刘宝玲
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
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- EBV体外转化丙型肝炎病人PBMC中HCV持续存在的研究
- 1998年
- 丙型肝炎病毒(hepatitis c virus,HCV)感染的一个主要特征是病程慢性化并迁延发展。近年越来越多的研究显示,HCV感染单个核细胞在疾病发展过程中起着不容忽视的作用,与干扰素治疗后丙型肝炎的复发关系密切。HCV不仅具有亲肝细胞性,也有淋巴细胞嗜性。
- 程计林刘宝玲仝文斌高巍费然冯百芳陶其敏
- 关键词：PBMCHCV
- 甲型肝炎病毒性脑膜炎(附5例报告)被引量：1
- 1990年
- 既往人们认为,甲型肝炎病毒(HAV)不会引起慢性疾病,很少发生暴发型肝炎,无肝外表现,是一种良性和自限性疾病。然而,近年来不断有报告建议,应该对甲型肝炎重新进行评价和再认识。甚至有人把甲型肝炎病毒与疱疹病毒、
- 刘宝玲程计林
- 关键词：甲肝病毒脑膜炎
- 丙型肝炎病毒感染与淋巴细胞异常增生被引量：3
- 1998年
- 丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）不仅可以感染肝细胞，也可以侵入肝外多种组织和器官［１］，尤其其嗜淋巴细胞性［２］正在引起临床和基础研究者的关注，越来越多的文献显示，ＨＣＶ与淋巴细胞异常增生密切相关。一、丙型肝炎病毒与冷球蛋白血症在发现ＨＣＶ感染的病人和黑猩猩血...
- 程计林刘宝玲冯百芳
- 关键词：丙型肝炎HCV淋巴细胞异常增生冷球蛋白血症
- 丙型肝炎病毒Ⅱ型阳性PBMC永生化细胞株的生物学特性
- 2001年
- 目的 观察丙型肝炎病人外周血B细胞长期存活状态下其中是否仍有丙型肝炎病毒(HCV)存在 ,探讨建立HCV体外复制细胞模型的可能性。方法 利用EB病毒转化B淋巴细胞技术 ,建立丙型肝炎患者外周血单个核细胞 (PBMC )HCV阳性传代细胞株 (LCL) ,并应用细胞培养、染色体显示、流式细胞荧光染色、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫组化、原位RT PCR及电镜等技术研究其分子生物学和免疫学特性。结果 (1)LCL细胞核型 47,XX ,+mar,细胞表面CD19、CD2 0抗原阳性 ,CD2 1分子消失。 (2 )传代培养细胞中HCVRNA正链持续 12个月阳性 ,而培养上清中则呈间断性阳性 ,无明显规律。HCVRNA负链在LCL细胞中也呈间断阳性。HCV基因分型为Ⅱ型株。 (3)免疫组化、原位PCR和电镜发现HCV抗原蛋白、HCVRNA和病毒颗粒均存在于LCL细胞浆中 ;电镜发现HCV病毒颗粒呈圆球型 ,双层膜结构 ,定位于细胞胞质空泡内。直径多为 45～ 70nm ,个别为 110nm。结论 HCV可以在EB病毒转化病人B细胞株中长期存活、复制和分泌。
- 程计林仝文斌冯百芳陶其敏朱伟刘宝玲陈良标陈佩兰
- 关键词：丙型肝炎病毒丙型肝炎外周血单个核细胞B细胞生物学特性
- 丙型肝炎病毒高变区基因序列的变化被引量：1
- 2001年
- 目的 观察丙型肝炎患者外周血单个核细胞 (PBMC)体外长期存活状态下是否仍有丙型肝炎病毒 (HCV)存在及其不同时期高变区基因序列的变化。方法 用EB病毒感染并使HCV阳性PBMC转化 ,获得HCV的外周血永生化B细胞 (LCL)。而后 ,每个月应用逆转录 套式 聚合酶链反应 (RT net PCR)检测 1次培养细胞和上清液中的HCVRNA ,并用原位RT net PCR观察HCVRNA在细胞中存在的部位 ;应用基因测序技术分析LCL传代培养 1个月和 9个月后HCV高变区(HVR)核苷酸序列 ,并以原患者半年后血清作对照。结果 经连续 1年检测 ,HCV在传代细胞中持续存在 ,培养细胞中的HCVRNA负链和培养上清液中的HCV呈间断阳性 ;原位PCR发现HCVRNA阳性信号弥散性、簇状和团块状分布于胞浆中 ,细胞膜、核膜和细胞核阴性 ;患者血清HCV核苷酸变异集中在第 1491～ 15 83位核苷酸 (即 384～ 414位氨基酸 )和第 176 1～ 1781位核苷酸 (即 473～479位氨基酸 )两个区域 ,而LCL传代培养 1个月和 9个月后细胞中HCVHVR核苷酸同源性为99 .37%。结论 HCV可以在LCL中较长时间存在 。
- 程计林刘宝玲马文彬仝文斌高建恩冯百芳陶其敏魏来
- 关键词：丙型肝炎病毒B淋巴细胞高变区基因序列PBMC
