公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

抗人卵巢癌单链抗体基因的构建被引量：4: 1998年; 目的构建抗人卵巢癌单抗ＣＯＣ１８３－Ｂ２单链抗体（ｓｃＦｖ）基因。方法将通过ＰＣＲ方法体外扩增并经测序验证的重链、轻链可变区（ＶＨ、ＶＬ）基因先后重组入原核表达质粒ｐＴＨＡ９０相应的位点上，中间通过一连接肽（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３基因连接构建成单链抗体基因（ｓｃＦｖ），连接产物转化相应受体菌ＴＯＰ１０，提取质粒，酶切鉴定重组克隆。表达产物经ＥＬＩＳＡ方法测定活性。结果重组克隆经酶切鉴定可见预期大小的片段，表明重组成功。表达产物经ＥＬＩＳＡ检测证实具有与卵巢癌抗原结合的能力。结论本研究成功地构建了ｓｃＦｖ基因。; 周萍冯捷钱和年蒋欣蒋欣叶雪付天云黄华梁; 关键词：卵巢肿瘤单链抗体基因表达

抗人卵巢癌单域噬菌体抗体的表达被引量：4: 1998年; 目的：制备抗人卵巢癌单克隆抗体ＣＯＣ１８３Ｂ２单域（重链可变区，ＶＨ）抗体，以用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗。方法：将已分离的ＶＨ基因克隆入噬菌粒表达载体ｐＦＵＷ８０中，将重组子转化琥珀突变抑制菌株ＸＬ１ＢＬｕｅ，经辅助噬菌体Ｍ１３Ｋ０７援救后包装成噬菌体颗粒，表达产物通过ＥＬＩＳＡ测定活性。结果：ＶＨ基因克隆入噬菌粒ｐＦＵＷ８０，双酶切鉴定见预期大小片段，表明克隆成功。表达产物经ＥＬＩＳＡ测定，待测值高出阴性对照２．５倍。结论：该抗人卵巢癌小分子单域抗体具有与相应卵巢癌抗原发生特异结合的能力，有望用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗。; 周萍冯捷黄华梁钱和年蒋欣蒋欣付天云; 关键词：卵巢肿瘤药物疗法噬菌体单克隆抗体

抗人卵巢癌抗体可变区cDNA的克隆与ScFv的构建和表达及放射免疫显像被引量：4: 2001年; 目的 :为研究小分子抗体作为导向载体的作用 ,制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183B2 的单链抗体 (sin glechainFv ,ScFv) ,并进行放射免疫显像 (radioimmunoimaging ,RII)。方法 :利用PCR技术从COC183B2 杂交瘤细胞中扩增COC183B2 重链可变区基因 (VH)和轻链可变区基因 (VL) ,并将其克隆入高效表达载体 pTHA90中。重组子转化大肠杆菌TOP10 ,IPTG诱导表达ScFv融合蛋白 ,经改进氯化亚锡法进行99mTc标记 ,在卵巢癌裸鼠皮下瘤模型上进行RII。结果 :(1)ScFv融合蛋白以包涵体形式获高效表达 ;(2 )改进氯化亚锡法成功进行小分子抗体ScFv99mTc的标记 ,标记率达 98% ;(3)应用99mTc标记ScFv融合蛋白进行RII,肿瘤显像早 ,图像清晰。结论 :应用单链抗体ScFv可改善RII。; 刘广芝冯捷周萍黄华梁钱和年成夜霞付天云叶雪; 关键词：卵巢肿瘤放射性核素成像 CDNA

抗卵巢癌单链免疫毒素的载体构建及高效表达被引量：1: 2000年; 目的 :构建抗卵巢癌单链抗体 183B2 ScFv与假单孢外毒素 (peudononasexotoxin ,PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白 183B2 ScFvPE38,为卵巢癌导向治疗打下基础。方法 :采用基因工程技术 ,经过 3次亚克隆 ,将编码单链抗体的基因及编码毒素的基因亚克隆至原核表达载体pET30a(+ )上 ,并在IPTG的诱导下进行表达。采用直接ELISA及细胞杀伤对抗体及毒素部分的活性进行检查。结果 :表达蛋白183B2 ScFvPE38具有较好的抗体活性及毒素活性。结论 :抗卵巢癌单链免疫毒素 183B2 ScFvPE38具有良好的免疫学活性及生物学活性。; 尤芳蕾冯捷成夜霞钱和年周萍叶雪; 关键词：药物载体卵巢肿瘤生物疗法单链免疫毒素

抗人卵巢癌单克隆抗体COC183-B_2重链可变区基因的体外扩增、克隆及序列分析被引量：6: 1998年; 目的：分离抗人卵巢癌单克隆抗体ＣＯＣ１８３Ｂ２重链可变区（ＶＨ）基因并测定其序列。方法：用反转录ＰＣＲ扩增抗人卵巢癌单抗ＣＯＣ１８３Ｂ２ＶＨ基因，将其克隆入ＰＵＣ１９载体，重组子用Ｓａｎｇｅｒ’ｓ双脱氧链终止法测定序列，将序列与ＧｅｎｅＢａｎｋ及已发表的抗体序列比较。结果：ＶＨ基因全长３５４ｂｐ，属鼠免疫球蛋白重链混杂亚类（ｓｕｂｇｒｏｕｐｍｉｓｃｅｌａｎｅｏｕｓ），由种系基因的ＶＨ，Ｄｓｐ２．５及ＭＵＳＪＨ４重排而来。该ＶＨ基因序列已被ＧｅｎｅＢａｎｋ收录（ａｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏＡＦ０４５０２３）。结论：该ＶＨ基因为抗人卵巢癌单抗ＣＯＣ１８３Ｂ２功能性重链可变区基因。; 周萍冯捷蒋欣黄华梁; 关键词：单克隆抗体基因扩增

抗人卵巢癌单克隆抗体COC183-B_2轻链可变区基因的体外扩增、克隆及序列分析被引量：2: 1998年; 目的分离抗人卵巢癌单克隆抗体ＣＯＣ１８３－Ｂ２轻链可变区（ＶＬ）基因并测定其核苷酸序列。方法用ＰＣＲ方法体外扩增单抗ＣＯＣ１８３－Ｂ２ＶＬ基因，将其克隆入ＰＵＣ１９载体，重组子用Ｓａｎｇｅｒ’ｓ双脱氧链终止法测定其核苷酸序列，将其序列通过Ｉｎｔｅｒｎｅｔ与ＧｅｎｅＢａｎｋ、ＥＭＢＬ、ＤＤＢＪ和ＰＤＢ已发表的抗体序列进行比较分析。结果ＶＬ基因全长３３６ｂｐ，属小鼠免疫球蛋白轻链第Ⅱ亚类（ＳｕｂｇｒｏｕｐⅡ），由种系基因的ＶＫ及Ｊ基因的ＭＵＳＪＫ２重排而成。该ＶＬ基因序列已被ＧｅｎｅＢａｎｋ收录（ａｃｅｓｉｏｎＮｏ．ｇｂＡＦ０４４０７７）。结论该ＶＬ基因为抗人卵巢癌单抗ＣＯＣ１８３－Ｂ２功能性轻链可变区基因。; 周萍冯捷钱和年钱和年黄华梁; 关键词：单克隆抗体轻链可变区

抗人卵巢癌单域抗体V_H 基因的克隆、表达及放射免疫显像被引量：4: 2001年; 为研究小分子抗体作为导向载体的作用 ,制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC1 83B2 单域抗体(重链可变区 ,VH) ,并进行放射免疫显像 (RII) .利用PCR技术从COC1 83B2 杂交瘤细胞中扩增COC1 83B2 的VH 基因片段 ,并将其克隆入高效表达载体pTHA90中 .重组子转化大肠杆菌TOP10 ,IPTG诱导表达VH 融合蛋白 ,经改进氯化亚锡法进行锝 ( 99mTc)的标记 ,在卵巢癌裸鼠皮下瘤模型上进行RII.结果表明 :( 1 )VH 融合蛋白以包涵体形式获高效表达 ;( 2 )改进氯化亚锡法成功进行VH 融合蛋白99mTc的标记 ,标记率达 96%以上 ;( 3)用99mTc标记VH 融合蛋白进行RII,肿瘤显像早 ,图像清晰 .说明99mTc可用于小分子抗体标记 ,应用单域抗体VH; 刘广芝冯捷周萍黄华梁钱和年傅天云叶雪; 关键词：卵巢癌重链可变区同位素标记放射免疫显像免疫导向单域抗体

全选清除导出

共1页<1>

周萍