建
- 关键词：淋病培养基淋病奈瑟菌
- 人白细胞介素18cDNA的克隆和在大肠杆菌中的表达 被引量：11
- 2002年
- 聂晶赵洪礼刘洪涛马向杉王洪军宋承辉张伟建谭笑红
- 关键词：人白细胞介素18RT-PCR大肠杆菌克隆CDNA
- 鸡贫血病毒vp3基因融合表达载体的构建及表达被引量：1
- 2003年
- 为构建鸡贫血病毒vp3基因(肿瘤特异性凋亡基因)的原核融合表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,采用常规分子克隆技术,将vp3基因克隆入融合表达载体pGEX-4T-2中,氯化钙法转化大肠杆菌DH5α。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导、用SDS-PAGE检测表达产物。经限制性内切酶酶切和PCR扩增,表明vp3基因成功地克隆到原核表达载体上,分子量为380 bp;SDS-PAGE电泳显示,构建的表达载体表达出分子量(Mr)约为39 600的融合蛋白,与预期的结果相符。结论:采用上述方法可成功地构建vp3蛋白的融合表达载体,并在大肠杆菌中获得有效表达,对于vp3蛋白的大量制备、深入研究其诱导肿瘤细胞的性质具有实际意义。
- 聂晶赵洪礼张伟建宋承辉
- 关键词：鸡贫血病毒VP3基因融合蛋白肿瘤特异性凋亡基因
- 肿瘤特异性凋亡基因对人淋巴瘤细胞U937的凋亡诱导作用
- 2005年
- 为观察肿瘤特异性凋亡基因(apoptin gene)对人淋巴瘤细胞U937的调亡诱导作用,用含有apoptin 基因的真核表达载体短时转染体外培养的人淋巴瘤细胞U937;采用台盼蓝染色法、RT-PCR及DNA凝胶电泳等方法研究其在不同时间条件下对人淋巴瘤细胞U937诱导凋亡的作用。结果表明,apoptin基因短时转染的人淋巴瘤细胞U937可出现明显的细胞凋亡;而且凋亡细胞的数量与apoptin的转染时间有关。结论:apoptin基因具有诱导人淋巴瘤细胞U937凋亡的作用。
- 赵洪礼董萍聂晶宋承辉
- 关键词：淋巴瘤细胞凋亡基因
- 肿瘤特异性基因对黑色素瘤细胞凋亡诱导作用被引量：12
- 2004年
- 聂晶崔旭红赵洪礼张伟建宋承辉吴威
- 关键词：黑色素瘤细胞凋亡CAV
- 早期诊断肾综合征出血热自身红细胞凝集试验
- 2005年
- 贲松彬赵洪礼聂晶宋承辉董萍王军
- 关键词：肾综合征出血热病毒间接荧光抗体试验病毒性传染病基层医疗单位FAB片段抗原抗体
- 肿瘤特异性凋亡基因对荷瘤小鼠基因治疗的实验研究被引量：4
- 2003年
- 随着分子生物学研究的不断深入和人类基因组计划的完成, 人类正在进入基因诊断和基因治疗的时代, 特别是恶性肿瘤的基因诊断和基因治疗日益受到人们的重视.肿瘤的基因治疗虽然不能替代手术、化疗和放疗, 但其可能对提高化疗、放疗的敏感性, 减少肿瘤术后复发和转移具有一定的作用.近年研究发现, 鸡贫血病毒(chicken anemia virus, CAV)VP3基因编码的一种蛋白质, 可通过独立于p53作用途径、不被Bcl-2抑制的方式, 诱导人肿瘤细胞或转化细胞凋亡, 而对人正常细胞没有毒性作用, 故称之为肿瘤特异性凋亡因子, 鉴于其独特诱导凋亡的作用, 有望成为一种有效的抗肿瘤药物[1,2].我们在克隆和构建了VP3基因真核表达载体的基础上, 进一步研究了其在肿瘤基因治疗中的作用.
- 赵洪礼聂晶崔旭红张伟建宋承辉
- 关键词：肿瘤基因治疗凋亡
- 用Feulgen方法检测凋亡细胞的实验研究被引量：2
- 2004年
- 聂晶董萍赵洪礼张伟建宋承辉
- 关键词：细胞凋亡质粒染色法染色质
