周军智
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：芜湖市科技计划重点项目安徽省自然科学基金安徽省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 基于PTS缺陷型大肠杆菌构建莽草酸生产菌被引量：6
- 2011年
- 对大肠杆菌芳香族氨基酸合成途径进行代谢流改造,以实现高效的生物制备莽草酸。以磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(PTS系统)敲除菌DH5α△ptsHIcrr(DHP)为基础,特异性敲除aroL、ydiB基因并转入受阿拉伯糖诱导表达的T7-RNA聚合酶基因,最终构建一系列产莽草酸宿主菌。再将aroE、aroB、tktA、glk、aroFfbr组成的系列基因串联起来置于质粒上,在T7启动子控制下表达,经摇瓶培养检测得知,不同重组菌产莽草酸能力与对照相比均有明显提高,其中DHPYA-T7/pAOC-TGEFB菌株产量最高,可达到392 mg/L。为进一步构建高表达莽草酸工程菌奠定基础。
- 邹永康周军智孙旭蔡亚非戴红梅李树龙周长林方宏清
- 关键词：莽草酸
- 体细胞Caspase-3信号通路及DNA甲基化调控卵泡闭锁的分子机制
- 2010年
- 为了揭示caspase-3等细胞凋亡相关基因及DNA甲基化水平在小鼠卵泡闭锁中的作用,小鼠经注射10 IU hCG后,在0、12、24、48、72和96 h解剖取出卵巢,用HE染色、DNA电泳、免疫组化、RT-PCR技术、甲基化酶切等试验方法,研究在卵泡发育及闭锁过程中caspase-3等凋亡相关基因的表达及DNA甲基化水平的变化。结果表明:bax、caspase-3的表达量在48 h以前持续减少,在48 h达到最低值,在72 h显著增多(P<0.05),且在卵腔液中大量表达;甲基化水平在48 h以前持续减少,在48 h达到最低值,在72 h显著增多(P<0.05);卵泡凋亡程度在48 h之前也持续减少,在72 h显著增多(P<0.05)。bcl-2的表达量在48 h之前持续增加,在72 h显著减少(P<0.05)。提示:卵泡的发育和闭锁可能受体细胞Caspase信号通路调控,并通过卵腔液发挥作用决定其存亡;另外,甲基化水平的改变可能与卵泡的闭锁直接相关。
- 刘楠乔蔡亚非许家玉周军智杨帆范睿
- 关键词：体细胞CASPASE-3甲基化
- 大肠杆菌ptsHIcrr操纵子的快速敲除及敲除菌生长性能测定被引量：5
- 2010年
- 敲除大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(简称PTS系统)ptsHIcrr操纵子,考察敲除菌株生长特性并将其与ptsG敲除菌进行比较。利用I-SceⅠ特异性切割和Red同源重组方法成功构建了大肠杆菌DH5α△ptsHIcrr敲除菌。在LB培养基中,DH5α△ptsHIcrr的生长行为与DH5α和DH5α△ptsG明显不同,其最高菌密度是DH5α和DH5α△ptsG的近2倍,而DH5α△ptsG生长行为与DH5α无明显差异。但在含1%葡萄糖的LB中,DH5α△ptsHIcrr和DH5α△ptsG均表现出生长优势,最高菌密度依次是DH5α的2.8和2倍;培养液中最终乙酸含量分别是DH5α的12.2%、47%。在M9修饰培养基中,DH5α△ptsHIcrr比生长速率(1/h)和比葡萄糖消耗速率[g/(g.h)]明显低于DH5α,并略低于DH5α△ptsG。结果说明,ptsHIcrr操纵子敲除菌改变了葡萄糖的代谢速率,并呈现与ptsG基因敲除菌不同的代谢特点。
- 周军智邹永康戴红梅李树龙蔡亚非方宏清
- 关键词：RED同源重组大肠杆菌
- 大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸—糖磷酸转移酶系统（PTS系统）分子改造及敲除菌性能测定
- 磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(简称PTS系统)在葡萄糖磷酸化和转运过程中起重要作用,利用I-SceⅠ介导的Red同源重组技术敲除大肠杆菌ptsG基因和ptsHIcrr操纵子,考察缺陷株生长性能及其可能的应用。通过重...
- 周军智
- 关键词：RED同源重组大肠杆菌
- 文献传递
- 膜融合机制研究进展
- 2009年
- 膜的融合是一个基本的生命过程,在生物的生长发育中有着重要作用。通过融合,两套独立的双层脂分子合二为一,完成一定的生物功能。膜融合分子机制的关键在于其主要成分:融合蛋白。Ι、Ⅱ类病毒融合蛋白形成"发夹",胞内囊泡与目标膜各提供的融合蛋白形成"类亮氨酸拉链",这些结构将独立的膜拉近,继而促使膜合为一体。细胞与细胞间融合蛋白的作用机制目前还未明确,在各种膜融合中,脂双层的变化可能是类似的,但介导融合的分子机制应该是不同的。目前,对于膜融合很多方面的理解还停留在假说阶段。理解了膜融合的过程和分子机制不仅将极大地促进生物学的发展,更重要是将为相关的疾病治疗打下坚实的基础。
- 李建国王小康周军智蔡亚非
- 关键词：膜融合分子机制融合蛋白
- 含PGK启动子慢病毒表达质粒的构建与鉴定被引量：1
- 2009年
- 为了构建一个含有人源PGK1(human phosphoglycerate kinase 1)启动子的慢病毒表达载体pL-PGK-GFP.采用PCR从人组织中扩增PGK1基因的启动子部分,再用酶切-连接的方法将扩增的启动子区片段亚克隆入慢病毒表达质粒pL-EGFP中,再用测序、酶切和瞬时表达的方法进行鉴定.结果是下游的eGFP基因在PGK1启动子驱动下,在293FT细胞中表达绿色荧光蛋白报告基因,这表明成功构建了慢病毒表达质粒pL-PGK-GFP.扩增的537bp PGK1启动子片段具有一定的启动效率,能在HIV来源的慢病毒载体中驱动下游目的基因的表达.
- 周军智邹永康李建国刘楠乔蔡亚非王根林
- 关键词：慢病毒载体基因表达
