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犬2型腺病毒E1转化细胞系的特性研究被引量：1: 2003年; 对筛选到的一株CAV-2 E1转化细胞(DK/E1)进行了初步的特性研究。以DK细胞为对照,观察到转化细胞的形态与DK细胞有明显区别,细胞变长,易聚集生长。通过测定DK及DK/E1细胞分别在2％、5％和10％牛血清培养基中的生长曲线,结果发现DK/E1细胞的生长速度比DK细胞快。用蚀斑和TCID50测定了病毒在DK和DK/E1细胞上的病毒滴度,结果表明DK/E1细胞产生的病毒蚀斑比DK细胞的大,TCID50测得的病毒滴度比DK细胞产生的病毒滴度高。CAV-2全基因组DNA对DK/E1细胞和DK细胞的转染试验结果表明,5μg和10μg的CAV-2DNA转染的DK/E1细胞,分别在转染后第14天和第11天均出现了典型的腺病毒细胞病变,而相同量CAV-2 DNA转染的DK细胞未出现病变,说明DK/E1细胞有助于CAV-2 DNA的复制和病毒粒子的包装。在DK/E1细胞内的重组试验表明,DK/E1细胞也有利于重组病毒的产生。以上转化特性在DK/E1细胞传至80代时仍保持不变,说明本试验获得了一株CAV-2 E1基因的转化细胞系。; 邱薇夏咸柱范泉水扈荣良王雷高玉伟孙阳尹惠琼李刚山; 关键词：犬2型腺病毒病毒载体转染

从鼻咽癌患者咽拭子中扩增EB病毒DNA被引量：1: 2000年; EB病毒(Epstein—Barr Virus)是由Epstein和Barr发现的一种人类疱疹病毒,近年来的研究表明EB病毒与低分化鼻咽癌、Burkitt’s淋巴瘤、Hodskin’s病、胃癌等恶性肿瘤的发生有较密切的关系,EB病毒与肿瘤的相关性研究已经成为当前肿瘤病因学研究中的热点。本文采用多聚酶链反应(PCR)从5例鼻咽癌患者咽拭子中扩增出EB病毒DNA,现报告如下。1 材料与方法1.1 材料; 向左云王双印倪燕萍伍治平孙阳; 关键词：鼻咽癌 EB病毒多聚酶链式反应

抗五步蛇毒ScFv噬菌体显示文库的构建及表达被引量：4: 2004年; 目的 :构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库 ,并从中筛选出阳性克隆。方法 :用五步蛇毒素免疫BALB C小鼠 ,挑选其中效价最高的 3只小鼠提取脾脏组织 ,抽提细胞总RNA ,经RT PCR分别扩增出VH、VL基因片段 ,经Linker连接成ScFv基因 (singlechainvariablefragment) ,再把ScFv基因重组到pCANTAB 5E载体 ,转化至大肠杆菌TG1中表达 ,经辅助噬菌体 (Helperphage)M13K0 7拯救后建成噬菌体显示文库。结果 :经 4轮吸附洗脱富集筛选后 ,库容量达到 4× 10 8cfu L ,随机挑取 90个克隆进行ELISA检测 ,结果 16个呈阳性 ,并进行了重复验证。结论; 尹惠琼范泉水谭德勇王双印孙阳李刚山邱薇余敏; 关键词：五步蛇蛇毒单链抗体

犬2型腺病毒E1转化细胞的建立被引量：1: 2003年; 为建立能表达犬 2型腺病毒 (CAV 2 )E1基因的辅助细胞 ,本研究用含CAV 2E1基因的重组质粒pc E1t对DK细胞进行转染 ,经G41 8的筛选 ,得到 2 6个细胞克隆。用CAV 2E1A特异引物对各细胞克隆进行PCR和RT PCR检测 ,PCR结果表明转染后的细胞克隆都能扩增出 5 3 6bp的特异性片段 ,但仅有 6株为RT PCR强阳性 ,能扩增出 6 5 2bp的特异带。再对RT PCR强阳性的细胞克隆进行Westernblot分析 ,最终挑选到一个既能转录E1A基因 ,又能表达E1B 1 9kD蛋白的克隆细胞株 (DK E1 )。; 邱薇夏咸柱范泉水扈荣良王雷高玉伟张守峰孙阳杨美峰; 关键词：犬2型腺病毒 E1基因细胞克隆

感染性腹泻患者中缓慢爱德华菌的分离鉴定及侵袭性实验研究被引量：3: 2002年; 感染性腹泻是一组由不同病原体引起的肠道传染病,也是当今全球性重要公共卫生问题之一.; 李刚山尹惠琼邱薇孙阳龙沛然徐庆; 关键词：感染性腹泻

一起由副溶血弧菌引起的急性胃肠炎: 本文报告了一起由副溶血弧菌引起的急性胃肠炎,对该病的产生原因、发病机制进行了分析和讨论,并提出了防止该病发生的措施和建议.; 李刚山孙阳龙沛然范泉水丘薇尹惠琼; 关键词：急性胃肠炎副溶血弧菌流行病学细菌学; 文献传递

免疫酶斑点法检测HIV-1 DNA: 2001年; 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)在艾滋病毒感染的诊断、检测中起着重要的作用[1].为了确认PCR扩增的片段,常采用放射性标记的核酸探针对扩增产物进行Sorthern杂交.近年来采用生物素、地高辛等非放射性标记物的技术得到了广泛应用[2].本文介绍了用生物素标记HIV-1 DNA的扩增产物,然后用免疫酶斑点法(immuno enzyme dot assay, IEDA)直接检测扩增产物的方法.; 向左云王双印倪燕萍王维祥孙阳安克贵; 关键词：免疫酶斑点法多聚酶链式反应艾滋病毒

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孙阳