刘晓玲
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 超声微泡破裂法联合阳离子脂质体介导基因转染的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨超声微泡破裂法联合阳离子脂质体（cationic liposome，CL）介导绿色荧光蛋白质粒在肝癌细胞（HepG2）基因转染的可行性，并探索最佳转染条件。方法依次采用培养液中是否含有血清和不同的CL浓度、不同超声辐照时间点、不同纳米级脂质微泡造影剂（nano—liposomalbubble，NB）浓度等处理因素进行细胞基因转染。荧光显微镜和流式细胞仪检测基因转染效率，CCK-8法检测细胞活性，以获得优化的转染参数。结果血清能降低CL的细胞毒性，但对基因转染效率无明显影响，CL与质粒DNA质量比4：1时可以达到相对高效低毒的转染效果，转染率（17．71±0．79）%，存活率（91．28±0．76）％。CL联合1h时间点辐照超声可以提高转染率至（24．85±0．78）%（P〈0．01），加入10％的NB可进一步提高转染率至（32．47±4．01）％（P〈0．05）。结论超声微泡破裂法可以有效增强CL介导的基因转染，联合应用为基因治疗提供了新思路。
- 丁璐陈云超刘晓玲刘娜香张青萍
- 关键词：微气泡阳离子脂质体转染
- 超声微泡与阳离子多聚物联合应用促进基因转染的研究进展
- 2012年
- 超声能够促发携核酸分子微泡于靶部位破裂并释放核酸分子,同时声致孔隙效应使得细胞膜通透性增加,促使外源基因进入细胞,实现安全有效的靶向基因转染,但其转染效率较低,转染质粒表达持续时间短暂。阳离子多聚物可通过凝聚带负电荷的核酸形成复合物并结合于细胞膜表面,通过细胞内吞或膜融合作用进入胞内,转染效率相对较高,但具有一定细胞毒性。超声联合微泡与阳离子多聚物结合应用能够进一步促进基因转染,并降低阳离子多聚物的细胞毒性,是一种有前景的非病毒载体联合基因转染技术。
- 刘晓玲陈云超
- 关键词：基因转移技术超声微泡
- 自制脂质体超声纳米微泡的特性和显影效果被引量：7
- 2012年
- 目的测定自制纳米级脂质体超声微泡造影剂（nano—liposomal bubble，NB）的基本特性。方法采用逆向蒸发法制备脂质体，用声震法制备NB后观察其形态，检测其平均粒径、表面电位及浓度等物理特性；在脱气水中分别注入生理盐水、NB及SonoVue（200ul），观察显影效果；分别经兔耳缘静脉团注生理盐水、NB及SonoVue（2．0ml／kg），动态观察兔心脏及肝的增强情况。结果镜下观察，NB粒径范围133．1～199．5nm，平均粒径为（171．60±30．82）nm，平均电位为一（1．92±0．65）mV，分布均匀，浓度为（3．8～5．6）×10^8／ml。常温下造影剂放置1周、1月后观察，基本特性无明显改变。体外显影结果显示：NB与SonoVue一样具有显著的显影效果。体内造影后观察：NB与SonoVue均能明显增强兔心脏及肝的二维灰阶显像。结论NB性质稳定，形态好，粒径均一，具有良好的显影效果。由于其粒径小且基于脂质体基础上易被修饰，因此在超声分子影像及基因／药物传递方面具有广阔的应用前景。
- 刘娜香陈云超刘晓玲丁璐蒋丽萍张青萍
- 关键词：超声检查微气泡脂质体
- 自制阳离子纳米泡介导HepG2细胞基因转染的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的观察自制阳离子纳米泡作为基因转染载体体外转染肝癌细胞系HepG2细胞的可行性。方法将脂质体、聚乙烯亚胺（PEI）和全氟丙烷声振后制得微囊带有PEI的阳离子脂质体纳米泡（PNB），评价其基本特性，用其转染HepG2细胞，并辐照超声，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况，流式细胞仪检测细胞转染率，CCK-8法评估其细胞活性。结果制备的PNB表面带有正电荷，能阻碍质粒DNA在电场作用下发生迁移，且能有效地转染HepG2细胞，转染效率达30％～45％，辐照超声后转染效率明显提高（P〈0．05）。结论新型阳离子纳米泡在体外可作为基因转染载体，有效地携带质粒DNA并促进转染，辐照超声可使转染效率显著提高。
- 刘晓玲陈云超丁璐刘娜香张青萍
- 关键词：微气泡聚乙烯亚胺转染
