周良强 作品数:51 被引量:94 H指数:5 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 机械工程 更多>>
毛细胞PMCA2在小鼠内耳Ca^(2+)调节和听觉平衡中的作用 被引量:1 2007年 目的:研究小鼠内耳毛细胞细胞膜Ca2+-ATP酶2型蛋白(PMCA2)在听觉平衡生理中的作用及意义。方法:利用不同基因型小鼠PMCA2-/-(突变纯合子)、PMCA2+/-(杂合子)和PMCA2+/+(野生型)为实验对象,采用听觉脑干反应(ABR)、畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗内电位(EP)检测等方法,分别检测不同基因型小鼠的内耳生理功能。结果:PMCA2+/+野生型鼠的听力正常,ABR的短声(click)阈值为(13.75±11.08)dB SPL;EP均值为(91.3±11.0)mV。PMCA2+/-杂合子小鼠听力低于同窝PMCA2+/+野生型鼠,ABR的短声阈值为(63.89±12.90)dB SPL,与PMCA2+/+小鼠比较差异显著(P<0.01);PMCA2+/-小鼠没有检测出DPOAE的高频区辐值,其EP均值为(80.7±9.0)mV。PMCA2-/-小鼠的ABR在100dB SPL无反应,表现出全聋和平衡功能失调,其EP均值为(56.6±13.0)mV;PMCA2-/-小鼠没有检测出DPOAEs。结论:PMCA2是内耳毛细胞纤毛丛上的重要Ca2+转运通道,对维持内耳的Ca2+代谢和听觉平衡功能有重要作用。 褚汉启 周小琴 周良强 黄孝文 甄宏韬 黄红彦 崔永华关键词:迷路 钙通道 毛细胞 耳硬化症患者激光镫骨底板开窗术的短期疗效分析 被引量:1 2020年 目的:评估耳硬化症患者行激光镫骨底板开窗术后的短期疗效。方法:回顾性分析21例(21耳)行激光镫骨底板开窗术的耳硬化症患者的临床资料。比较术前和术后3个月纯音测听0.5、1、2、4 kHz频率的气导(AC)、骨导(BC)阈值和气骨导差(ABG)平均值,并统计手术并发症的发生情况。结果:21耳术前和术后AC阈值分别为(58.2±12.7)dB HL和(43.0±23.1)dB HL,术后AC阈值降低15.2 dB HL(P<0.01);0.5、1、2、4 kHz各频率术后AC阈值较术前均显著降低。术前术后BC阈值分别为(31.4±10.3)dB HL和(33.3±16.6)dB HL,差异无统计学意义;各频率的手术前后BC阈值差异亦无统计学意义。3耳(14.3%)术后BC阈值减低>10 dB HL,出现过度闭合。手术前后ABG平均值分别为(27.0±9.1)dB HL和(9.6±9.9)dB HL,术后ABG缩小17.4 dB HL(P<0.01);各频率ABG平均值均显著缩小。14耳(66.7%)术后ABG≤10 dB HL,18耳(85.7%)术后ABG≤20 dB HL。术后2耳(9.5%)出现感音神经性听力损失;15耳(71.4%)耳鸣和3耳(14.3%)眩晕均于术后第3天缓解。结论:激光辅助下镫骨底板开窗术治疗耳硬化症安全有效,虽然术后骨导阈值稍有提高,但不影响总体听觉康复效果。 谢立 刘爱国 Shenoy Imrit T 彭利艳 周良强关键词:耳硬化症 激光 耳蜗血管纹钾钠氯化合物协同转运子对年龄相关性听力下降的影响 被引量:2 2007年 目的 观察具有年龄相关性听力下降(age-related hearing loss,AHL)特点的不同周龄C57BL/6J鼠和钾钠氯化合物协同联合转运子-1(Na-K-2Cl cotransporter-1,NKCC1)基因敲除鼠年龄相关性听力改变与耳蜗血管纹NKCC1表达的情况,并检测不同龄的NKCC1^+/-杂合子小鼠耳蜗NKCC1蛋白表达及耳蜗扫描电镜形态变化,研究血管纹NKCC1在老年性聋发病中的作用。方法 应用听性脑于反应(ABR)分别检测4、8、16、32、48、60周龄组C57BL/6J小鼠和两种基因型NKCC1小鼠的听力,采用免疫组化法观察其血管纹NKCC1表达的变化,同时采用免疫印迹杂交(Western Blot)检测不同周龄小鼠耳蜗的NKCC1蛋白的含量,扫描电镜观察不同周龄小鼠的耳蜗基底膜结构。结果 C57BL/6J小鼠随鼠龄增加而出现听力下降,自16周龄时ABR阈值出现显著性增高(P〈0.05);血管纹NKCC1蛋白表达也呈现随鼠龄增加而逐步减低,其灰度值自16周龄时显著增高(P〈0.01)。NKCC1^+/-杂合子鼠的听力随鼠龄增长而逐渐下降,老龄小鼠的ABR阈值与其低龄时相比,阈值显著性升高(P〈0.05)。老龄小鼠的耳蜗NKCC1蛋白含量低于低龄小鼠,老龄NKCC1^+/-小鼠的耳蜗底回外毛细胞(OHC)出现散在性点状缺失。结论 AHL小鼠血管纹NKCC1蛋白表达随年龄增长而减少,显示与AHL相关,老年性聋的发病可能与血管纹NKCC1通道蛋白的遗传特性及功能有关。 褚汉启 熊浩 崔永华 黄孝文 韩方 吴振恭 周良强 孔维佳关键词:耳蜗 老年性聋 磁力底座手术拉钩 本实用新型公开了一种磁力底座手术拉钩,包括底座主体,底座主体的底部凹槽中嵌置有永磁铁,底座主体的顶部螺孔中配置有螺杆,螺杆上设置有高度可调节的一对紧固螺母,一对紧固螺母之间夹持固定有手术拉钩。使用时,其底座主体能稳定吸附... 周良强 李宁燕 王冀 陈金 余洋 褚汉启 崔永华文献传递 PMCA1-4及其A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织中的表达 2024年 目的研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总RNA。通过免疫荧光方法检测PMCA1-4在成年大鼠内耳前庭组织的表达部位,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PMCA1-4的A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织的表达类型。结果球囊和椭圆囊荧光染色切片中,于毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA1表达,毛细胞纤毛中可见PMCA2强表达,毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA3弱表达,PMCA4几乎不表达。4种PMCA亚型在球囊表达的剪接体分别为PMCA1x/b、PMCA2w/b、PMCA3z/(a,b)和PMCA4x/b,它们在椭圆囊的表达类型与球囊相同。结论PMCA1-4在成年大鼠前庭器官的表达部位存在差异,这4种PMCA亚型的剪接体类型也各不相同。这种差异性可能是为了满足前庭组织和亚细胞结构域对Ca2+调节的特殊需求。 罗蜜 褚汉启 陶雁玲 周良强 陈金 刘云 杜智会 陈请国关键词:椭圆囊 前庭毛细胞 剪接变异体 质膜钙ATP酶异构体1~3在新生大鼠耳蜗基底膜的表达 2016年 目的通过Western blot方法检测质膜钙ATP酶异构体1~3(plasma membrane Ca2+-ATPase isoforms 1~3,PMCA1~3)在新生大鼠耳蜗基底膜(basilar membrane,BM)的表达,并检测PMCA2在单个新生大鼠耳蜗毛细胞纤毛的表达量。方法 1取出生后2天(P2)和8天(P8)健康SD大鼠各4只,断头后分离出BM,提取总蛋白,分别取20μg,通过Western blot法检测BM的PMCA1~3表达。2取P2和P8大鼠BM总蛋白3μg,通过Western blot方法检测BM的PMCA2的表达。3取4只P8大鼠,分离出BM,提取总蛋白,分别取5、10、20μg总蛋白并取100、400和800ng牛血清白蛋白(BSA)作为对照组,跑完电泳后将胶分为2部分,部分泳道用于SYPRO染胶,其余泳道用于Western blot检测PMCA2的表达。结果 1在20μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,PMCA1仅有微弱的表达(分别为0.126±0.024、0.131±0.012),PMCA2表达水平较高(分别为4.16±0.528、4.25±0.319),PMCA3几乎没有表达(均为0),三者间差异有统计学意义(P〈0.05)。2在3μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,P8大鼠PMCA2的表达水平(4.571±0.336)高于P2大鼠(3.622±0.285),差异有统计学意义(P〈0.05)。3PMCA2在单个P8大鼠BM的含量约为2.5ng。结论 PMCA1~3在新生大鼠耳蜗BM的表达水平不同,PMCA2表达量最大,这可能是由于耳蜗毛细胞对这几种PMCA亚型有不同的Ca2+调节需求。 陈请国 褚汉启 周良强 陈金 刘云 罗蜜 陶雁玲关键词:基底膜 耳蜗 激光共聚焦显微镜和免疫组化染色对比观察KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹的表达 2014年 目的:采用激光共聚焦显微镜(LSCM)技术和免疫组化染色检测KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹中的表达分布特征。方法:以KCNQ1-/-突变纯合子基因型小鼠和CBA/CaJ小鼠为实验对象,采用免疫组化染色、LSCM结合免疫学标记方法对比观察血管纹KCNQ1蛋白表达情况。结果:免疫组化染色显示CBA/CaJ小鼠血管纹边缘细胞顶膜KCNQ1蛋白高表达,呈棕褐色;LSCM观察显示免疫单标KCNQ1绿色荧光蛋白分布于CBA/CaJ小鼠血管纹边缘细胞细胞核,KCNQ1-/-小鼠边缘细胞均未见阳性反应。结论:LSCM技术能准确显示KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹中表达及细胞定位。 吴振恭 褚汉启 熊俊 陈金川 刘云 陈金 周良强 熊浩关键词:KCNQ1 基因敲除小鼠 边缘细胞 激光共聚焦显微镜 质膜钙ATP酶异构体1~4的剪接体在新生大鼠前庭器官的表达 被引量:2 2016年 目的研究质膜钙ATP酶异构体(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase isoforms,PMCAs)1~4(PMCA1~4)的A端和C端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康SD大鼠10只,断头后分离出前庭器官(椭圆囊斑和球囊斑),提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测PMCA1~4的A端和C端剪接变异体的表达。结果在新生大鼠的椭圆囊斑和球囊斑PMCA1~4表达的剪接体分别为PMCA1x/b,PMCA2w/(a、b),PMCA3z/(a、b、c)和PMCA4(x、z)/b。结论在新生大鼠前庭器官,PMCA1、PMCA2、PMCA3和PMCA4之间表达的A端和C端剪接变异体类型均不同,这可能是由于椭圆囊斑和球囊斑对这些PMCA亚型有着不同的Ca2+调节需求。 罗蜜 褚汉启 陶雁玲 周良强 陈金 刘云 潘春晨 陈请国关键词:剪接体 鼓室注射灌洗套管针 本实用新型公开鼓室注射灌洗套管针,包括针头和接头,所述针头的外侧安装有防护组件,所述防护组件包括套管和卡塞,所述套管的内侧安装有支撑组件,所述支撑组件包括支环和挡环,所述针头和套管上安装有限位组件,所述限位组件包括挡板和... 彭利艳 周良强 国敬轩 刘磊大鼠嗅球嗅鞘细胞的改良培养及耳蜗内植入的初步研究 被引量:1 2010年 目的建立并改良大鼠嗅球嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的取材、纯化、培养、鉴定及示踪方法,并初步探讨OECs耳蜗内植入的可行性。方法采用改良法分离新生3 d的SD大鼠嗅球OECs,用差速贴壁加抗有丝分裂法行纯化培养,观察培养细胞的形态特点及生长情况,利用低亲和力神经生长因子受体NGFRp75行免疫组化鉴定并评估细胞纯度。将纯化培养7 d后的OECs与5-溴-2′-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-′deoxyuridine,BrdU)共同孵育48 h,以免疫荧光法观察OECs的增殖活性;同法标记供移植用的OECs。在成年大鼠耳蜗底周钻微孔,注入OECs悬液,24 h后作耳蜗冰冻切片行免疫荧光染色,观察移植的OECs在蜗内存活与分布情况。结果用改良技术体外培养的OECs增殖速度快,于第9天细胞数量最多,且逐渐表现出典型的形态学特征;绝大部分培养的OECs NGFRp75免疫组化呈阳性反应,细胞纯度最高达85%。OECs与BrdU共同孵育48 h后,约90%的培养细胞免疫荧光呈阳性反应。初步建立了内耳OECs移植方法;经耳蜗底周注入OECs后24 h,BrdU阳性细胞主要分布于耳蜗的外淋巴腔,部分细胞附着于鼓阶外侧壁。结论采用改良的嗅球OECs分离培养法可以获得高纯度、增殖活性良好的OECs;OECs耳蜗内植入后短期内可存活,初步提示耳蜗内OECs移植基本可行,值得进一步研究。 张玉峰 黄孝文 褚汉启 陈金 周良强 华小阳 崔永华 张平关键词:嗅鞘细胞 细胞移植 耳蜗