刘建
- 作品数：14 被引量：51H指数：4
- 供职机构：华中师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海大学中青年科研基金更多>>
- 相关领域：生物学文化科学理学政治法律更多>>
- 胶质细胞与神经元耦合动力学分析及胶质细胞网络的性质
- 刘建
- 关键词：星形胶质细胞神经元癫痫
- 普通高中学生学业评价中的发展性评价策略研究
- 在普通高中学生学业评价中实行发展性评价，是顺应时代发展潮流，响应新课程标准要求的有力举措。当今，随着知识经济时代的到来，国际人才竞争日益激烈，这给传统的教育理念和教育方式带来了巨大的冲击和压力。随着国家基础教育改革的进一...
- 刘建
- 关键词：高中学生学业评价新课程标准
- 文献传递
- 一株积聚四氢嘧啶的青海湖盐单胞菌的分离及特性被引量：4
- 2012年
- 从青海湖采集20份水样，利用RM高盐培养基分离获得35株嗜盐菌．选取其中一株优势中度嗜盐菌QHL25进行形态学和生理生化特征分析，结果表明：QHL25菌落圆形或椭圆形，乳白色，不透明，中心突出，边缘透明，生长盐度为0~2．9mol／L，最适生长盐度为1．45mol／L．显微形态呈短杆状，革兰氏染色呈阴性，单个或成串排列．最适生长pH为8．5，最适生长温度为37℃．16SrDNA序列分析表明：该菌株与盐单胞菌属（Halomonassp．）相似性为98％；结合形态特征和生理生化特征分析，初步认定该菌株隶属于y变形杆菌纲（Gammaproteobacteria）海洋螺菌目（Oceanospirillales）盐单胞菌科（Holomonadaceae）盐单胞菌属（Holomonas）．薄层层析（TLC）定性分析可知QHL25胞内含有相容溶质四氢嘧啶；高效液相色谱（HPLC）定量分析表明，在1．7mot／L的NaCl度下，四氢嘧啶含量约为36．70mg儋（细胞干重）．
- 刘建李丹丹杨芳芮昊晨沈国平刘德立朱德锐
- 关键词：盐单胞菌四氢嘧啶
- 青海湖嗜盐菌的分离与优势菌株QHL5的特性被引量：10
- 2012年
- 采用高盐选择性培养基从20份青海湖水样中筛选分离获得35株青海湖嗜盐微生物.耐盐梯度实验分析表明:水体中以中度嗜盐菌为主,约占65.7%;弱嗜盐菌次之,约占25.7%;非嗜盐菌与耐盐菌相对较少,约占8.5%.其中优势菌QHL5的生长盐度耐受范围为0.04～3.0 mol/L,最适生长范围为0.3～0.9 mol/L,隶属于中度嗜盐菌.菌体形态和生长特性分析表明:QHL5菌落大小为4～6 mm,圆形或椭圆形,边缘整齐厚实,乳白色,中间微隆起,不透明,革兰氏染色阴性.显微形态呈杆状,最适生长pH为8.5～9.5,最适生长温度为35℃.生理生化、16S rRNA的全序列Blast和系统发育分析表明:QHL5菌株分类定位于γ变形菌纲海洋螺菌目盐单胞菌属樊氏盐单胞菌(Halomonas ventosae).通过80%乙醇法抽提胞内相溶物质,采用TLC法检测出该菌积聚四氢嘧啶.
- 朱德锐刘建刘静静沈国平龙启福高翔刘德立
- 关键词：中度嗜盐菌TLC法四氢嘧啶
- 青海湖盐单胞菌Ectoine合成基因簇ectABC的重组共表达被引量：4
- 2015年
- 盐单胞菌属(Halomonas)通过胞内积聚有机相容溶质(Compatible solutes)来抵抗胞外的高盐渗透压。为了探究相容溶质Ectoine合成代谢相关基因的结构特征和异源共表达的可能性,以青海湖盐单胞菌Halomonas sp.QHL1为材料,通过高效液相色谱(HPLC)分析不同盐梯度下QHL1胞内Ectoine的积聚量,并借助于染色体步移技术(Genome walking)捕获QHL1菌株的Ectoine生物合成基因簇ect ABC,利用分子克隆技术分析ect ABC基因簇的异源重组表达(E.coli BL21)。研究结果表明:胞内Ectoine的积聚量随着培养基中Na+浓度的增加而增加,最大积聚量为167.1 mg/g细胞干重(1.0 mol/L Na+),但菌体生长却受到高浓度Na+的强烈抑制作用。QHL1的ect ABC操纵子全长序列为3580 bp,结构基因ect A(579 bp)、ect B(1269 bp)与ect C(390 bp)串联排列。基于生物信息学预测分析,两个启动子(δ70与δ38因子控制)和若干未知功能的保守模序(Motifs)存在于QHL1的ect操纵子上游。构建重组表达载体p ET-28-ect ABC,并在E.coli BL21中异源表达ect ABC基因簇(2438 bp)。SDS-PAGE结果显示Ect A、Ect B和Ect C分别为27.2、52.5和20.8 k D,与预测结果一致,表明ect A、ect B和ect C基因能在E.coli BL21中实现异源共表达,为构建Ectoine合成代谢基因整合的系统代谢工程,并实现低盐发酵控制和过量化生产提供了重要的理论基础。
- 朱德锐韩睿沈国平龙启福李丹丹刘建刘德立
- 关键词：盐单胞菌属ECTOINEECT结构基因共表达
- 10株青海湖盐单胞属菌株种间分子多样性分析被引量：1
- 2012年
- 目的对青海湖盐单胞属菌株进行种间分子多样性分析。方法利用PCR扩增青海湖10株盐单胞菌16S rDNA序列和16S-23S间隔序列,通过测序、Blast对比以及RFLP方法分析10株青海湖盐单胞菌的序列差异;并结合SDS-PAGE技术方法研究其全菌体蛋白的种间差异。结果通过测定16S rDNA序列同源性、分析16S-23S rDNA ISR多态性和比较全菌体蛋白SDS-PAGE谱带,确定了10株青海湖盐单胞菌在种间具有相对的一致性。结论初步验证了分子表型特性的多相研究对种单元初分类具有重要意义。
- 龙启福刘建韩睿沈国平朱德锐耿排力
- 关键词：盐单胞菌属RDNAPCR-RFLP16S-23S
- 青海湖嗜盐微生物系统发育与种群多样性被引量：25
- 2012年
- 青海湖是我国境内最大的内陆咸水湖泊,水体中嗜盐微生物的生存现状尚不明确。本研究利用OSM培养基(Oesterhelt-Stoeckenius medium),从湖域生境水样中富集和分离获得嗜盐微生物35株,以中度嗜盐菌为主,约占62.9%(22株);轻度嗜盐菌次之,约占22.9%(8株);耐盐菌与非嗜盐菌分别占11.4%(4株)和2.9%(1株)。根据16SrDNA序列的系统发育分析表明,γ-变形菌纲(γ-Proteobacteria)菌株最多,约占68.6%(24株);芽孢杆菌纲次之,约占17.1%(6株);放线菌纲、α-变形菌纲(α-Proteobacteria,1株)和散囊菌亚纲(Eurotiomycetidae,1株)的类群相对较少。这些嗜盐菌属于14个属,其中以海洋螺菌目盐单胞菌属(Halomonas)为优势种群,共计10株;其次为海单胞菌属(Marinomonas),共4株。中度嗜盐菌盐单胞菌属应为青海湖嗜盐菌的优势种群,可能因为相对偏低的盐度环境,为其长期进化和适应性生存提供了必要条件。
- 朱德锐刘建韩睿沈国平杨芳龙启福刘德立
- 关键词：嗜盐微生物系统发育种群多样性
- 青海湖盐单胞菌的分离及四氢嘧啶合成基因簇的克隆表达
- 嗜盐菌是指在高盐环境中生存的微生物的总称。在长期的进化过程中,嗜盐和耐盐微生物主要通过两种机制来维持细胞和周围环境的渗透压平衡,防止细胞脱水而裂解死亡,包括细胞质积累无机离子的方式和有机相容性溶质的机制。嗜盐古菌和极端嗜...
- 刘建
- 关键词：盐单胞菌四氢嘧啶染色体步移克隆表达
- 文献传递
- 高效液相色谱检测青海湖嗜盐菌胞内积聚的相溶物质四氢嘧啶被引量：12
- 2013年
- 从20份青海湖水样中,分离获得了35株中度嗜盐菌株.耐盐梯度实验表明:水体中以中度嗜盐菌为主,约占65.7%;弱嗜盐菌次之,约占25.7%;非嗜盐菌与耐盐菌相对较少,约占8.5%.采用80%乙醇法抽提中度嗜盐菌胞内的Ectoine,利用TLC和HPLC分析,结果表明:青海湖中度嗜盐菌中,大多数胞内积聚相溶物质Ectoine;在最适生长盐度下,中度嗜盐菌QHL1、QHL5、QHL10、QHL26和QHL28的胞内Ectoine含量分别为258.6μg·mL-1、325.47μg·mL-1、208.8μg·mL-1、292.31μg·mL-1和295.13μg·mL-1,以此初步获得5株具有Ectoine高产潜力的野生菌株.
- 李耀东龙启福李文军芮豪辰刘建杨芳朱德锐
- 关键词：中度嗜盐菌ECTOINE
- 基于“5E”教学模式的生物学核心概念教学策略研究
- 生命科学近几十年来取得的发展成就令人瞩目，已经成为21世纪最活跃的学科之一。这对我国生命科学领域人才培养的质量提出了更高的要求，我国基础教育领域的生物学教学改革更需与时俱进。 2018年初，教育部颁布的《普通高中生物学...
- 刘建
- 关键词：高中生物核心概念教学
