吕敏
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HSV1gD及HSV2gD两种糖蛋白真核表达载体的构建及表达
- 单纯疱疹病毒(HSV)感染人体发病率高,复发率也高,对人体危害严重,可导致不孕、新生儿死亡.本文已用原核系统表达了HsvgD1及HSVgD2两种蛋白，为了使得到具有更好的生物学活性的HSV1gD及HSV2gD重组蛋白，将...
- 李越希吕敏潘明洁戚菁王正茂潘英
- 关键词：疱疹病毒糖蛋白真核表达基因序列
- 单纯疱疹病毒1型糖蛋白B胞外区基因片段的克隆、表达及初步鉴定被引量：1
- 2008年
- 构建单纯疱疹病毒1型糖蛋白B（HSV1gB）胞外区基因片段的重组原核表达质粒，并获得HSV1gB胞外区基因的表达。选用真核和原核细胞均偏爱的密码子，化学合成含信号肽序列的HSV1gB蛋白胞外区基因序列，用PCR方法扩增编码HSV1gB胞外区1～696aa的基因，利用DNA重组技术将其定向插入到原核表达载体pGEX4T-2上，转化大肠杆菌TG1菌株，经IPTG诱导表达及SDS-PAGE鉴定分析。SDS-PAGE检测显示，表达的HSV1gB／GST融合蛋白分子质量为96ku。利用亲和层析方法，纯化获得了表达的目的蛋白。ELISA结果表明表达产物具有较好的抗原性和特异性。可溶性重组HSV1gB蛋白的表达成功为单纯疱疹病毒亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 吕敏潘明洁杨华凤李越希
- 关键词：单纯疱疹病毒克隆
- HSV1 gB、HSV1 gD、HSV2 gD三种蛋白胞外区抗原性分析及克隆表达、纯化鉴定
- 单纯疱疹病毒/(Herpes simplex virus,HSV/)是危害人类健康的常见病原体,其感染发病率高,且容易导致复发性感染和潜伏感染。HSV有1型/(HSV1/)及2型/(HSV2/)两型,HSV1主要引起口面...
- 吕敏
- 关键词：糖蛋白D纯化
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒C端截短21个氨基酸NS5B蛋白的克隆、表达及鉴定被引量：1
- 2008年
- 构建HCV C端截短21个氨基酸的NS5B(HCV NS5B-C21)的重组原核表达质粒,并获得HCVNS5B-C21蛋白,为以其为靶位的抗HCV药物筛选等创造条件。利用PCR技术扩增HCVNS5B-C21基因,BamHⅠ和XhoⅠ双酶酶切后连接到经同样酶酶切的原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,获得阳性重组质粒pET-28a(+)-NS5B-C21,IPTG诱导表达,亲和层析法纯化目的蛋白表达产物经SDS-PAGE进行鉴定。成功构建了HCV NS5B蛋白表达载体pET-28a(+)-NS5B-C21,经诱导明显表达出6His-NS5B-C21,截短形式的6His-NS5B-C21表达产物的可溶性明显增加。HCV NS5B-C21蛋白在体外得到了有效表达,表达的蛋白主要存在于上清液中,纯化获得了NS5B-C21蛋白,为抗HCV药物筛选等奠定基础。
- 杨华凤潘明洁吕敏李越希
- 关键词：丙型肝炎病毒克隆
- HSV1gD胞外区抗原性分析及表达鉴定
- 单纯疱疹病毒(HSV)是危害人类健康的常见病原体,本文通过计算机分析单纯疙疹病毒1型糖蛋白D(HSV1gD)胞外区的抗原性，筛选出抗原性强的亲水性蛋白片段，选用真核和原核均偏爱的密码子，化学合成基因片段。利用DNA重组技...
- 潘英李越希吕敏潘明洁戚菁王正茂
- 关键词：单纯疱疹病毒抗原性分析基因表达结合蛋白
- 丙型肝炎病毒NS5B全长基因及截短形式基因的克隆、表达及鉴定被引量：5
- 2008年
- 目的构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5B-FL、NS5B-C21和NS5B-C51重组原核表达载体,并进行目的蛋白的表达及鉴定。方法利用PCR技术扩增3种长度的NS5B基因,经BamHI和XhoI双酶切后连接到经同样酶切的原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白,并进行纯化及鉴定。结果所构建的3种重组质粒pET-28a(+)-NS5B-FL、pET-28a(+)-NS5B-C21和pET-28a(+)-NS5B-C51,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经PCR及酶切鉴定,均能扩增或酶切出相应大小的目的基因片段,表达的6His-NS5B-FL融合蛋白主要以包涵体形式存在,而表达的6His-NS5B-C21和6His-NS5B-C51融合蛋白的可溶性明显增加。纯化的6His-NS5B-C21蛋白未发生降解,6His-NS5B-FL和6His-NS5B-C51蛋白发生了部分降解。纯化后的3种蛋白均能与丙肝患者血清发生反应。结论已成功构建了3种NS5B基因的重组表达载体,并获得了目的蛋白表达,为进一步抗HCV药物的筛选奠定基础。
- 杨华凤潘明洁吕敏李越希
- 关键词：丙型肝炎病毒克隆
- 腹腔镜下宫颈癌根治术后感染的危险因素分析被引量：5
- 2020年
- 目的分析宫颈癌患者腹腔镜根治术后发生医院感染的相关因素,为控制其术后感染提供依据。方法抽取2018年1月至2019年1月于南京市妇幼保健院行腹腔镜下宫颈癌根治手术患者214例,调查其术后感染率,分析术后感染病原菌,并采用SPSS 23.0软件对其进行单因素分析和多因素Logistic回归分析。结果 214例患者术后发生感染46例,感染率为21.49%,且盆腔感染和手术部位感染率较高,分别为34.78%(16/46)、32.60%(15/46)。糖尿病、近1个月内行宫颈手术、宫颈癌合并子宫腺肌病、引流管放置时间>7 d、住院天数>15 d、抗菌素药物使用时间>7 d是腹腔镜下宫颈癌根治术的危险因素(P<0.05);住院天数>15 d、近1个月内行宫颈手术、糖尿病为腹腔镜下宫颈癌根治术术后感染的独立危险因素(P<0.05)。根据调查统计分析发现,感染组术后血清C反应蛋白水平[(77.65±51.25)mg/L]高于非感染组[(26.77±18.60)mg/L],P<0.05;感染组术后3 d内血钾、血清白蛋白水平分别为(3.50±0.34)mmol/L、(31.77±3.03)g/L,低于非感染组的(3.70±0.38)mmol/L、(35.03±3.96)g/L(P<0.05)。结论腹腔镜行宫颈癌根治术患者术后感染率较高,引发感染的危险因素较多,住院天数>15 d、近1个月内行宫颈手术、糖尿病是导致患者发生术后感染的独立危险因素,应引起重视。且感染患者术后血清C反应蛋白高,血钾、血清白蛋白低,应尽早对症治疗以预防感染。
- 孙平平吕敏
- 关键词：宫颈癌腹腔镜
- 血压变异性与老年直立性低血压患者左心功能的关系研究被引量：4
- 2019年
- 背景 直立性低血压(OH)及血压变异性(BPV)增大均可导致心、脑、肾等重要靶器官损伤,但目前BPV与OH患者靶器官损伤的具体关系尚不明确。目的 探讨BPV与老年OH患者左心功能的关系。方法 选取2011年10月—2017年10月南京市第一医院门诊收治的老年OH患者94例,根据左心室Tei指数分为左心功能正常者41例(正常组)、左心功能损伤者53例(损伤组)。比较两组患者左心功能指标〔包括左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室质量指数(LVMI)、舒张早期血流峰速度(E)/舒张晚期血流峰速度(A)比值〕、血压〔包括24 h收缩压(24 hSBP)、24 h舒张压(24 hDBP)、白天收缩压(dSBP)、白天舒张压(dDBP)、夜间收缩压(nSBP)及夜间舒张压(nDBP)〕及BPV指标〔包括24 h收缩压标准差(24 hSBPSD)、24 h收缩压变异系数(24 hSBPCV)、24 h舒张压标准差(24 hDBPSD)、24 h舒张压变异系数(24 hDBPCV)〕,BPV指标与老年OH患者左心功能指标的相关性分析采用Pearson相关分析。结果 (1)损伤组患者LVEDV、LVESV大于正常组,LVMI高于正常组,LVEF及E/A比值低于正常组(P<0.05)。(2)两组患者24 hSBP、24 hDBP、dSBP、dDBP、nSBP及nDBP比较,差异无统计学意义(P>0.05);损伤组患者24 hSBPSD、24 hDBPSD、24 hSBPCV及24 hDBPCV大于正常组(P<0.05)。(3)Pearson相关分析结果显示,24 hSBPSD与老年OH患者LVMI和左心室Tei指数呈正相关,与LVEF和E/A比值呈负相关(P<0.05);24 hSBPCV与老年OH患者LVEDV、LVESV、LVMI及左心室Tei指数呈正相关,与LVEF和E/A比值呈负相关(P<0.05)。结论 收缩压变异性增大与老年OH患者左心室舒张和收缩功能不全有关。
- 吕敏
- 关键词：直立性低血压老年人血压变异性左心功能TEI指数
