刘希君
- 作品数：28 被引量：36H指数：4
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 便捷式血压监测带
- 本实用新型公开了一种便捷式血压监测带，包括气囊，所述气囊下放设有2.5厘米长的拍拍尺，所述气囊两侧设有左侧绑带和右侧绑带，所述右侧绑带上设有插口，所述左侧绑带和右侧绑带上均设有魔术贴，所述左侧绑带和右侧绑带上均设有拉绳。...
- 王广友孙博李呼伦王丹丹王菁华孔庆飞穆莉莉刘玉梅刘希君张瑶张彤帅汪丹丹邹海峰刘心平
- 文献传递
- MMP-2和TIMP-2表达对人脑胶质瘤的影响
- 2007年
- 目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤的侵袭发展、分级之间的关系。方法采用RT-PCR方法对20例脑胶质瘤标本及10例正常脑组织进行了MMP-2、TIMP-2表达情况的检测。结果在高、低度恶性组中,MMP-2及TIMP-2的含量较正常对照组均有明显升高并有显著性差异(P<0.05),且高、低两组之间也有显著性差异(P<0.05)。另外,MMP-2/TIMP-2的比值在各组之间也有显著性差异(P<0.05)。结论MMP-2及TIMP-2对胶质瘤恶性程度的评估有重要意义。随着肿瘤细胞恶性程度的增高,MMP-2及TIMP-2的含量也相应增高,但TIMP-2不及MMP-2增高的明显。
- 陶海泉郭丽刘希君陈思佳
- 关键词：基质金属蛋白酶-2组织金属蛋白酶抑制剂-2胶质瘤
- TGF-β与IL-6介导的骨髓基质干细胞对EAE的双向调节作用研究被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)治疗中TGF-β与IL-6介导的骨髓基质干细胞(BMSCs)的双向调节作用与机制。方法:分离纯化BMSCs,并与EAE大鼠动物模型淋巴细胞共培养,应用抗TGF-β和IL-6单克隆抗体封闭TGF-β或IL-6通路,ELISA检测不同比例MSC与淋巴细胞共培养中对细胞因子的作用,流式细胞仪检测MSC对Th细胞亚群分化的影响,过继免疫临床评分检测BMSC治疗中的关键通路。结果:1:10比例BMSCs共培养组与对照组相比,IL-17分泌量下降(P<0.05),Treg细胞显著增高(P<0.05)而Th17细胞显著降低(P<0.05),共培养后的淋巴细胞进行过继免疫回输后,1:10干细胞共培养组临床评分显著降低(P<0.05),而1:100比例共培养组与上述结果相反,中和TGF-β和IL-6抗体可以调节此免疫作用。结论:BMSCs通过TGF-β和IL-6通路调节免疫系统调节性T细胞(Treg)和Th17的细胞平衡,此过程与BMSCs剂量密切相关,本研究可为干细胞更好的临床应用提供理论基础。
- 刘希君沈亚琪秦虹胡瑞雪王广友李呼伦
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎骨髓基质干细胞调节性T细胞TH17
- 慢病毒介导的稳定表达miR-23b的骨髓间充质干细胞株的建立被引量：1
- 2019年
- 目的通过慢病毒包装系统感染小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),建立能够稳定、高效表达microRNA-23b(miR-23b)的细胞株miR23b-BMSCs。方法从C57BL/6小鼠股骨及胫骨分离出来的原代BMSCs,经过多次传代培养,依然能保持干细胞特有的螺旋生长状态以及自我更新的潜能。利用带有pre-miR23b基因的质粒pEZX-MR03与pMDLg/pRRE、pRSV Rev、pLP/VSVG进行慢病毒包装,收集病毒液感染BMSCs,显微镜下观察带有eGFP荧光标记的间充质干细胞,利用嘌呤霉素(2.5μg/mL)进行药筛。结果成功筛选出稳定表达miR-23b的BMSCs,提取干细胞内RNA进行逆转录、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)进行表达鉴定。qPCR结果显示,过表达BMSCs组miR-23b的表达量较对照组BMSCs提高100倍(t=4.572,P<0.05)。结论利用慢病毒包装可以成功地将miR-23b整合到干细胞的基因组中,得到稳定表达miR-23b的小鼠BMSCs细胞株。这种基因改造的方法为干细胞移植治疗疾病提供了一种新的联合方法与治疗思路。
- 胡瑞雪吕玮琦李呼伦王广友刘玉梅孔庆飞穆莉莉刘希君
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 骨髓基质干细胞对过继免疫实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响及免疫调节机制
- 2010年
- 目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对过继免疫实验性自身免疫性脑脊髓炎(AT-EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法分离纯化培养BMSCs,建立EAE动物模型,在EAE动物模型发病高峰期取淋巴细胞,加入MBP刺激并与BMSCs共培养,并设未共培养的单纯MBP刺激对照组。将培养后的淋巴细胞对大鼠进行过继免疫回输,通过体外增殖实验,流式细胞仪检测以及体内临床评分评估BMSCs对EAE的治疗作用及其机制。结果BMSCs共培养MBP组与MBP组相比,淋巴细胞增殖明显被抑制,CD4+Foxp3+细胞显著增高而CD4+IL-17+细胞显著降低,培养后的淋巴细胞进行过继免疫回输后,干细胞共培养组临床评分显著降低(P<0.05)。结论BMSCs通过调节免疫系统的调节性T细胞(Treg)和Th17的细胞平衡,即上调调节性T细胞分化和下调Th17细胞功能,对EAE起治疗作用。
- 刘希君孙博王菁华王丹丹李呼伦孔庆飞白莎莎刘玉梅金连弘王广友
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎骨髓基质干细胞调节性T细胞TH17
- 模拟微重力诱导PC12细胞衰老的初步探讨被引量：1
- 2011年
- 目的:构建模拟微重力条件下PC12细胞的培养体系,探讨模拟微重力对PC12细胞衰老的影响。方法:用Cytodex-3型微载体作为PC12细胞的贴附载体,旋转细胞培养系统所提供10-2g的微重力环境进行模拟微重力条件下的细胞培养。在倒置显微镜下观察PC12细胞的生长情况;用扫描电镜观察PC12细胞超微结构的变化;衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)特异性染色对衰老的PC12细胞进行评估。结果:光镜下模拟微重力培养的PC12细胞表现出类衰老细胞的形态,扫描电子显微镜下观察发现其微绒毛增多。SA-β-gal染色的结果显示在模拟微重力的作用下,PC12细胞SA-β-gal的活性升高。结论:模拟微重力可以引起PC12细胞衰老样的形态变化,以及SA-β-gal的活性升高。
- 汪丹丹李呼伦王菁华刘怡希王广友孙博刘希君穆莉莉
- 关键词：细胞衰老模拟微重力PC12细胞
- 依帕司他在制备防治缺血性脑卒中的药物中的应用
- 本发明涉及依帕司他在制备防治缺血性脑卒中(脑梗死)的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明针对缺血性脑卒中发病早期及已经错过治疗时间窗、不能使用溶栓治疗的脑卒中患者，提供了依帕司他在制备防治缺血性脑卒中的药物中的应用。在...
- 王广友张彤帅钟镝汪丹丹张瑶王菁华孔庆飞张海玉孙博穆莉莉吴进荣李玄李晓波赵崴刘玉梅刘希君李呼伦汪嘉麒张思凡郎秀娟
- 电针治疗对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠体内产生细胞因子的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察电针刺激足三里穴位对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠体内分泌的细胞因子的影响。方法将免疫大鼠随机分为四组：用完全弗氏佐剂免疫组（CFA组）；用MBPB68-86B多肽与完全弗氏佐剂免疫组（EAE组）；用MBPB㈣。。多肽免疫后的大鼠电针刺激足三里穴位组和用MBPB68-86B多肽免疫后的大鼠电针刺激非穴位组。分别于免疫后第7天、14天和21天采用ELISA方法检测大鼠血浆中IFN-γ IL-4、IL-17、IL-6和TGF—β细胞因子水平。结果EA组与EAE组大鼠血浆中IL-4水平有所升高（第14天P=0．027，第21天P=0．36）；IFN-γ表达量在第14天EA组明显低于EAE组（P=0．00021）；IL-6在三个时间点EA组均明显低于EAE组（P=0．0078，P：0．00047，P=0．00093）；IL-17免疫21天，EA组明显低于EAE组（P=0．0012）；TGF—B在第7天和第14天EA组明显高于EAE组（P=0．020，P=0．041）结论电针刺激足三里穴位对EAE大鼠的治疗作用，通过降低炎症细胞因子的产生，促进抑炎细胞因子的产生而发挥作用。
- 刘玉梅白莎莎刘希君孔庆飞王丹丹王广友李呼伦
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎电针足三里细胞因子
- 慢病毒介导的过表达miR181a基因修饰的骨髓间充质干细胞系的建立
- 2021年
- 目的构建携带过表达miR181a的慢病毒载体,转染骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSC),使基因修饰后的BMSC持续高水平表达miR181a。方法将miR181a质粒与三种助转质粒PRSV,PRRE,VSVG共同转染进293T细胞中,构建含有增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)的过表达miR181a的慢病毒表达载体。72 h后收获过表达miR181a的病毒液,转染BMSC。用嘌呤霉素筛选,得到能够长期稳定过表达miR181a的BMSC,即miR181a-BMSC。结果成功构建出携带miR181a的慢病毒载体,转染率超过95%。嘌呤霉素筛选BMSC,得到能够长期稳定过表达miR181a的BMSC,与BMSC组相比,miR181a-BMSC组中,miR181a的表达量明显增多,差异具有统计学意义(3.80比25.92,t=19.401,P<0.05)。提取BMSC和miR181a-BMSC的外泌体,纯化后miR181a-BMSC的外泌体内miR181a表达量明显增高,差异具有统计学意义(1.41比0.87,t=6.003,P<0.05)。结论成功构建出慢病毒介导的过表达miR181a基因修饰的骨髓间充质干细胞。
- 吕玮琦胡瑞雪张思凡李呼伦刘玉梅穆莉莉孙博孔庆飞王广友刘希君
- 关键词：慢病毒载体
- HPV 6b L1基因原核表达系统的构建及鉴定被引量：2
- 2005年
- 克隆、构建人乳头瘤病毒6b型(HPV6b)L1基因重组质粒,并进行表达和鉴定。用PCR方法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV6b型L1基因,构建重组克隆质粒pblue-HPV6bL1,测序分析其基因变异。将本地株HPV6b型L1基因酶切后连接到原核表达质粒pBAD,构建原核表达系统pBAD-HPV6bL1/Top10,酶切鉴定证明重组质粒的正确性。经L-Arobinose诱导后表达HPV6b型L1蛋白,利用SDS-PAGE对表达产物进行鉴定。经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pBAD-HPV6bL1构建成功,诱导后能够表达L1融合蛋白。HPV6bL1重组质粒构建成功,并获得HPV6bL1蛋白,为该蛋白的功能及HPV的基因工程疫苗研究提供了物质基础。
- 刘希君庄敏商庆龙王燕魏兰兰李迪谷鸿喜
- 关键词：L1基因原核表达系统酶切鉴定质粒构建HPV基因重组质粒
