孙晓艳
- 作品数:20 被引量:47H指数:4
- 供职机构:山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家水禽产业技术体系建设项目山东省科技发展计划项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- H9N2亚型禽流感病毒对樱桃谷肉鸭的致病性研究
- 引言H9N2禽流感病毒(AIV)自1994年在我国大陆首次在鸡体内分离得到后,在我国呈广泛流行,对我国的养殖业造成严重的影响和经济损失。水禽特别是鸭是AIV的巨大贮存库和传染源,对AI的爆发和传播起非常重要的作用。目前在...
- 王蛟孙晓艳陈浩郝东敏鲁爱玲刁有祥
- 1株麻雀源坦布苏病毒的分离鉴定及全基因组序列分析被引量:8
- 2015年
- 从山东地区某发病鸭场周围的麻雀体内分离到1株坦布苏病毒,命名为SDS株,并对分离毒株进行毒力测定。应用RT-PCR技术对分离株全基因组进行扩增并测序,将获得的SDS株坦布苏病毒全基因组序列与已在Gen Bank发表的24株坦布苏病毒和6株其他黄病毒属病毒全基因组序列进行遗传进化分析。结果表明,该株坦布苏病毒的基因组全长为10 990 nt,包含94 nt的5’端非编码区、618 nt的3’端非编码区和一个开放阅读框(3 425个氨基酸),编码11种病毒蛋白;与Gen Bank已发表的坦布苏病毒的核苷酸序列同源性为98.2%~99.5%,氨基酸序列同源性为98.1%~99.4%,其中与鸭源WFZ株(KC990545.1)的核苷酸序列同源性最高为99.5%,与鹅源坦布苏病毒(duck eggdrop syndrome virus strain goose,JQ920424.1)和鸡源坦布苏病毒(CJD50,JF926699)的核苷酸序列同源性较低为98.9%。用Net NGlyc 1.0 Server在线软件对病毒蛋白潜在糖基化位点进行预测,结果表明在SDS株病毒多聚蛋白中共有13个潜在的糖基化位点,分别位于5个不同病毒蛋白中。
- 刘鑫刁有祥陈浩王蛟孙晓艳葛平萍郝东敏
- 关键词:全基因
- H9N2亚型禽流感病毒对樱桃谷肉鸭的致病性被引量:6
- 2014年
- 为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)对樱桃谷肉鸭的致病性。本试验利用1株鸭源H9N2亚型AIV分别通过静脉注射和鼻内接种途径感染2周龄健康樱桃谷肉鸭,观察感染鸭的症状、排毒规律及组织学变化,流式细胞术分析外周血CD4+和CD8+T细胞变化规律,实时荧光定量(RT-qPCR)检测脾脏中细胞因子的表达水平,并测定血清HI抗体效价。结果显示,攻毒后,静脉注射组鸭出现体质量增长显著缓慢、呼吸道症状以及全身性感染,而鼻内接种组鸭无明显临床症状,仅发生局部感染;两攻毒组鸭泄殖腔较气管排毒量高且排毒时间长;外周血CD8+T细胞显著升高,并且脾脏IFNA、IFNB、IFNG和IL2表达水平上调,IL1B和IL6表达水平仅在静脉注射组上调;血清HI抗体水平低且维持时间短。结果表明,在实验室条件下,H9N2亚型AIV对樱桃谷肉鸭致病力较弱,仅静脉接种组引起鸭体质量增长缓慢及呼吸系统出血、淋巴细胞浸润。
- 王蛟刁有祥孙晓艳郝东敏刘鑫葛平萍鲁爱玲
- 关键词:H9N2亚型禽流感樱桃谷肉鸭流式细胞术实时荧光定量
- B亚型禽偏肺病毒对SPF鸡的致病性研究
- 本研究利用分离的1株B亚型禽偏肺病毒,采用静脉注射和点眼滴鼻两种途径接种SPF鸡,并在接种同时免疫新城疫弱毒疫苗。在攻毒后3、6、9、12、15 d,每组随机抽取3只翅下采血,检测血液生化指标,利用血凝和血凝抑制试验检测...
- 孙晓艳刁有祥裴苹苹王蛟刘鑫
- 关键词:致病机制
- 文献传递
- 不同日龄肉鸭对坦布苏病毒的易感性研究
- 2010年,我国华东地区主要肉鸭、蛋鸭养殖区暴发了一种以雏鸭食欲减退、生长缓慢、神经障碍及蛋鸭产蛋大幅下降为主要临床特征的急性传染病。该疾病最初被命名为鸭出血性卵巢炎(DHO),进一步研究证明,该病是由一种新型黄病毒——...
- 孙晓艳
- 关键词:樱桃谷鸭荧光定量易感性
- 文献传递
- 新城疫病毒对雁鹅的致病性试验
- 引言新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease virus,NDV)引起禽类的一种高度接触性、急性败血性传染病,是严重危害养禽业最重要的传染病之一。近年来,NDV...
- 鲁爱玲陈浩王蛟孙晓艳刁有祥
- 鸭源NDV对SPF鸭免疫机能的影响被引量:2
- 2013年
- 【目的】探讨鸭源新城疫病毒(NDV)对SPF鸭免疫机能的影响。【方法】选用120只已免疫H5N1禽流感油乳剂灭活疫苗的SPF鸭,随机分为静脉注射组、点眼滴鼻组和对照组,每组40只。攻毒(2个试验组接种鸭源NDV 0.2mL(含病毒106 ELD50),对照组点眼滴鼻等量生理盐水)后观测各组鸭的发病死亡情况,于感染后不同时间随机剖杀试验组和对照组鸭,采集脾脏、法氏囊,按常规方法制备石蜡切片,TUNEL法检测脾脏、法氏囊细胞凋亡情况,同时检测血液生化和血液常规指标,并测定鸭源NDV对SPF鸭外周血中淋巴细胞转化率和H5N1油乳剂灭活疫苗HI抗体效价的影响以及CD4+/CD8+的动态变化,分析不同处理组鸭源NDV对SPF鸭免疫机能的影响。【结果】攻毒后,试验组SPF鸭发病率为100%,死亡率为32.5%,并出现呼吸困难、肺脏出血、腺胃乳头出血等症状及剖检变化;血常规检测结果显示,鸭源NDV静脉注射组和点眼滴鼻组血液中红细胞总数、血红蛋白含量先降低后显著升高,血小板总数、白细胞总数降低且均与对照组差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);血液生化检测结果显示,试验组鸭谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、淀粉酶活性升高,总蛋白含量降低,与对照组相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);静脉注射组和点眼滴鼻组的H5N1油乳剂灭活疫苗HI抗体效价比对照组低但差异不显著,淋巴细胞转化率与对照组相比降低且差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);静脉注射组与点眼滴鼻组的CD4+/CD8+变化趋势基本一致,均为先升高后降至正常水平以下。TUNEL法检测脾脏、法氏囊均出现细胞凋亡,且凋亡率随着攻毒后时间的增加而升高。【结论】SPF鸭接种鸭源NDV后能引起免疫抑制。
- 崔京腾刁有祥王蛟孙晓艳刘鑫
- 关键词:鸭源新城疫病毒免疫抑制
- 1株B亚型禽偏肺病毒的分离与鉴定被引量:8
- 2014年
- 从山东省多个地区的商品肉鸡养殖场采集64份疑似病料,通过RT—PCR方法检测出37份禽偏肺病毒阳性病料,以此作为病毒分离材料接种SPF鸡胚,盲传至第7代时鸡胚生长明显迟滞。取阳性尿囊液在CEF中培养,呈现禽偏肺病毒典型细胞病变(CPE):细胞变圆、悬浮,有合胞体形成。将分离株接种于Veto细胞及DF-1细胞均出现类似病变。对分离株F基因进行测序,并与GenBank中发表的部分代表序列比较。结果显示,与B亚型禽偏肺病毒的核苷酸同源性最高,为97.4%~99.3%;与A亚型禽偏肺病毒核苷酸同源性较低,为77.4%~78.1%;而与C亚型禽偏肺病毒核苷酸同源性最低,为69.5%~69.7%。基因分型显示分离株为B亚型禽偏肺病毒,将该毒株命名为禽偏肺病毒SDWF株。
- 薛聪唐熠陈琳崔京腾欧全宾孙晓艳裴苹苹刁有祥
- B亚型禽偏肺病毒重组G蛋白间接ELISA方法的建立及应用被引量:4
- 2013年
- 以纯化的B亚型禽偏肺病毒(aMPV)疫苗株(VIR-115B)重组G蛋白作为包被抗原,对各项条件进行优化,确定判定标准,建立检测B亚型aMPV抗体的间接ELISA方法。将构建好的重组质粒转入Rosetta(DE3)感受态细胞进行诱导表达,获得重组G蛋白。利用亲和层析法对表达产物进行纯化,并用Western-blotting对表达产物进行鉴定。以纯化后的重组G蛋白作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立检测B亚型aMPV抗体的间接ELISA诊断方法。结果显示,成功表达并纯化了B亚型aMPV疫苗株(VIR-115B)重组G蛋白,Western-blotting检测结果证明表达产物具有良好的反应原性。以重组G蛋白作为诊断抗原,建立了间接ELISA诊断方法。交叉试验结果表明重组G蛋白与新城疫、禽流感(H9N2)、传染性支气管炎和传染性法氏囊阳性血清均不发生交叉反应。该方法与法国IDEXX公司生产的aMPV抗体检测试剂盒符合率为96.0%。采用本试验建立的间接ELISA方法对山东省7个地区鸡场的1 139份鸡血清进行了检测,结果表明,山东省部分地区aMPV的抗体阳性率为37.05%。本试验建立的间接ELISA方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,利用该方法初步证实山东省部分地区存在aMPV感染现象。这一研究为aMPV诊断试剂盒的研制奠定了基础,并为该病的诊断与流行病学调查提供有效的技术手段。
- 陈琳刁有祥邹金峰唐熠程彦丽欧全宾薛聪崔京腾鞠小军孙晓艳裴萍萍
- 关键词:B亚型间接ELISA
- B亚型禽偏肺病毒对SPF鸡的致病性研究
- 本研究利用分离的1株B亚型禽偏肺病毒,采用静脉注射和点眼滴鼻两种途径接种SPF鸡,并在接种同时免疫新城疫弱毒疫苗.在攻毒后3、6、9、12、15d,每组随机抽取3只翅下采血,检测血液生化指标,利用血凝和血凝抑制试验检测新...
- 孙晓艳刁有祥裴苹苹王蛟刘鑫
- 关键词:致病机制
- 文献传递