吴琛耘 作品数:19 被引量:77 H指数:6 供职机构: 上海交通大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市自然科学基金 国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
检测日本血吸虫感染兔尿中循环抗原的研究 1999年 目的:建立检测尿液中血吸虫循环抗原的方法。方法:从感染家兔尿中提取血吸虫循环抗原,并用所提取的抗原制备和筛选抗该抗原的特异性单克隆抗体。用单抗二抗一步法酶联免疫试验检测感染家兔中的日本血吸虫循环抗原。结果:22只家兔感染前尿液中的循环抗原全部阴性;感染后尿液中循环抗原的阳性率与感染度及感染时间有关。感染25条尾蚴的家兔在感染后3wk未能测到循环抗原,而感染200条尾蚴的家兔在感染3wk和6wk的尿循环抗原阳性率分别为40%和100%。结论:用感染兔尿中提取的循环抗原所制备的单抗作为探针。 薛纯良 娄文娴 吴琛耘 张恩英 谢艳辉关键词:日本血吸虫 血吸虫病 应用斑点金免疫渗滤法诊断日本血吸虫病 被引量:9 1998年 目的:探索一种便捷的血吸虫病诊断方法。方法:在原已建立的ELISA法的基础上,应用3个针对日本血吸虫抗原的不同表位的单克隆抗体标记胶体金,建立检测日本血吸虫病患者血清中血吸虫抗原的斑点金免疫渗滤法。抗原与抗体通过渗滤在硝酸纤维薄膜上进行反应,数分钟用肉眼观察结果。结果:本法检测SEA的敏感度为16ng/ml,在69例慢性日本血吸虫病患者血清的检测中,阳性率为60.8%,特异性为95.2%;同时用dot-ELISA检测137例慢性日本血吸虫病患者,阳性率为54.7%、特异性为94.6%;夹心ELISA检测118例慢性日本血吸虫病患者,阳性率为61.9%、特异性为95.7%。结论:经数理统计G检验证实斑点金免疫渗滤法的敏感性和特异性同ELISA相近,且操作更简便且快速。 张恩英 吴琛耘 沈大康关键词:DOT-ELISA 夹心ELISA 日本血吸虫病 日本血吸虫虫卵SjE16、SjPPIase和SjRobl基因的真核表达及其在诊断中的应用 被引量:2 2013年 目的真核表达日本血吸虫虫卵蛋白,并评价其在血吸虫病免疫学诊断中的作用。方法提取日本血吸虫虫卵RNA,逆转录后获得cDNA。PCR扩增日本血吸虫虫卵特异性或高表达基因SJCHGC01695(SjE16)、SJCHGC00856(SjIMA8)、SJCHGC06249(SjTOR)、SJCHGC06324(SjP40)、SJEFTD02(SjSLP)、SJCHGC06679(SjP-PIase)和SJCHGC06529(SjRobl),亚克隆至真核表达载体pPIC9K。重组质粒电转至毕赤酵母GS115菌株后,甲醇诱导目的蛋白表达。镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化获取重组蛋白后,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)对其进行分析鉴定。以血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)、重组蛋白SjE16、SjPPIase和SjRobl单用,3个重组蛋白两两伍用,及全部伍用作为包被抗原,ELISA法检测血吸虫感染小鼠血清、急性血吸虫病和慢性血吸虫病患者血清中相应抗体的反应性。结果PCR扩增获得7个日本血吸虫虫卵高表达基因,经酵母重组表达和Ni-NTA亲和层析纯化后成功获得3个重组蛋白SjE16、SjPPIase和SjRobl。SDS-PAGE和Western blotting鉴定结果显示,所获得的重组蛋白为目的蛋白。ELISA检测结果显示,血吸虫感染小鼠血清和血吸虫病患者血清中均可检测出被SjE16、SjPPIase和SjRobl识别的特异性IgM和IgG抗体。在急性血吸虫病患者中上述3种抗原IgM的检出率分别为80%、60%和80%,IgG检出率分别为40%、80%和70%。伍用组中,SjE16和SjRobl伍用抗原,检测急性血吸虫病患者血清中IgM抗体的敏感性为100%,高于其单独为抗原的敏感性。结论获得的3个日本血吸虫虫卵蛋白(SjE16、SjPPIase和SjRobl)均具有血吸虫病诊断的潜能,其中SjE16和SjRobl伍用抗原可提高急性血吸虫病诊断敏感性。 陈清 吴琛耘 冯艳 吴健桦 姚馨萦 徐大刚 王兆军关键词:日本血吸虫 真核表达 免疫学诊断 巨噬细胞在血吸虫感染中的作用 被引量:6 2014年 血吸虫在人体中的各阶段均可致病,其在人体内释放的致病因子,可诱发宿主免疫应答,引起一系列的免疫病理变化,是造成宿主损害而导致血吸虫病的重要原因。巨噬细胞作为机体固有免疫的重要组成细胞,与血吸虫病的发生发展密切相关,本文从巨噬细胞的激活和分化,它在血吸虫病引起的免疫病理反应中的作用,及其在血吸虫免疫逃避中的作用3个方面进行了归纳和总结。 房艳 陈清 吴琛耘 王兆军关键词:巨噬细胞 血吸虫 免疫病理 免疫逃避 医学寄生虫学虚拟实验软件的构建与应用探索 被引量:13 2016年 实验教学是医学寄生虫学教学过程中的重要环节。文章针对传统教学的局限性和虚拟实验的发展特点,分析了构建医学寄生虫学虚拟实验软件的必要性,并着重介绍了寄生虫学虚拟实验的结构组成、功能及应用。以问卷形式调查了虚拟实验软件在教学中的应用效果,结果表明,学生对软件的设计及在教学中的应用效果都比较满意。因此合理运用虚拟实验,将虚拟实验与真实实验有机结合的实验模式能更好地促进实验教学开展,提高医学寄生虫学教学效果。 吴健桦 吴琛耘 杨杨 徐大刚 王兆军关键词:医学寄生虫学 虚拟实验 实验教学 教学改革 对一例误诊的钩虫病例进行PBL案例的设计 2013年 该文从一个钩虫病的误诊病例到PBL教学案例的设计,探讨选择基于问题的学习(problem—based learning,PBL)教学案例如何体现科学性与体现探索问题的可行性,并从案例的设计、学习要点和学习小结等诸方面,讨论典型案例如何与教学目的相结合,并在丰富知识内涵、启发学生思维、保证良好实践性及具有一定的拓展性等方面做到尽善尽美。 王兆军 吴健桦 吴琛耘 徐大刚关键词:钩虫病 肝再生磷酸酶-2的最新研究进展 被引量:1 2016年 肝再生磷酸酶-2(phosphatase of regenerating liver-2,PRL-2)是蛋白酪氨酸磷酸酶家族的成员。作为一种蛋白磷酸酶,PRL家族因其成员PRL-3在肿瘤组织中的特异性高表达而备受人们关注。在近几年的研究中,人们逐渐把目光转向了在正常人体各个组织中均高表达的PRL-2分子,现综述了PRL-2的生物学功能及其在肿瘤相关研究中的最新进展。 殷岑楠 吴琛耘 王兆军关键词:生物学功能 肿瘤 抗日本血吸虫保护性免疫若干无损伤性量化指标的研究 1998年 为寻找能无损伤地量化提示抗日本血吸虫疫苗接种后保护作用的测定指标,试从三个方面进行了探索:①通过获取可排除活动性新感染.从而提示免疫保护性存在的高特异、高性能单抗免疫探针,测量宿主体内的循环抗原(CAg)组分,经3农杂交瘤细胞融合、筛选,制备了5株具诊断效能的(IgM)单抗,发现组合应用这些单抗为捕获兼测示抗体,明显优于单个应用.其中IE+11H+12G组合显示了在目前多种组合中最佳检测效能.采用Dot-ELISA及新建立的斑点金免疫渗滤法,在样本数(n)分别为184和104的两组健康人群中,分别显示了94.6%及95.2%的高特异性,而在139例及69例两批慢性血吸虫感染者,该两法也分别达到了可以接受的54.7%和60.8%的阳性检出率,也已获得了1株IgG_3同型单抗,A9.初步测试具有较好诊查效果,正在进一步作出鉴定;②为建立采用优质纯化抗原的标准系列,利于定量值测CAg的灵敏度,我们采用Mono-Q高压液相技术纯化分离了SEAj的活性组分,已初步用为测量CAg组分的定量标准参考系列;③通过方法学的改进,借助于BIO-TECH自动酶标仪,建立了测量与抗力相关的特异性IgE及疾病相关的特异性IgG_4的动态ELISA或经标化的终点列读常规,在243例慢性血吸虫病血样测读基础上,经100例健康人测试,? 张恩英 陆萍 娄文娴 吴琛耘 钱宗立关键词:日本血吸虫 循环抗原 保护性免疫 ELISA 华支睾吸虫致胆管癌发生发展的研究进展 被引量:12 2020年 华支睾吸虫是一种食源性寄生虫,其感染可导致宿主肝胆管病变,甚至诱发胆管癌。本文结合近年来的相关研究,从虫体的毒性作用、宿主的异常免疫反应以及其他病原体共感染等方面对华支睾吸虫导致胆管癌发生发展的致病机制进行阐述。 李潇 王江畅 管磊 顾畦 董纪泽 吴琛耘 严敏 王兆军关键词:华支睾吸虫 胆管癌 免疫因素 细菌的Ⅲ型和Ⅳ型分泌系统 被引量:2 2004年 细菌拥有很多分泌系统,通过这些系统,许多分泌性蛋白和外露蛋白被输送到菌体细胞外,与宿主细胞发生相互作用而发挥其毒性。革兰阴性菌拥有5型蛋白分泌系统,其中Ⅲ型和Ⅳ型分泌系统与细菌的致病性密切相关,正日益受到各方学者的关注。本文对细菌Ⅲ型和Ⅳ型分泌系统的组成、结构和功能等进行概述。 吴琛耘 吴建和 刘晶星关键词:细菌 革兰阴性菌