孙小慧
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 地高辛标记DNA探针杂交法检测Vero细胞DNA残留量的适用性验证及应用被引量：3
- 2016年
- 目的对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行适用性验证及应用。方法对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行特异性、灵敏度及稳定性验证,并应用该方法检测3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的DNA残留量。结果地高辛标记探针的标记效率为0.1 pg。验证结果显示探针与非同源DNA无杂交;最低检测限度为1 pg;探针在-20℃放置7个月后,检测灵敏度仍可达到1 pg;3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中残留DNA含量均符合《中国药典》规定质量控制标准。结论地高辛标记DNA探针杂交法特异性、灵敏度好,结果稳定,适用于人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中Vero细胞DNA残留量的检测及疫苗生产过程和其成品的质量控制,对其他以Vero细胞为基质的病毒性疫苗质量控制具有借鉴意义。
- 孙小慧刘晓凡赵雅静马超刘鹏冯德杰李薇魏然王革
- 关键词：地高辛DNA探针斑点杂交VERO细胞
- 应用SDS-PAGE及光密度扫描测定肾综合征出血热纯化疫苗(Ⅰ型)纯度被引量：1
- 1999年
- 应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后光密度扫描的方法，对兰州生物制品研究所生产的５批肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）乳鼠脑Ⅰ型纯化疫苗进行了纯度测定，结果５批疫苗的纯度为７５．７％－８９．８％，平均为８１．６８％，说明兰州所生产的乳鼠脑纯化疫苗纯度较好，杂蛋白含量很少。
- 杨世龙孙小慧李萍吕桂荣
- 关键词：肾综合征出血热
- 我国肾综合征出血热疫苗生产株LR1株的全基因组序列分析被引量：1
- 2001年
- 为测定我国肾综合征出血热疫苗生产株LR1株的全基因组序列 ,了解该株分子基础 ,从提取的细胞总RNA逆转录PCR扩增 ,产物纯化后克隆T载体纯化后测序 ,结果证明 ,LR1株全基因组序列由L6 5 33、M36 16、S片段的16 92个核苷酸组成 ,依各自读码框架分别编码 2 15 1、1135、42 9个氨基酸。序列同源比较分析表明 ,LR1毒株与国外HTN型毒株高度同源 ,属同一亚型 ,尤其与HTN代表株 76 - 1183个片段同源率高达 99 3%～ 99 8% ,而与国内的HTN型病毒差异较大 ,同源率仅为 79 4%～ 84 6 %。氨基酸比较也显示了同样的结果。
- 姚智慧王维新董关木俞永新杨世龙祝晓春刘文雪马小奇李萍孙小慧
- 关键词：肾综合征出血热疫苗系统发生树
- 双抗体夹心ELISA法检测肾综合征出血热汉滩病毒糖膜蛋白
- 1999年
- 用双抗体夹心ELISA法检测肾综合征出血热（HFRS）汉滩病毒LR1株糖膜蛋白（GP），并用SDS－PAGE电泳对ELISA检测结果进行验证，实验结果显示，双抗体夹心ELISA法特异性强，重复性好，简便易行，是HFRS汉滩病毒糖膜蛋白较为理想的检测方法，对HFRS疫苗的生产和质量控制有重要意义。
- 孙小慧杨世龙等
- 关键词：双抗体夹心ELISA法肾综合征出血热汉滩病毒
- 原代地鼠肾细胞及狂犬病毒不同培养方式的研究被引量：2
- 2012年
- 目的通过比较原代地鼠肾细胞在转瓶、微载体、细胞工厂的3种培养方式的培养效果,为原代地鼠肾细胞选择一种易扩大规模、培养高质量细胞的培养方式,进而提高狂犬病毒的产量。方法消化取得的细胞悬液分别在转瓶、微载体、细胞工厂中培养,通过显微镜观察细胞形态、计数等结果比对培养的差别。结果细胞工厂可以很好地培养原代地鼠肾细胞和狂犬病毒;而细胞在微载体上贴附性差,生长不好。结论实验结果表明细胞工厂可以取代转瓶,用于大规模培养原代地鼠肾细胞扩大狂犬病毒的产量。
- 马超赵祖波刘鹏刘晓凡孙小慧许博
- 关键词：原代地鼠肾细胞狂犬病毒转瓶微载体细胞工厂
- 肾综合征出血热病毒核衣壳蛋白在抗感染免疫中的应用被引量：1
- 2000年
- 采用区带离心纯化的肾综合征出血热 (HFRS)汉滩病毒LR1株核衣壳蛋白 (NP)分别免疫新西兰白家兔和昆明种小鼠。以NP免疫家兔后用LR1株病毒攻击 ,实验显示 ,免疫后的家兔可保护 10 0ID50 同株病毒的攻击 ;NP免疫母鼠所产的乳鼠能抵抗 10 4 ～ 10 5LD50 同株病毒的攻击。以上结果表明 :HFRS的病毒NP组分在抗感染免疫中起重要作用。
- 杨世龙孙小慧马小奇任宏伟苏玉华马燕华
- 关键词：汉滩病毒核衣壳蛋白抗感染免疫
- 肾综合征出血热乳鼠脑纯化疫苗(I型)糖蛋白及核蛋白在免疫保护中的作用
- 1999年
- 为了阐明肾综合征出血热纯化疫苗（Ｉ型）中糖蛋白（ＧＰ）、核蛋白（ＮＰ）在免疫保护中的作用，采用脾细胞转输法，分别将ＧＰ、ＮＰ、ＧＰ＋ ＮＰ免疫小鼠后的脾细胞与未经免疫的小鼠正常脾细胞（３．５×１０５ 个）经腹腔转输给乳鼠，２ ｈ 后以１００ ＬＤ５０的汉滩（ＨＴＮ）病毒（ＬＲ１ 株）进行脑腔攻击。结果表明，其乳鼠的保护率分别达７７．０％ ，３８．５％ 和９２．３％ ，而未经免疫的小鼠正常脾细胞则不能提供保护（０％ ），揭示了ＧＰ＋ ＮＰ在抗ＨＴＮ 病毒感染中具有免疫协同作用。
- 王伟吴宏荣李娟王晶孙小慧王维新
- 关键词：肾综合征出血热纯化疫苗糖蛋白免疫保护
- 肾综合征出血热双价纯化疫苗的研制被引量：4
- 2005年
- 目的: 研制肾综合征出血热双价纯化疫苗。方法:肾综合征出血热病毒I型LR1 株和II型R22株分别在Vero细胞上接种培养。I、II型病毒培养液依次经β 丙内酯灭活、超滤浓缩、蔗糖区带离心纯化及层析脱糖等处理。将检定合格的I、II型单价病毒原液等量混合后, 用AI(OH)3 佐剂吸附,制备 3批双价纯化疫苗。结果: 该 3批疫苗已经自检和中国药品生物制品检定所复检合格, 并已进行临床试验。结论: 采用Vero细胞培养制备肾综合征出血热双价纯化疫苗方法可行。
- 杨世龙董关木李娟安祺孙晓东孙小慧李萍
- 关键词：肾综合征出血热双价疫苗VERO细胞
- 汉滩病毒囊膜蛋白及核壳蛋白与免疫保护力的关系
- 2001年
- 目的为了阐明汉滩病毒囊膜蛋白及核壳蛋白与免疫保护力的关系。方法采用区带离心及柱层析纯化汉滩病毒LR1株囊膜蛋白GP和核壳蛋白NP,以GP、NP和GP+NP分别免疫家兔,测定其中和抗体和保护力。结果实验显示,GP和GP+NP免疫组家兔血清中和抗体滴度≥110,NP免疫组家兔血清中和抗体≤15;而保护性试验显示,GP、NP、GP+NP免疫组家兔均可保护100ID50同株病毒的攻击。结论上述结果表明,汉滩病毒GP和NP组份均与其保护力有关。
- 杨世龙孙小慧王成宝王伟王春荣叶琛
- 关键词：汉滩病毒囊膜蛋白核衣壳蛋白保护力
- 双抗体夹心ELISA法检测肾综合征出血热汉滩病毒糖膜蛋白
- 2001年
- 用双抗体夹心ELISA法检测肾综合征出血热 (HFRS)汉滩病毒LR1株糖膜蛋白 (GP) ,并用SDS PAGE电泳对ELISA检测结果进行验证 ,实验结果显示 ,双抗体夹心ELISA法特异性强 ,重复性好 ,简便易行 ,是HTN病毒糖膜蛋白较为理想的检测方法 。
- 孙小慧杨世龙马燕华叶琛王维新
- 关键词：双抗体夹心ELISA法汉滩病毒肾综合征出血热
