周艳琳
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：汕头大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 流感病毒感染诱导成年小鼠神经炎症及其对情绪和学习记忆的影响
- 研究目的与意义： 流感病毒感染可引起人呼吸系统疾病，亦可感染中枢神经系统（CNS），造成以功能障碍或组织损伤为特点的多种类型的流感相关脑病综合征，表现类型多样，包括意识丧失、学习认知下降、行动行为改变、情绪障碍、以及免...
- 周艳琳
- 关键词：流感病毒神经炎症学习记忆情绪状态
- HeLa细胞中Zwint-1选择剪接亚型v7的表达鉴定
- 2014年
- 目的:验证在HeLa细胞系中是否存在Zwint-1 v7选择性剪切亚型的mRNA和蛋白产物。方法:在缺失片段两侧设计引物,利用PCR和克隆测序验证HeLa细胞中是否存在缺失片段的mRNA;构建Zwint-1 v7 3′端特异区段(Z7)的GST融合表达载体pGEXKG-GST-Z7,转化入BL21菌种诱导表达,菌体经超声破碎和2 mol/L尿素洗涤纯化,融合蛋白经SDS-PAGE电泳并切胶回收后作为抗原与佐剂混合乳化并免疫C57BL/6小鼠,收获多克隆抗血清Anti-Z7,采用Dot b lot检测多克隆抗体的效价,Western blot检测HeLa细胞全蛋白中的Z7蛋白产物。结果:PCR和测序结果表明存在缺失37 bp的核酸片段;SDS-PAGE电泳显示在30.7 kDa处出现明显的蛋白条带;Dot blot结果表明1∶5 000稀释的多克隆抗体能检出12 ng GST-Z7;Western blot结果表明,1∶200稀释的多克隆抗体可识别HeLa细胞中Zwint-1 v7蛋白。结论:本研究在核酸水平和蛋白水平初步验证了HeLa细胞中存在Zwint-1 v7。
- 苏景华李蕊刘俊周艳琳陈小璇代剑平王革非李康生
- 关键词：HELA细胞原核表达多克隆抗体制备
- APOBEC-3F和APOBEC-3G与乙肝核心抗原的相互作用研究
- 2015年
- 目的:人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽APOBEC-3F(A3F)和APOBEC-3G(A3G)可抑制HBV复制,并参与HBV基因组的超突变,其中HBc Ag被认为是潜在作用位点,为此本文研究A3F和A3G与HBcAg可能存在的蛋白相互作用方式。方法:RT-PCR克隆人A3F和A3G的cDNA,并构建相应酵母双杂交表达载体pGADT7-A3F/-A3G;PCR克隆HBV ayw亚型HBcAg基因,构建其酵母双杂交表达载体p GBKT7-HBc Ag。p GBKT7-HBc Ag分别与p GADT7-3G和p GADT7-3F共转化AH109酵母菌,利用营养二缺平板及四缺平板培养及α-半乳糖苷酶活性测试,检测HBc Ag与A3F和A3G的直接作用情况。构建含有HBcAg、人A3F和A3G基因的多种标签融合真核表达质粒,脂质体法转染HeLa细胞后进行免疫共沉淀实验(Co-IP),并通过Western blot检测免疫共沉淀产物确定HBcAg与A3F和A3G之间是否存在间接相互作用。结果:酶切及DNA测序分析表明成功克隆HBcAg、人A3F和A3G,并成功构建酵母双杂交、真核表达及亚细胞定位相关的表达质粒。通过酵母双杂交实验对α-半乳糖苷酶定性和定量检测显示,A3F和A3G与HBcAg无显著的直接相互作用。Western blot及Co-IP实验结果表明A3F和A3G与HBcAg均存在相互作用。结论:A3F和A3G蛋白与HBcAg蛋白之间确实存在相互作用,推测这种作用不是通过两个蛋白直接结合实现的。
- 王革非曾祥兴李蕊苏景华刘俊周艳琳李康生
- 关键词：乙肝核心抗原酵母双杂交免疫共沉淀
- 外周感染流感病毒WSN33对小鼠自发行为的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:研究外周感染流感病毒H1N1 WSN33后,小鼠在旷场自发行为中的变化规律,探讨外周感染流感病毒对小鼠情绪的影响。方法:通过滴鼻感染H1N1 WSN33或生理盐水,记录BALB/c小鼠两周内的体重变化,以及在旷场行为箱体内5 min的行走总路程、平均运动速度、中央区域运动路程及粪便排泄情况等。结果:外周感染H1N1 WSN33引起小鼠体重急速下降,从第8天开始逐渐恢复。旷场试验中WSN33感染组小鼠行走总路程减少,在感染后的5到10 d总路程减少量差异性比较显著;平均运动速度无统计学差异性;粪便粒数波动较大,无统计学差异。结论:外周感染流感病毒H1N1 WSN33后,BALB/c小鼠自发活动量减少,活动速度基本不变,启示流感病毒感染过程中伴随一定程度的抑郁、焦虑、紧张等情绪,在流感病毒感染的急性期和恢复初期表现比较明显,而紧张情绪表现不太显著。
- 周艳琳李蕊谷李铭刘俊陈燕霞李康生王革非
- 关键词：小鼠旷场试验
