叶丹凤
- 作品数:9 被引量:59H指数:4
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 健乳灵对乳腺不典型增生大鼠乳腺组织学及血清性激素的影响被引量:1
- 2014年
- 目的:探讨中药健乳灵对DMBA诱导乳腺不典型增生大鼠乳腺组织学及血清性激素的影响。方法:6周龄SPF级雌性SD大鼠32只,随机分为正常组、模型组、健乳灵组、他莫昔芬组,模型组、健乳灵组、他莫昔芬组行DMBA灌胃造模,正常组和模型组给于常规饲料,健乳灵组和他莫昔芬组分别给于健乳灵饲料、他莫昔芬饲料喂养70天。观察各组大鼠乳腺组织学改变,比较各组大鼠血清雌二醇、孕酮、睾酮水平。结果:模型组乳腺组织呈现不典型增生改变,健乳灵组、他莫昔芬组乳腺组织轻度增生;与正常组比较,模型组雌二醇、孕酮水平明显升高,睾酮明显降低,他莫昔芬组雌二醇、孕酮、睾酮水平明显下调;健乳灵组雌二醇、孕酮水平降低,睾酮水平与正常组接近。结论:健乳灵可改善DMBA所致大鼠乳腺不典型增生,其机制与调节大鼠性激素水平紊乱有关。
- 刘华宋兴华韦永芳叶炳飞张杰莫明聪李翊泉陈翠环黄霖黄献中刘显良郑艳华叶丹凤
- 关键词:乳腺增生
- 慢性炎症及氧化应激与PCOS远期患病风险的研究进展被引量:13
- 2013年
- 多囊卵巢综合征(PCOS)是以卵泡发育障碍为主,多病因多症状的内分泌代谢失调性疾病。PCOS患者不仅存在内分泌和生育功能异常,还可能伴随代谢紊乱。胰岛素抵抗(IR)、肥胖及生殖内分泌失调是PCOS的主要临床表现。PCOS被认为是一种慢性炎症,炎症因子可诱发活性氧自由基(ROS)产生过多造成氧化损伤。与机体其他组织细胞相比,胰岛β细胞更易受到氧化损伤,氧化应激(OS)产物的过度表达可直接引起胰岛β细胞DNA损伤,使β细胞数量明显下降,引起胰岛β细胞功能失调和IR。IR及其继发的高胰岛素血症是PCOS病理生理的中心环节。流行病学调查证实,PCOS患者无论是否肥胖,皆可能存在IR,而PCOS患者发生Ⅱ型糖尿病、高血压、冠心病等心血管疾病的风险显著高于正常人群。本文主要从慢性炎症和氧化应激标记物表达的改变,探讨两者与PCOS患者远期发病风险的相关性。
- 郑艳华赖毛华刘华叶丹凤马红霞
- 关键词:多囊卵巢综合征慢性炎症氧化应激
- 养精种玉汤有效部位对卵巢颗粒细胞ERK/c-Fos/CYP17表达的调控
- 目的: 本实验通过体外培养猪卵巢颗粒细胞,采用ERK抑制剂PD98059【1】处理,导致颗粒细胞雄激素增多,并从雄激素生成关键酶CYP17及其调控因子c-Fos与主要信号转导途径(MAPK)来研究养精种玉汤有效成分降低...
- 叶丹凤
- 关键词:养精种玉汤高雄激素血症卵巢颗粒细胞
- 低频电针对多囊卵巢综合征大鼠糖代谢及氧化应激的影响被引量:28
- 2015年
- 目的:观察低频电针对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠糖代谢和氧化应激的影响。方法:雌性SD大鼠随机分成模型组、电针组与对照组,每组10只。采用丙酸睾丸酮注射合并高脂饲料喂养复制PCOS模型。电针组电针"中脘""关元""三阴交"等穴,每次30min,每日1次,治疗5周。ELISA法检测血清睾酮(T)、性激素结合球蛋白(SHBG)、胰岛素(FINS),硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化法检测血清丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并行口服糖耐量试验(OGTT)。计算稳态胰岛素指数(HOMA-IR)及新β细胞指数(MBCI)。HE染色观察卵巢组织结构。结果:治疗后电针组T和MDA含量较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01);电针组SHBG含量和SOD活力在治疗后较模型组明显升高(P<0.05,P<0.01)。治疗后电针组FINS,餐后0.5h、1h、2h血糖及HOMA-IR较模型组明显降低(P<0.01,P<0.05),MBCI显著升高(P<0.01)。模型组呈卵巢等囊性改变,黄体数目减少,卵泡内颗粒细胞层数较对照组增厚;电针组切片可见多个黄体存在,囊性卵泡减少,颗粒细胞层增厚。结论:不改变高脂饲料喂养的条件下行电针治疗,总体上调整了氧化应激状态,高胰岛素血症、胰岛素抵抗及胰岛素β细胞功能、胰岛素敏感性、糖耐量都能得到一定程度的恢复。
- 郑艳华丁涛叶丹凤刘华赖毛华马红霞
- 关键词:电针多囊卵巢综合征氧化应激
- 高浓度雄激素环境对猪卵巢颗粒细胞分泌功能和增殖及分化的影响被引量:5
- 2012年
- 目的研究高浓度雄激素环境对卵巢颗粒细胞(GC)分泌功能和增殖、分化的影响。方法体外培养猪卵巢窦状卵泡GC,先以梯度浓度(500、250、125、62.5、31.25、15.625μmol/L)加入丙酸睾酮,通过CCK-8法检测各组GC相对活力,确定适合继续研究的丙酸睾酮浓度;放射免疫法检测并对比实验组(加入丙酸睾酮)和空白对照组(未加入任何物质)细胞上清液中雌二醇(E2)与孕酮(P)的含量;采用半定量RT-PCR和Western blot分别检测两组的PCNA、FSHR、StAR mRNA与PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2、p-p38、Cyclin D2和CDK4蛋白表达水平。结果实验组E2较对照组显著升高(P<0.001),P则显著降低(P<0.001);GC中PCNA、StAR和FSHR mRNA表达量较对照组均明显下降(P<0.05);同时PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2与p-p38蛋白表达较对照组也明显下降(P<0.05)。结论雄激素对卵泡发育的影响具有双重性,高浓度雄激素抑制GC分泌P的作用可能早于抑制E2的分泌;并影响ERK1/2和p38MAPK信号通路,一方面通过抑制Cyclin D2,使正常的细胞周期调控受阻而抑制细胞增殖,另一方使细胞形态和存活率失调,而负向调控细胞正常分化。
- 郑艳华丁涛叶丹凤王素玲马红霞
- 关键词:雄激素颗粒细胞分泌
- 重组质粒pGMLV-SC1 RNAi的构建及其对猪卵巢颗粒细胞c-Fos的影响被引量:1
- 2014年
- 目的构建慢病毒载体及观察其介导的RNA干扰猪卵巢颗粒细胞c-Fos基因表达情况。方法通过在线软件设计猪c-Fos基因shRNA序列,合成、退火形成双寡链核酸后克隆到PGMLV-SC1载体,测序。用构建的慢病毒表达载体和包装质粒共转染293T细胞,包装成4组病毒(shRNA c-Fos1、shRNA c-Fos2、shRNA c-Fos3、shRNA c-Fos4),并测定滴度。感染猪卵巢颗粒细胞,采用PCR和Western blot检测各组细胞c-Fos mRNA和蛋白表达。结果重组克隆中插入片段序列与设计的Oligo序列完全一致。滴度为1×108TU/mL,感染复数30时,阴性对照组、实验shRNA c-Fos4、shRNA c-Fos3、shRNA c-Fos2、shRNA c-Fos1组c-Fos mRNA的表达分别为对照组的0.842 7±0.065 6、0.797 6±0.073 8、0.694 1±0.048 9、0.653 7±0.047 0、0.312 3±0.010 6倍(P<0.05),c-Fos蛋白的表达下降。结论实验shRNA c-Fos1组c-Fos基因下调最明显,成功构建猪卵巢颗粒细胞c-Fos基因慢病毒RNAi表达载体并筛选出最佳siRNA序列。为c-Fos基因的功能研究提供了研究基础。
- 叶丹凤郑艳华丁涛薛士鹏马红霞
- 关键词:RNA干扰慢病毒
- 中药健乳灵对乳腺不典型增生大鼠CerbB-2表达的影响被引量:4
- 2014年
- 目的:探讨中药健乳灵对DMBA致乳腺不典型增生大鼠模型CerbB-2的影响。方法:6周龄SPF级雌性SD大鼠32只,随机分为正常组、模型组、健乳灵组、他莫昔芬组。对模型组、健乳灵组、他莫昔芬组行DMBA灌胃造模。正常组和模型组给于常规饲料,健乳灵组和他莫昔芬组分别给于健乳灵饲料、他莫昔芬饲料喂养70 d。观察各组大鼠组织学改变,免疫组化法比较各组水CerbB-2表达的差异。结果:HE染色显示模型组呈现出乳腺组织部分不典型增生改变,表明造模成功。健乳灵组、他莫昔芬组治疗后显示乳腺组织一般性增生改变,表明两组药物对该模型有一定的治疗作用。其中健乳灵组显示出较为轻度的增生。CerbB-2表达结果显示他莫昔芬组表达最强,各组按他莫昔芬组、模型组、正常组、健乳灵组的顺序表达逐渐下降,表明健乳灵能下调模型大鼠CerbB-2表达。结论:中药健乳灵能改善模型大鼠的乳腺不典型增生,并下调癌基因CerbB-2的表达,防止不典型增生细胞进一步增殖分化,对防治乳腺癌的发生有积极意义。
- 刘华宋兴华莫明聪韦永芳叶炳飞黄霖郑艳华叶丹凤
- 关键词:中药健乳灵乳腺不典型增生CERBB-2
- 养精种玉汤对高雄激素培养的卵巢颗粒细胞PCNA、StAR、FSHR mRNA与蛋白表达的影响被引量:8
- 2014年
- 目的观察养精种玉汤对高雄激素培养的卵巢颗粒细胞(GC)增殖细胞核抗原(PCNA)、类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)与促卵泡生成素受体(FSHR)mRNA及其蛋白表达的影响。方法以原代培养猪卵巢GC为实验对象。分别将促卵泡生成素(FSH)、养精种玉汤加入受过量丙酸睾酮处理的GC培养体系中。48 h后,利用RT-PCR和Western blot分别检测PCNA、StAR、FSHR mRNA及其蛋白表达量。结果过量雄激素抑制GC的PCNA、StAR、FSHR mRNA及蛋白的表达,养精种玉汤和FSH能逆转雄激素的抑制作用,促进GC PCNA、StAR、FSHR mRNA与蛋白的表达。结论养精种玉汤有拮抗过量雄激素对PCNA、StAR、FSHR mRNA及其蛋白表达的抑制作用,推测养精种玉汤通过促进PCNA、StAR、FSHR mRNA与蛋白的表达以及拮抗过多雄激素的负作用,改善卵泡发育异常。
- 郑艳华丁涛马红霞叶丹凤苏念军吴效科
- 关键词:卵巢颗粒细胞养精种玉汤雄激素
- MAPK信号通路介导养精种玉汤有效部位调节猪卵巢颗粒细胞雄激素水平的作用机制被引量:4
- 2015年
- 目的通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路探讨养精种玉汤正丁醇(ZDC)及乙酸乙酯(YSYZ)提取物降低猪卵巢颗粒细胞雄激素水平的作用机制。方法分离并培养猪卵巢颗粒细胞,将细胞按不同浓度的MAPK抑制剂PD98059孵育,分为0(空白对照)、1、3、10、25μmol/L共5组,培养24 h后,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测17α-羟化酶/C17,20-裂解酶(cytochrome P450c17a,CYP17)mRNA表达水平,应用放射免疫测定法(RIA)检测细胞上清液雄激素(睾酮)含量,筛选最佳的PD98059作用浓度;采用10μmol/L PD98059干预卵巢颗粒细胞24 h后,将细胞培养液更换成含或不含有不同浓度(0、1、5、25、50 mg/m L)的养精种玉汤有效成分提取物ZDC及YSYZ干预不同的时间(3、6、18、24 h)后,采用Western blot法检测各组磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)、c-Fos及CYP17蛋白表达水平,RIA法检测细胞上清液睾酮含量。结果 10μmol/L PD98059可明显降低猪卵巢颗粒细胞p-ERK1/2蛋白表达,增加CYP17 mRNA表达,并可增加细胞上清液睾酮含量(P<0.05)。当养精种玉汤ZDC、YSYZ提取物浓度为25 ng/m L、作用时间为6 h时,可增加猪卵巢颗粒细胞p-ERK1/2、c-Fos蛋白水平并降低CYP17蛋白的表达,降低细胞上清液睾酮含量(P<0.05)。结论养精种玉汤有效成分通过增加MAPK的活性从而降低猪卵巢颗粒细胞的雄激素生成。
- 叶丹凤马红霞吴婉婷赖毛华刘华郑艳华马婉莹
- 关键词:养精种玉汤雄激素丝裂原活化蛋白激酶