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文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇专利

领域

  • 3篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 4篇皮蝇
  • 3篇免疫
  • 3篇酵母
  • 2篇蝇蛆
  • 2篇蝇蛆病
  • 2篇牛皮蝇
  • 2篇牛皮蝇蛆
  • 2篇牛皮蝇蛆病
  • 2篇皮蝇蛆病
  • 2篇免疫诊断
  • 2篇酵母表达
  • 2篇毕赤酵母
  • 1篇阴离子
  • 1篇阴离子交换
  • 1篇离子
  • 1篇离子交换
  • 1篇免疫试验
  • 1篇酵母表达载体
  • 1篇酵母菌
  • 1篇酵母菌株

机构

  • 4篇中国农业科学...

作者

  • 4篇徐梅倩
  • 4篇何国声
  • 4篇孙怡
  • 3篇朱顺海
  • 3篇曹杰
  • 2篇黄燕
  • 2篇高兴春
  • 1篇梁婉琪
  • 1篇张大兵
  • 1篇顾越星
  • 1篇孟秀珍
  • 1篇严凤

传媒

  • 2篇中国兽医寄生...
  • 1篇中国兽医学报

年份

  • 2篇2006
  • 1篇2005
  • 1篇2003
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
牛皮蝇素A(HA)在毕赤酵母系统中的表达及其应用
本发明公开了牛皮蝇素A(HA)在毕赤酵母系统中的表达及其应用,本发明中酵母表达载体为pPIC9k-HA,表达载体转化的能表达牛皮蝇素A(HA)的毕赤酵母菌株为GS115/pPIC9k-HA。毕赤酵母菌株GS115/pPI...
孙怡徐梅倩何国声张大兵梁婉琪朱顺海曹杰严凤黄燕
文献传递
毕赤酵母表达皮蝇素A蛋白被引量:5
2006年
建立了用毕赤酵母表达系统表达皮蝇素A(Hypodermotin A,HA)的技术,并对表达条件进行了优化筛选。将皮蝇素A基因连接到质粒pPIC9k上,构建了重组转移质粒pPIC9k—HA。重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115后,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选。重组酵母细胞在含0.5%甲醇的培养基中诱导产生目的蛋白,培养3d后收取上清,用阴离子交换层析柱分离纯化。经SDS—PAGE检测,所表达的蛋白相对分子质量约为30000。Western—blotting表明,该蛋白能与兔抗HA血清特异性结合。明胶电泳检测显示,该蛋白具有酶活性。单因素改变表达条件的结果表明,甲醇浓度在0.5%~1%、溶氧量在70%以上、诱导2~3d的情况下表达产量最高,达1500mg/L左右。该研究结果对防治牛皮蝇蛆痛疫苗的深入研究及毕赤酵母在寄生虫领域的应用有一定价值。
孙怡徐梅倩高兴春何国声
关键词:毕赤酵母GS115
用阴离子交换层析纯化牛皮蝇素A蛋白的研究被引量:6
2003年
 建立了用阴离子交换层析AKTAFPLC纯化果蝇S2细胞分泌的重组牛皮蝇素A(HypodermotinA,HA)的方法。将诱导培养3天的S2细胞上清液浓缩后,经25mMpH8.5Tris-HCl缓冲液透析,在MonoQ柱上以Tris-HCl+NaCl为流动相进行分离。在检测波长280nm处获得蛋白峰。经SDS-PAGE分析,第一峰的分子量与原重组蛋白HA分子量相符,并对明胶大分子具有酶活性;用斑点免疫金渗滤法检测证实对牛皮蝇抗体具有免疫原性。用阴离子交换层析纯化HA的方法具有获得的蛋白质纯度高、操作简便、生产效率高等特点。
徐梅倩顾越星孙怡曹杰朱顺海孟秀珍何国声N.MoireC.Boulard
关键词:SDS-PAGE斑点免疫金渗滤法牛皮蝇蛆病免疫诊断
重组牛皮蝇素A蛋白的免疫试验被引量:5
2006年
用由毕赤酵母表达的皮蝇素A(Hypderm in A,HA)蛋白分别免疫新西兰大白兔和牦牛,了解该蛋白免疫效果。用两种不同分子量的重组HA蛋白分别免疫新西兰大白兔1次和2次,ELISA测其抗体消长规律。结果表明,3周后抗体水平达到峰值,后缓慢下降。50KD蛋白免疫效果较30KD蛋白好,差异非常显著(P<0.01)。用其中50KD的重组HA蛋白分别在7月和9月免疫自然感染牛皮蝇蛆病牦牛,观察感染率和感染强度,ELISA测其抗体消长规律。结果表明,7月免疫组与9月免疫组感染率分别为83.3%和36.3%(对照组为55.5%);平均感染强度分别为6.5和4.2(对照组为13.0),差异不显著(P>0.05)。免疫后,抗体水平上升,3个月后缓慢下降。9月免疫组免疫效果较7月免疫组好,三组抗体水平差异非常显著(P<0.01)。上述研究结果为防治牛皮蝇蛆病疫苗的深入研究和实践运用提供了参考依据。
孙怡何国声徐梅倩曹杰朱顺海黄燕高兴春
关键词:毕赤酵母免疫试验抗体消长规律
共1页<1>
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